血管内皮祖细胞在牙移动牙周组织改建中的作用及机制研究

论文摘要

牙周组织的改建水平是决定正畸牙移动快慢的关键因素。有关促进牙周组织改建、缩短正畸疗程的研究一直是口腔正畸学领域的研究热点。基于血管形成在骨组织改建中的核心作用以及血管内皮祖细胞（endothelial progenitor cells, EPCs）可促进缺血组织新血管形成的生物学特性,本课题以“血管内皮祖细胞在牙移动牙周组织改建中的作用及机制研究”为题目,利用吉林大学种子基金课题（编号:419070401431）的资助,通过一系列体内、体外实验,观察研究了正畸牙移动刺激骨髓EPCs动员进入外周血、继而趋化分化参与牙周组织血管改建和促进牙周骨组织改建的作用情况,并初步探讨由机械力引起的牙周组织改建对EPCs动员、趋化、分化的分子信号机制。首先,于实验性牙移动大鼠模型加力后第一天分离其外周血单核细胞,通过流式细胞术和免疫细胞化学染色检测外周血单核细胞数目变化;对分离的单核细胞进行体外培养,经细胞表面标志检测并结合细胞生物学行为观察,结果表明实验性牙移动大鼠外周血EPCs数目增多,并可通过体外培养扩增。其次,在完成探索BrdU标记EPCs的最佳剂量和时间、观察同种异体移植EPCs参与大鼠皮肤损伤区血管形成情况的研究基础上,于尾静脉回输经BrdU标记的EPCs,采用免疫组织化学、免疫荧光化学观察EPCs参与实验性牙移动大鼠体牙周血管改建情况;通过化学比色、免疫组织化学、MTT等方法观察VEGF和内皮型一氧化氮合酶（eNOS）对EPCs生物功能的影响,初步探讨牙周改建动员EPCs并使其趋化、分化的信号机制。最后,通过免疫组织化学、组织化学染色分析移植EPCs后对牙移动牙周骨组织改建作用的影响。本研究发现与对照组相比,EPCs可影响牙周组织早期血管内皮生长因子（VEGF）、碱性磷酸酶、骨形成蛋白-2（BMP-2）的表达,说明EPCs对牙周血管改建和骨改建具有一定促进作用;牙周组织表达的VEGF和eNOS可能参与EPCs的动员、趋化、分化调控。本研究首次分离培养了实验性牙移动大鼠外周血EPCs,并在体内观察研究EPCs对牙周血管改建和骨改建的影响作用,为正畸临床提高牙周组织改建水平、加速正畸牙移动速度提供新的思路。

论文目录

• 提要
• 英文缩略词表
• 前言
• 第1篇 文献综述
• 第1章 正畸牙移动牙周组织生物学改建
• 1.1 正畸牙移动牙周组织的改建
• 1.2 血管形成与骨形成
• 第2章 血管内皮祖细胞的研究进展
• 2.1 细胞来源和定义
• 2.2 血管内皮祖细胞与血管形成
• 2.3 血管内皮祖细胞与骨形成
• 第3章 论文工作设想
• 第2篇 实验研究
• 第1章 大鼠外周血血管内皮祖细胞的分离、培养及鉴定
• 1.1 材料与方法
• 1.2 结果
• 1.3 讨论
• 1.4 小结
• 第2章 血管内皮祖细胞对牙周组织血管改建影响的体内研究
• 实验1 BrdU 标记实验性牙移动大鼠血管内皮祖细胞的研究
• 1.1 材料与方法
• 1.2 结果
• 1.3 讨论
• 1.4 小结
• 实验2 血管内皮细胞参与大鼠创伤皮肤血管改建的研究
• 2.1 材料与方法
• 2.2 结果
• 2.3 讨论
• 2.4 小结
• 实验3 血管内皮祖细胞向牙周组织趋化及影响牙周血管改建的研究
• 3.1 材料与方法
• 3.2 结果
• 3.3 讨论
• 3.4 小结
• 实验4 血管内皮祖细胞参与牙周血管改建机制的初步研究
• 4.1 材料和方法
• 4.2 结果
• 4.3 讨论
• 4.4 小结
• 第3章 血管内皮祖细胞对大鼠牙周骨组织改建影响的研究
• 实验1 共培养条件下外周血内皮祖细胞对成骨细胞的影响
• 1.1 材料和方法
• 1.2 结果
• 1.3 讨论
• 1.4 小结
• 实验2 体内观察血管内皮祖细胞对移动牙牙周骨组织改建的影响
• 2.1 材料和方法
• 2.2 结果
• 2.3 讨论
• 2.4 小结
• 结论
• 参考文献
• 博士期间发表学术论文及其他成果
• 致谢
• 中文摘要
• Abstract