蓝狐自咬症及遗传学基础研究

论文摘要

蓝狐是世界上广泛饲养的珍贵毛皮动物,狐皮是制作高档裘皮服装和饰品的重要原料。自咬症的发生,严重影响了蓝狐的生长发育和毛皮质量,给蓝狐养殖业带来巨大的经济损失。本研究从行为学、环境因素、遗传因素等方面分析自咬症的发病机理,筛选自咬症蓝狐RAPD分子标记,探讨DRD1、DRD2、5-HT1AR候选基因与自咬症的关联性。主要结果如下:1.选用体重相近的健康蓝狐90只（公母各半）,其中试验组60只,对照组30只,模拟蓝狐在饲养管理过程中不良环境,采用摇床、转移栋舍、限制、拥挤、饥饿、休息等6种不同的应激诱导方式并结合10种血液生化指标探讨蓝狐自咬症的发病原因。应激诱导30d,试验组血清中GPT、ALP、GSH-PX和CAT活性极显著低于对照组（P<0.01）,MDA含量显著低于对照组（P <0.05）,SOD活性极显著高于对照组（P<0.01）;应激诱导60d,ALP、CK、GSH-PX、CAT和MDA活性极显著高于对照组（P<0.01）,SOD活性极显著低于对照组（P<0.01）,GPT活性显著低于对照组（P<0.05）;GOT、LDH、GLU活性在整个应激诱导过程中没有显著差异（P>0.05）;应激诱导组与对照组蓝狐自咬症发病率没有显著差异（P>0.05）。2.选用4只健康蓝狐和4只自咬蓝狐相间放置,用监控摄像头进行行为学观察,在蓝狐的各类行为中,所占观测时间百分比由高到低依次为趴卧、走动、玩耍、采食、站立、梳理、抖毛;健康蓝狐的趴卧行为、玩耍行为明显高于自咬蓝狐;走动、抖毛和梳理行为明显低于自咬蓝狐。自咬蓝狐单次自咬持续时间在10秒钟以下的占70%以上,超过40秒的在5%以下;病情较重的自咬蓝狐自咬次数和持续时间都明显高于病情较轻的蓝狐。3.选用自咬蓝狐15只,健康蓝狐10只,分为三组进行繁殖,探讨自咬症与遗传的关系,并对试验基地蓝狐自咬发生情况进行统计分析。试验基地蓝狐自咬发病时间主要集中在810月份,基地蓝狐群的发病率为2.28%,发病较高的栋舍达4.17%,环境应激诱导试验群发病率为5.56%。30天分窝,自咬蓝狐存活的2窝后代全部自咬,发病率为100%,最早出现自咬的时间为44日龄,2窝健康蓝狐后代发病率为16.67%,蓝狐自咬症的发生受遗传影响比受环境影响要大。4.以DRD1、DRD2、5-HT1AR基因为候选基因,采用直接测序方法探讨基因多态性与自咬症的关联。克隆测序得到蓝狐DRD1、DRD2、5-HT1AR基因部分外显子序列长度分别为864bp、819bp和611bp。在DRD1、DRD2、5-HT1AR基因部分外显子序列共检测到8个突变位点,其中DRD1基因T206C位点处碱基突变导致的基因多态与蓝狐自咬症有极显著关联（P<0.01）;DRD2基因T356C位点、DRD2基因T457C位点、5-HT1AR基因C351G位点处碱基突变导致的基因多态与蓝狐自咬症有显著关联（P<0.05）;DRD1基因C314T位点、DRD1基因C668T位点、DRD2基因G115A位点、DRD2基因G400T位点处碱基突变导致的基因多态与蓝狐自咬症没有关联（P>0.05）。5.采用RAPD技术,研究与自咬症紧密连锁的遗传标记,从120条随机引物中,筛选出30条能产生清晰、稳定扩增产物且具多态性的随机引物,在自咬和健康蓝狐群中多态率为39.17%。其中6条随机引物在健康蓝狐和自咬蓝狐DNA池扩增出了差异条带,经个体验证,引物S472、S485在健康蓝狐和自咬蓝狐出现差异条带的个体数量差异达极显著水平（P<0.01）,可以用作蓝狐自咬症的分子标记。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 引言
• 1.1 蓝狐概述
• 1.1.1 蓝狐的生物学特性
• 1.1.2 蓝狐的经济学价值
• 1.1.3 我国蓝狐养殖现状
• 1.2 动物异常行为及发病原因
• 1.2.1 异常行为的分类
• 1.2.2 异常行为的发病原因
• 1.3 毛皮动物自咬症研究概况
• 1.3.1 自咬症的定义
• 1.3.2 自咬症的发病原因
• 1.3.3 自咬症的研究现状
• 1.4 多巴胺受体基因研究进展
• 1.4.1 多巴胺
• 1.4.2 多巴胺信号通路的神经解剖学基础
• 1.4.3 多巴胺受体的组成及功能
• 1.4.4 多巴胺受体基因及结构
• 1.4.5 多巴胺受体与信号转导途径
• 1.4.6 多巴胺及其受体的作用机制
• 1.4.7 多巴胺受体的分布
• 1.4.8 多巴胺及其受体的功能
• 1.5 5-羟色胺受体基因研究进展
• 1.5.1 5-HT 及其受体的分布
• 1.5.2 5-HT1A 受体的结构及功能
• 1.5.3 5-HT 与自咬行为的关系
• 1.6 RAPD 研究进展
• 1.6.1 RAPD 技术的原理
• 1.6.2 RAPD 技术在动物育种中的应用
• 1.6.3 RAPD 技术在犬科动物上的应用
• 1.7 研究目的与意义
• 第二章 应激诱导对蓝狐血液生化指标及自咬症的影响
• 2.1 材料和方法
• 2.1.1 试验动物
• 2.1.2 应激诱导试验
• 2.1.3 检测指标
• 2.1.4 主要仪器设备
• 2.1.5 主要试剂
• 2.1.6 数据统计分析
• 2.2 结果与分析
• 2.2.1 自咬发生情况
• 2.2.2 血清生化指标
• 2.3 讨论
• 2.3.1 应激诱导模型的建立
• 2.3.2 应激诱导对蓝狐自咬症的影响
• 2.3.3 应激诱导对蓝狐血清指标的影响
• 2.4 结论
• 第三章 自咬蓝狐和健康蓝狐行为研究
• 3.1 行为观察方法和行为参数
• 3.1.1 材料与方法
• 3.1.2 行为参数
• 3.2 行为学观察试验数据分析
• 3.2.1 行为数据的分析方法
• 3.2.2 结果与分析
• 3.3 讨论
• 3.4 结论
• 第四章 蓝狐自咬与遗传的关系
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 试验动物
• 4.1.2 试验方法
• 4.2 结果与分析
• 4.2.1 配种结果
• 4.2.2 繁殖结果
• 4.2.3 蓝狐群体自咬症发病率
• 4.2.4 遗传对自咬症发生的影响
• 4.3 讨论
• 4.3.1 自咬对繁殖的影响
• 4.3.2 早期分窝和遗传与自咬的关系
• 4.4 结论
• 第五章 蓝狐自咬症候选基因的多态性分析
• 5.1 材料与方法
• 5.1.1 试验材料
• 5.1.2 试验方法
• 5.2 蓝狐DRD1 基因多态性的检测与分析
• 5.2.1 蓝狐DRD1 基因克隆测序
• 5.2.2 DRD1 基因同源性比对和分析
• 5.2.3 蓝狐DRD1 基因多态性的检测分析
• 5.3 蓝狐DRD2 基因多态性的检测与分析
• 5.3.1 蓝狐DRD2 基因克隆测序
• 5.3.2 DRD2 基因同源性比对和分析
• 5.3.3 蓝狐DRD2 基因多态性的检测分析
• 1AR 基因多态性的检测与分析'>5.4 蓝狐5-HT_1AR 基因多态性的检测与分析
• 1A R 基因克隆测序'>5.4.1 蓝狐5-HT_1A R 基因克隆测序
• 1AR 基因同源性比对和分析'>5.4.2 蓝狐5-HT_1AR 基因同源性比对和分析
• 1AR 基因多态性的检测分析'>5.4.3 蓝狐5-HT_1AR 基因多态性的检测分析
• 5.5 讨论
• 5.5.1 蓝狐DRD1 基因多态性分析
• 5.5.2 蓝狐DRD2 基因多态性分析
• 1AR 基因多态性分析'>5.5.3 蓝狐5-HT_1AR 基因多态性分析
• 5.6 结论
• 第六章 蓝狐自咬症RAPD 标记的筛选与分析
• 6.1 材料与方法
• 6.1.1 试验材料
• 6.1.2 试验方法
• 6.2 结果与分析
• 6.2.1 RAPD 随机引物的筛选
• 6.2.3 重复性试验
• 6.2.4 个体验证
• 6.3 讨论
• 6.3.1 群体遗传变异系数分析
• 6.3.2 RAPD 标记与致病基因的相关性分析
• 6.3.3 RAPD 标记
• 6.4 结论
• 第七章 全文结论
• 7.1 结论
• 7.2 创新点
• 7.3 未来工作设想
• 参考文献
• 致谢
• 作者简历