导读:本文包含了重组人结缔组织生长因子论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:重组慢病毒,人β-防御素3,结缔组织生长因子,骨髓间充质干细胞
重组人结缔组织生长因子论文文献综述
孙洁,钱智勇,刘静,张欣然,刘翠[1](2017)在《人β-防御素3与结缔组织生长因子共表达重组慢病毒载体的构建及表达》一文中研究指出目的体外构建共表达人β-防御素3(hBD3)与结缔组织生长因子(CTGF)的重组慢病毒,并检测其对骨髓间充质干细胞(BMSC)的转染效率及表达情况。方法体外构建携带hBD3、CTGF和增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因的重组慢病毒表达载体,测定病毒滴度。转染BMSC,确定最适感染倍数(MOI)值。采用荧光显微镜和流式细胞仪检测病毒的转染效率及传代稳定性。Western印迹检测目的蛋白的表达。结果经PCR和测序分析鉴定,成功构建了携带hBD3和CTGF基因的重组慢病毒载体Lenti-CTGF-hBD3-EGFP、Lenti-hBD3-EGFP和Lenti-EGFP,检测病毒滴度分别为3.21×10~8、5.80×10~8和1.16×10~9。病毒转染BMSC最适MOI值为150。荧光显微镜下,转染后BMSC绿色荧光效率高;流式细胞仪检测病毒的转染效率,Lenti-CTGF-hBD3-EGFP为79.72%,Lenti-hBD3-EGFP为83.08%,Lenti-EGFP为84.43%,且都稳定遗传。Western印迹显示目的蛋白表达成功。结论成功构建了共表达hBD3、CTGF的重组慢病毒载体,并能在BMSC中高效、稳定表达,为进一步研究hBD3与CTGF的应用奠定了基础。(本文来源于《军事医学》期刊2017年01期)
余琴,王乾华,赵磊,毕昊[2](2016)在《重组结缔组织生长因子shRNA质粒的构建及其对肝星状细胞基因表达的影响》一文中研究指出[目的]构建同时干扰大鼠结缔组织生长因子(CTGF)2个不同基因位点的shRNA质粒,并将其转染肝星状细胞(HSC),研究其对CTGF基因表达的影响。[方法]针对大鼠CTGF mRNA靶向序列设计并合成2对DNA模版序列,用PCR的方法将2条CTGF靶向特异性的shRNA分别链接到质粒pGenesil1.2载体的U6启动子和H1启动子。将构建的干扰质粒以阳离子脂质体法转染HSC-T6细胞,应用RT-PCR及Western Blot检测CTGF的表达。[结果]成功构建CTGF shRNA重组质粒;通过RT-PCR和Western Blot分析发现干扰质粒组的CTGF mRNA与蛋白表达水平明显下降(P<0.05)。[结论]重组CTGF shRNA能有效抑制HSC中CTGF的表达。(本文来源于《中国中西医结合消化杂志》期刊2016年10期)
田燕燕,杨烨,张园园,俞瑞,肖拉提·依马木明[3](2014)在《维生素D对2型糖尿病肾病大鼠肾脏中转化生长因子-β_1、重组人胶原蛋白-1和结缔组织生长因子表达的影响》一文中研究指出目的探讨维生素D对糖尿病肾病大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)和重组人胶原蛋白-1(collagen-1)表达的影响,进一步探讨以上3个基因在糖尿病肾病中相互作用以及维生素D对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用。方法将54只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组(18只)、模型组(18只)、治疗组(18只)。其中,模型组及治疗组大鼠均行糖尿病肾病造模,饲以高脂高糖饲料6周,空腹12 h后给予小剂量链腺佐菌素腹腔注射。注射1周后,不同日期测随机血糖(GLU)3次,若3次GLU均≥16.7 mmol/L为2型糖尿病大鼠。2型糖尿病成模后的大鼠在6周和7周时用尿微量蛋白试纸连续测大鼠晨尿3次以上,若为阳性,则为2型糖尿病肾病的大鼠。治疗组给予骨化叁醇溶于0.05 mL花生油以0.03μg/(kg·d)灌胃37 d,模型组给予花生油灌胃37 d。处死大鼠,取肾脏,采用HE、电镜技术观测肾脏组织的形态学变化,采用实时荧光定量PCR技术(RTPCR)评价肾脏TGF-β1、collagen-1及CTGF基因表达的变化。结果①模型组TGF-β1、collagen-1及CTGF基因表达高于正常对照组(P<0.05),治疗组TGF-β1、collagen-1及CTGF基因表达明显低于模型组(P<0.05)。②采用HE、电镜技术可以看出治疗组病理组织形态学,尤其是组织结构完整性明显优于模型组。结论糖尿病肾病大鼠中,维生素D可以通过下调TGF-β1、collagen-1及CTGF基因的表达,对糖尿病肾病起保护作用。(本文来源于《中国医药导报》期刊2014年17期)
李光明,颜士岩,王军,潘勤,范建高[4](2014)在《整合素连接激酶在重组结缔组织生长因子诱导大鼠肝星状细胞表型转化中的作用》一文中研究指出目的研究整合素连接激酶(ILK)在重组结缔组织生长因子(rCTGF)诱导大鼠原代肝星状细胞(HSC)表型转化中的作用。方法应用胶原酶原位灌注+密度梯度离心法分离SD大鼠原代HSC,细胞贴壁培养24 h后以rCTGF处理,24 h后转染ILK小干扰RNA(siRNA)或对照siRNA,设rCTGF对照及空白对照。应用RT-PCR及Western Blot检测转染siRNA 24、48及72 h时HSCα平滑肌肌动蛋白(αSMA)、ILK及I型胶原基因表达水平变化。计量资料采用t检验。结果与空白对照相比,rCTGF处理可显着上调大鼠HSCαSMA、ILK蛋白及I型胶原mRNA表达。转染ILK siRNA可特异性抑制rCTGF诱导的ILK表达上调,与rCTGF对照相比,转染ILK siRNA 24、48及72 h时,HSC ILK蛋白表达分别下调72%±6%(t=21.39,P<0.01)、87%±9%(t=68.25,P<0.01)及47%±3%(t=18.25,P=0.003);αSMA蛋白及I型胶原mRNA表达分别下调5%±1%(t=2.52,P>0.05)及6%±3%(t=1.63,P>0.05)、31%±7%(t=34.77,P<0.01)及20±5%(t=6.71,P<0.05)和67%±8%(t=58.82,P<0.01)及43%±6%(t=15.21,P<0.01);转染对照siRNA时,HSC ILK、αSMA及I型胶原mRNA表达在相同时点无显着变化。结论 ILK可能部分介导了rCTGF诱导的大鼠HSC表型转化。(本文来源于《临床肝胆病杂志》期刊2014年02期)
王苏,张晓薇,周明辉,李莉,曾爱群[5](2012)在《重组人结缔组织生长因子对大鼠脂肪源性干细胞Ⅰ型胶原蛋白合成及分化的影响》一文中研究指出目的探讨重组人结缔组织生长因子(hCTGF)对大鼠脂肪源性干细胞(ADSCs)分化及Ⅰ型胶原蛋白表达的影响。方法 2010年9月至2011年9月在广州医学院第一附属医院采用贴壁培养法分离纯化大鼠ADSCs,流式细胞仪分析第3代大鼠ADSCs表面抗原标记物;含100μg/L重组hCTGF的培养基作为刺激组,无重组hCTGF为对照组,分别培养7、14、28d后,RT-PCR和western-blot检测大鼠ADSCs中Ⅰ型胶原蛋白表达;观察重组hCTGF对大鼠ADSCs成骨、成脂方向分化的影响。结果大鼠ADSCs表面抗原CD44、CD90、CD105、CD49d阳性,CD34、CD45、CD106阴性;Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达量刺激组与对照组7、14、28d时分别为1.069±0.324vs.0.298±0.029、2.162±0.038vs.0.652±0.024、3.360±0.058vs.0.815±0.041,差异有统计学意义(P<0.05),Ⅰ型胶原蛋白的表达量7、14、28d时分别为0.761±0.041vs.0.679±0.029、0.834±0.115vs.0.708±0.061、0.774±0.180vs.0.720±0.026,差异有统计学意义(P<0.05)。结论重组hCTGF可上调大鼠ADSCsⅠ型胶原蛋白的表达,抑制大鼠ADSCs向成脂、成骨分化。推测重组hCTGF可能使大鼠ADSCs发生了向成纤维细胞定向分化。(本文来源于《中国实用妇科与产科杂志》期刊2012年05期)
江峰,岳斌,马学晓,张国庆,胡有谷[6](2012)在《人转化生长因子β3、结缔组织生长因子和基质金属蛋白酶抑制剂1基因重组慢病毒多表达质粒的构建及活性检测》一文中研究指出背景:前期试验显示单个病毒载体介导的多基因共表达系统能够显着提高椎间盘退变转基因疗效。目的:构建人转化生长因子β3、结缔组织生长因子和基质金属蛋白酶抑制剂1基因重组慢病毒多表达质粒。方法:应用全基因合成技术,以"自剪切多肽2A"串联目的基因,并克隆到慢病毒表达质粒构建重组慢病毒质粒Lenti-TGF-β3-P2A-CTGF-T2A-TIMP1。转染293细胞后,应用RT-PCR和Western-Blot技术分别检测转染后不同时间点目的基因mRNA和蛋白质表达水平。结果与结论:RT-PCR和Western-blot技术检测结果显示重组质粒成功表达了3种目的基因,并于转染后48h左右达到峰值,"2A"结构下游基因蛋白质表达量约为上游基因的80%。说明成功构建了携带人转化生长因子β3、结缔组织生长因子和基质金属蛋白酶抑制剂1基因的慢病毒多表达质粒。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2012年04期)
朱晓梅,张明满,康权[7](2011)在《重组腺病毒载体介导结缔组织生长因子对人胰腺癌细胞系的抑制作用》一文中研究指出目的:研究结缔组织生长因子(Connective tissue growth factor,CTGF)对人胰腺癌细胞(Pancreatic cancer cell-1,PANC-1)生长的影响。方法:采用重组腺病毒介导CTGF(Recombinant adenorirus mecliated CTGFr,Ad-CTGF)感染PANC-1,通过MTT法检测CTGF高表达状态下PANC-1的增殖能力改变,同时通过细胞迁移实验和肿瘤细胞集落形成实验观察PANC-1运动能力和集落形成能力的改变。结果:MTT实验表明rAd-CTGF在人PANC-1中高表达具有明显的生长抑制作用,肿瘤细胞迁移实验和集落形成实验表明rAd-CTGF在人PANC-1中高表达能抑制其迁移能力和集落形成能力。结论:结缔组织生长因子高表达具有抑制PANC-1的作用。(本文来源于《重庆医科大学学报》期刊2011年01期)
杜月光,万海同,李芳芳[8](2010)在《人重组骨形成蛋白-7对高糖诱导的肾系膜细胞转化生长因子-β_1及结缔组织生长因子表达的影响》一文中研究指出目的探讨人重组骨形成蛋白-7(rhBMP-7)对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CT-GF)基因表达及细胞外基质(ECM)成分Ⅳ型胶原(ColⅣ)和纤维黏连蛋白(FN)分泌的影响。方法体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分为四组:正常对照组(DMEM培养基含1 000 mg/L葡萄糖)、高糖组(DMEM培养基含4 500 mg/L葡萄糖)、rhBMP-7低剂量组(DMEM培养基含4 500 mg/L葡萄糖+50 nmol/L rhBMP-7)、rhBMP-7高剂量组(DMEM培养基含4 500 mg/L葡萄糖+100 nmol/L rhBMP-7)。RT-PCR技术检测TGF-β1和CTGF基因表达水平,ELISA技术检测上清液中TGFβ1、ColⅣ、FN含量。结果 高糖组系膜细胞TGF-β1和CTGF mRNA水平明显高于正常对照组(P<0.01),TGF-β1、ColⅣ和FN分泌增多,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);与高糖组比较,rhBMP-7不同剂量(50、100 ng/m l)TGF-β1和CTGFmRNA表达明显降低,培养上清中TGF-β1、ColⅣ及FN分泌量亦明显减少,且差异显着(P<0.05)。结论 RhBMP-7通过抑制高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞TGF-β1、CTGF基因表达和ECM的分泌可能起到抗纤维化作用。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2010年22期)
梁睿,康权,谭俊杰,赵利华,索涛莉[9](2010)在《沉默结缔组织生长因子基因重组腺病毒的构建及功能验证》一文中研究指出目的:构建沉默结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)基因的复制缺陷型重组腺病毒Ad-siCTGF,并进行功能验证。方法:选取已验证的能高效沉默CTGF基因的靶序列,克隆入载体pSES-HUS中;将质粒线性化处理后与腺病毒骨架质粒pAdEasy共同转染大肠埃希菌BJ5183,构建重组腺病毒载体Ad-siCTGF;腺病毒载体用PacI酶切线性化处理后转染HEK293细胞,包装重组腺病毒;采用"乒乓交互感染法"提高病毒滴度。用此病毒感染4T1细胞,行实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative-PCR,RFQ-PCR)及Western印迹法验证其沉默效果。结果:PacI酶切电泳证实重组腺病毒载体Ad-siCTGF构建成功,扩增纯化后测定重组病毒Ad-siCTGF的滴度为2.6×1010pfu/mL。感染此病毒后,4T1细胞中CTGF mRNA表达水平下调至36.27%,蛋白表达水平下调至31.56%。结论:成功构建能沉默CTGF基因的重组腺病毒,为进一步研究CTGF在肿瘤中的作用机制奠定了基础。(本文来源于《肿瘤》期刊2010年03期)
周凌,刘必成[10](2009)在《重组人结缔组织生长因子对肾小管上皮细胞表达α5β1整合素及纤连蛋白的影响》一文中研究指出目的:研究在不同情况下,重组人结缔组织生长因子(rhCTGF)对肾小管上皮细胞(HK-2)表达α5β1整合素及纤连蛋白(F ibronectin,FN)水平的影响。方法:rhCTGF以0、50 ng.mL-1干预HK2,采用免疫细胞化学检测,观察α5β1整合素的表达情况。rhCTGF以0、5、50 ng.mL-12天干预HK-2,观察rhCTGF对纤连蛋白的表达影响的浓度效应;rhCTGF以10 ng.mL-1于0、24、48、72小时干预HK-2,观察rhCTGF对纤连蛋白的表达影响的时间效应;免疫印记检测纤连蛋白的表达水平。结果:在基础状态下,肾小管上皮细胞仅有少量α5β1整合素表达,50 ng.mL-1rhCTGF可使α5β1整合素表达量显着增加(P<0.05)。在基础状态下,人近端肾小管上皮细胞表达少量纤连蛋白。5 ng.mL-1rhCTGF可使纤连蛋白表达量显着增加(P<0.05),随着rhCTGF浓度增加,蛋白表达也进一步增加,呈现浓度依赖性变化效应。rhCTGF刺激24 h,近端小管上皮细胞纤连蛋白表达开始增加,48、72 h进一步增加,呈现时间依赖效应。结论:rhCTGF能使近端小管上皮细胞表达α5β1整合素水平显着增加。rhCTGF呈时间及浓度依赖性诱导人近端肾小管上皮细胞纤连蛋白表达。(本文来源于《药学与临床研究》期刊2009年03期)
重组人结缔组织生长因子论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
[目的]构建同时干扰大鼠结缔组织生长因子(CTGF)2个不同基因位点的shRNA质粒,并将其转染肝星状细胞(HSC),研究其对CTGF基因表达的影响。[方法]针对大鼠CTGF mRNA靶向序列设计并合成2对DNA模版序列,用PCR的方法将2条CTGF靶向特异性的shRNA分别链接到质粒pGenesil1.2载体的U6启动子和H1启动子。将构建的干扰质粒以阳离子脂质体法转染HSC-T6细胞,应用RT-PCR及Western Blot检测CTGF的表达。[结果]成功构建CTGF shRNA重组质粒;通过RT-PCR和Western Blot分析发现干扰质粒组的CTGF mRNA与蛋白表达水平明显下降(P<0.05)。[结论]重组CTGF shRNA能有效抑制HSC中CTGF的表达。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
重组人结缔组织生长因子论文参考文献
[1].孙洁,钱智勇,刘静,张欣然,刘翠.人β-防御素3与结缔组织生长因子共表达重组慢病毒载体的构建及表达[J].军事医学.2017
[2].余琴,王乾华,赵磊,毕昊.重组结缔组织生长因子shRNA质粒的构建及其对肝星状细胞基因表达的影响[J].中国中西医结合消化杂志.2016
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[5].王苏,张晓薇,周明辉,李莉,曾爱群.重组人结缔组织生长因子对大鼠脂肪源性干细胞Ⅰ型胶原蛋白合成及分化的影响[J].中国实用妇科与产科杂志.2012
[6].江峰,岳斌,马学晓,张国庆,胡有谷.人转化生长因子β3、结缔组织生长因子和基质金属蛋白酶抑制剂1基因重组慢病毒多表达质粒的构建及活性检测[J].中国组织工程研究.2012
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[8].杜月光,万海同,李芳芳.人重组骨形成蛋白-7对高糖诱导的肾系膜细胞转化生长因子-β_1及结缔组织生长因子表达的影响[J].中国老年学杂志.2010
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[10].周凌,刘必成.重组人结缔组织生长因子对肾小管上皮细胞表达α5β1整合素及纤连蛋白的影响[J].药学与临床研究.2009