论文题目: 内生真菌及其诱导子与长春花悬浮细胞生物碱合成代谢相关性研究
论文类型: 硕士论文
论文专业: 生物化学与分子生物学
作者: 周敏
导师: 饶力群
关键词: 长春花,悬浮细胞,生物碱,内生真菌,诱导子,信号传导途径
文献来源: 湖南农业大学
发表年度: 2005
论文摘要: 近年来,有许多文献资料报道:内生真菌能够影响植物次生代谢物质的合成:在利用植物细胞培养生产次生代谢物时,添加诱导子是提高植物次生代谢有效的方法之一。本实验在分离长春花内生真菌的基础上,以内生真菌及其诱导子对长春花悬浮细胞进行诱导处理,就它们之间的相互作用及与长春花悬浮细胞生物碱合成代谢的相关性等方面进行初步探讨,研究结果如下: 1.从长春花茎中分离到11株内生真菌,都属于镰刀菌属。通过液体培养,其培养液和菌丝提取物都没有检测到长春花生物碱。 2.分离得到的11株内生真菌及其诱导子处理能不同程度地影响长春花悬浮培养细胞中生物碱的产量。其中编号为9号的内生真菌及其诱导子效果优于其它真菌,诱导子的处理效果又优于内生真菌与悬浮细胞共培养的效果。诱导子处理的最佳浓度为1μg/ml,总生物碱的产量达到了768.35μg/gFW,约为对照的1.5倍。 3.内生真菌及其诱导子处理长春花悬浮细胞后,悬浮细胞生物碱代谢中的关键酶PAL、TDC活性增强,总的生物碱产量得到提高。悬浮细胞中总的可溶性蛋白质含量增加。同时,发生一系列的防御性应答反应,细胞的氧化还原态势发生了明显变化,培养基发生碱化现象,膜脂过氧化产物MDA含量大幅提高。说明生物碱合成代谢的增强与细胞态势的改变有关,细胞态势的改变导致了细胞代谢结构的改变,使流向生物碱合成的代谢物流增加。 4.真菌诱导子和色氨酸协同作用,能增强生物碱代谢中的关键酶PAL、TDC活性,提高生物碱产量,总生物碱含量达到843.90μg/gFW,为对照的约1.6倍,诱导组约1.2倍。 5.用高碘酸钠和木瓜蛋白酶分别处理内生真菌诱导子后,再加入长春花悬浮细胞中,最终确定内生真菌诱导子中诱导活性成分是寡糖类物质。 6.硫酸锂、新霉素、肌醇能调节三磷酸肌醇信号传导,利用它们来探讨三磷酸肌醇信号传导与生物碱合成的关系。结果显示,它们能不同程度地调节生物碱合成途径中的关键酶活性及生物碱产量,表明在内生真菌诱导子诱导长春花悬浮细胞过程中,三磷酸肌醇信号传导与长春花生物碱合成成正相关。
论文目录:
摘要
ABSTRACT
缩略词表
第一章 前言
1 引言
2 药用植物内生真菌的研究进展
2.1 内生真菌与宿主植物之间的关系
2.1.1 影响宿主植物的生长发育
2.1.2 增强宿主植物的抗逆性
2.1.3 内生真菌与植物的次生代谢有关
2.2 药用植物内生真菌的研究进展
2.2.1 产抗癌药物的内生真菌
2.2.2 产球毛壳甲素A的内生真菌
2.2.3 产抗生素的内生真菌
2.2.4 产具有免疫抑制活性物质的内生真菌
2.2.5 产香料物质的内生真菌
2.2.6 其它药用植物内生真菌的研究
3 诱导子作用及在调节植物次生代谢方面的应用
3.1 诱导子的定义
3.2 真菌诱导子的分类
3.2.1 寡糖类
3.2.2 糖蛋白类
3.2.3 蛋白质类
3.2.4 不饱和脂肪酸类
3.3 真菌诱导子对植物次生代谢合成途径的影响
3.3.1 苯丙烷类生物合成途径
3.3.2 类异戊二烯生物合成途径
3.4 真菌诱导子在植物组织培养中对次生代谢调节作用的研究进展
3.4.1 用于诱导作用的真菌诱导子
3.4.2 真菌诱导子在植物组织培养中的应用
4 本研究目的与意义
参考文献
第二章 长春花内生真菌的分离、鉴定及代谢产物的研究
1 前言
2 材料和方法
3 结果与分析
4 讨论
参考文献
第三章 内生真菌及其诱导子对长春花悬浮细胞态势及生物碱合成的影响
1 前言
2 材料和方法
3 结果与分析
4 讨论
参考文献
第四章 色氨酸与诱导子协同作用对长春花悬浮细胞生物碱合成的影响
1 前言
2 材料和方法
3 结果与分析
4 讨论
参考文献
第五章 真菌诱导子诱导活性成分的研究
1 前言
2 材料和方法
3 结果与分析
4 讨论
参考文献
第六章 IP_3信号传导与生物碱合成的关系
1 前言
2 材料和方法
3 结果与分析
4 讨论
参考文献
结论
附图
作者简介
致谢
发布时间: 2005-08-15
参考文献
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