雌孕激素对雷公藤多苷致雌鼠生殖系统损害的保护作用

论文摘要

背景与目的雷公藤多苷（tripterygium wilfordii polyglycosidium,TWP）是从雷公藤的去皮根中提取并反复精制而成的药物,在临床应用较广,主要用于治疗类风湿关节炎、肾脏疾病、系统性红斑狼疮等,但其不良反应特别是对生殖系统的损害限制了其应用。雌孕激素替代治疗（hormone replacement therapy,HRT）是临床上对进入围绝经期或因手术、放化疗损伤卵巢功能患者替代治疗的常用方法。有研究发现Fas-FasL系统表达于包括人、大鼠在内大多数生物的卵巢颗粒细胞上,参与颗粒细胞的凋亡。本研究旨在探讨HRT对TWP致雌鼠生殖系统损害的保护作用,并从颗粒细胞上凋亡基因的表达情况探讨其可能机制。方法选出有正常动情周期的雌性大鼠60只,随机分为3组:对照组、雷公藤多苷组（TWP组）、联合用药组（TWP伍用雌、孕激素序贯性替代治疗,TWP+HRT组）,分别灌胃12w,TWP组予TWP 12mg’kg-1’d-1,对照组予同等剂量的溶媒,TWP+HRT组除每天灌胃TWP 12mg’kg-1’d-1外,另予HRT(即戊酸雌二醇片0.12mgmg’kg-1’d-1灌胃3天后,加醋酸甲轻孕酮片0.96mg’kg-1’d-1联用1天,共同停药1天,后继续此循环至12周)。大鼠子宫卵巢的重量由电子天平测定,动情周期由巴氏染色观察大鼠阴道脱落细胞学变化,血清雌激素（estrogen,E2）、卵泡刺激素（follicle-stimulatinghormone,FSH）、黄体生成素（luteinizing hormone,LH）水平由放射免疫法测定,苏木素伊红（hematoxylin and eosin,HE）染色对卵巢子宫的病理变化作形态学观察,卵巢颗粒细胞上凋亡基因Fas及FasLmRNA的表达由逆转录聚合酶链式反应（reversetranscriptase polymerase chain reaction,RT-PCR）测定。结果（1）各组大鼠的一般指标的变化与对照组相比,TWP组大鼠大多动情周期延长或紊乱（P＜0.05,提示差异有统计学意义）,血清E2降低（P＜0.05）,血清FSH及LH上升（P＜0.05）,卵巢及子宫相对重量明显下降（P＜0.05）;而TWP+HRT组无明显改变（P＞0.05,提示差异无统计学意义）。（2）光镜下形态学观察与对照组相比,TWP组光镜形态学观察可见卵巢萎缩,各级卵泡减少,黄体退化萎缩,子宫内膜变薄,腺体减少,胶原纤维的增多;而TWP+HRT组与对照组相似。（3）各组大鼠颗粒细胞上凋亡基因Fas及FasL的表达本实验研究发现Fas及FasL基因均表达于卵巢颗粒细胞上。与对照组相比,TWP组及TWP+HRT组大鼠颗粒细胞上凋亡基因FasL的表达无明显差异（P＞0.05,提示差异无统计学意义）。结论在TWP治疗的同时伍用HRT可减少TWP对雌鼠生殖系统的损伤,保护卵巢功能。

论文目录

• 英文缩略词
• 中文摘要
• 英文摘要
• 1 前言
• 2 材料与方法
• 2.1 实验动物材料
• 2.1.1 动物
• 2.1.2 药物
• 2.1.3 试剂
• 2.1.4 仪器与设备
• 2.1.5 溶液配制
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 选出具有正常动情周期的大鼠
• 2.2.2 动物分组及处理
• 2.2.3 标本收集
• 2.3 观察指标
• 2.3.1 动情周期的观察
• 2.3.2 子宫及卵巢指数测定
• 2.3.3 组织形态学指标的观察
• 2、FSH、LH的测定'>2.3.4 血清E₂、FSH、LH的测定
• 2.3.5 颗粒细胞上Fas及FasL基因表达
• 2.4 统计学处理
• 3 结果
• 3.1 各组大鼠的动情周期、器官指数的变化
• 2、FSH、LH的影响'>3.2 对血清E₂、FSH、LH的影响
• 3.3 光镜下子宫卵巢组织形态学观察
• 3.4 卵巢颗粒细胞上凋亡基因Fas及FasLmRNA的表达
• 附图
• 4 讨论
• 4.1 TWP的药理作用及其临床应用
• 4.1.1 TWP的药理作用
• 4.1.2 TWP的临床应用及其不良反应
• 4.2 HRT的临床应用
• 4.3 颗粒细胞上Fas、FasL的表达
• 4.4 伍用HRT对TWP所致生殖系统损害的保护作用
• 5. 结论
• 6. 参考文献
• 附录
• 致谢
• 综述: 卵巢颗粒细胞凋亡相关机制的研究进展