重组人血管内皮抑制素联合化疗药物治疗乳腺癌的动物实验研究

论文摘要

目的:通过动物实验研究重组人血管内皮抑制素（恩度）联合顺铂对人乳腺癌细胞系MCF-7裸鼠肿瘤生长的抑制作用,观察恩度治疗乳腺癌裸鼠皮下种植瘤的疗效,为恩度在治疗乳腺癌中应用提供理论依据。方法:建立裸鼠MCF-7乳腺癌模型分组给药,观察肿瘤生长状况,给药20天后取肿瘤和肺脏肝脏,HE染色检测肿瘤脏器转移情况;反转录聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫印迹（weatern-bloting）分别在基因和蛋白水平检测瘤组织VEGF的表达情况;流式细胞仪检测组织内肿瘤细胞凋亡状况。结果:1. 40只裸鼠全部成瘤,成瘤率达100%。肿瘤早期为椭圆形,表面光滑,后期呈不规则形,有的表面可见结节呈菜花样,富含血管。2.顺铂联合恩度治疗组裸鼠肿瘤体积较顺铂组、恩度组和生理盐水组明显缩小,有显著性差异（P < 0.05）,顺铂组较恩度组肿瘤体积也明显缩小,有显著性差异（P < 0.05）。各组间抑瘤率也有显著性差异（P < 0.05）。顺铂联合恩度组、阳性对照组、恩度治疗组、阴性对照组肿瘤体积95%CI分别为（0.6506-0.7113） cm3、（1.1207-1.3565） cm3、（1.5549-2.1591）cm3、（3.0017-3.7544）cm3;用药组抑瘤率分别为92.1%、57.3%、36.5%。3.各组肺转移率分别为:0、5%、20%、90%,各组间均有统计学差异（P < 0.05）。4.一般性观察实验前各组裸鼠一般状态良好;实验结束时40只裸鼠全部存活。通过食物每日剩余观察发现,阴性对照组裸鼠进食明显日渐减少;阳性对照组裸鼠消瘦严重,治疗组裸鼠觅食、饮水、活动等状况良好,未发现腹泻、淤血等现象。5.反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测瘤组织中VEGF表达水平:通过在凝胶成像系统下观察可见对照组和药物组均有VEGF、GAPDH的表达,经Lab-work软件分析联合用药组VEGF表达较弱,阴性对照组表达较强。方差分析各组间均有统计学差异（P < 0.04）。6.免疫印迹（weatern-bloting）蛋白水平检测瘤组织VEGF的表达情况,ECL （ enhanced chemi luminescence）显色观察结果经Lab-work软件分析联合用药组VEGF表达较弱,阴性对照组表达较强,分析各组间蛋白表达均有统计学差异（P < 0.04）。7.流式细胞仪检测组织内肿瘤细胞凋亡状况,联合用药组的细胞凋亡率均数为31.6%,高于阴性对照组15.7%,通过方差分析各组存在显著差异（P<0.01）。结论:1.恩度可以抑制裸鼠乳腺癌肿瘤生长,且没有明显的毒副作用,但是单药应用就控制肿瘤生长速度方面效果不及顺铂。2.恩度对裸鼠乳腺癌远处器官转移有抑制作用。3.联合应用恩度和顺铂能提高恩度治疗乳腺癌的疗效,且能降低顺铂的毒副作用保证裸鼠较好的生存状态延长其生存期。

论文目录

• 一、正文
• （一） 中文摘要
• （二） 英文摘要
• （三） 前言
• （四） 材料和方法
• （五） 结果
• （六） 讨论
• （七） 结论
• （八） 参考文献
• 二、文献综述
• （一） 综述
• （二） 参考文献
• 三、致谢