植物内生细菌定殖及防治辣椒疫病机理的研究

论文摘要

为了筛选到对辣椒疫病具有高防效的植物内生细菌,本研究从植物中分离筛选防治辣椒疫病的植物内生细菌,并对其中防效好的菌株进行鉴定,研究了高防效菌株在辣椒体内的定殖动态、定殖动态与防效的关系以及重复接种后在辣椒植株中有效菌体数量的保持；研究了高防效菌株防治辣椒疫病的机理：包括测定高防效菌株的代谢产物对辣椒疫霉菌的抑制效果,是否具有纤维素酶活性和β-1,3-葡聚糖酶活性,在辣椒种芽和盆栽苗中对辣椒疫霉菌毒素的减毒作用,对辣椒盆栽苗的诱导系统抗性。结果如下：1、本研究采用平板对峙培养法和盆栽苗防效法对分离的172株和实验室保藏的230株内生细菌进行筛选,得到3株防治辣椒疫病较好的菌（G9、R15和J13）,其防效都达到88.00%以上。经鉴定3株菌属于荧光假单胞菌ⅡPseudomonas fluorescens Ⅱ的不同菌株。2、3株菌均能稳定定殖在辣椒中,并呈“先增后减”的消长趋势；G9、R15定殖在辣椒根部且定殖量在第15d达到最高值；J13定殖在辣椒根、茎、叶中且定殖量根>茎>叶,定殖量达到最大值天数分别为第9d、15d、15d。当G9、J13、R15定殖量分别为9.73×105cfu.g-1、10.31×105cfu.g-1和6.30×105cfu.g-1时防效可达到100%,保持100%防效时间为6d、1d和14d以上。3、通过将生防菌每隔15d接种一次,R15在每次接种后能重新完成一个新的定殖周期,并与第一次的消长趋势相同,即采用连续重复接种,就可以在辣椒根部维持100%防效定殖数量；G9和J13不能采用该法维持其在辣椒苗中防效达100%的定殖菌量。4、G9、J13的胞外产物对辣椒疫霉菌有微弱的拮抗作用,而3株菌的胞内物质都不具有拮抗作用；且3株菌都不具有纤维素酶、p-1,3-葡聚糖酶的活性。通过辣椒种芽试验和盆栽苗试验证明3株菌株不能降解或吸附辣椒疫霉菌毒素。5、J13虽可显著诱导辣椒体内CAT和POD酶活性提高,但这两种酶活性的变化趋势与J13防效结果不符,说明J13防治辣椒疫病的机理不是诱导这两种酶；G9诱导辣椒体内SOD酶活性变化趋势与其防效结果相符,推测G9是通过诱导辣椒苗体内SOD酶活性提高来防治辣椒疫病,或许G9还有其它的防病机理。R15不能诱导这3种酶。所以3株菌的防治机理都还需要进一步探究。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 综述
• 1 辣椒疫病的研究概况
• 1.1 辣椒疫霉菌
• 1.2 辣椒疫病的发生症状及其发展规律
• 2 辣椒疫病防治的研究进展
• 2.1 生物防治
• 2.2 其它防治方法
• 3 植物内生细菌定殖研究进展
• 4 实验设计
• 第2章 拮抗辣椒疫霉菌植物内生细菌的筛选
• 1 材料和方法
• 1.1 材料
• 1.2 实验方法
• 2 实验结果
• 2.1 拮抗辣椒疫霉菌的内生细菌筛选结果
• 2.2 植物内生细菌接种盆栽辣椒苗对辣椒疫病的防效试验结果
• 3 小结与讨论
• 第3章 拮抗辣椒疫霉的植物内生细菌鉴定
• 1 材料与方法
• 1.1 供试材料
• 1.2 实验方法
• 2 结果与分析
• 2.1 拮抗辣椒疫霉菌的内生细菌的培养、形态特征和生理生化特征
• 2.2 拮抗辣椒疫霉植物内生细菌16S rDNA序列的测定结果
• 2.4 接抗辣椒疫霉菌植物内生细菌16S rDNA序列相似性比较与系统发育树
• 3 小结与讨论
• 第4章 植物内生细菌在植株体内的定殖、定殖动态与防效的关系及有效菌体数量的保持方法研究
• 1 材料和方法
• 1.1 材料
• 1.2 实验方法
• 2 实验结果
• 2.1 内生细菌在辣椒无菌苗中的定植结果
• 2.2 内生细菌在辣椒盆栽苗的定殖分析结果
• 2.3 三株生防菌的定殖动态与防效的关系
• 2.4 重复接种测定生防菌在辣椒体内定殖数量的变化结果
• 3 小结与讨论
• 第5章 植物内生细菌防治辣椒疫病机理的研究
• 第1节 植物内生细菌产生的物质对辣椒疫霉菌的影响
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 实验方法
• 2 结果与分析
• 2.1 内生细菌的胞内外物质对辣椒疫霉菌生长的影响
• 2.2 内生细菌的胞内物质对辣椒疫霉菌生长的影响
• 2.3 内生细菌纤维素酶活性测定的结果
• 2.4 内生细菌β-1,3-葡聚糖酶活性测定的结果
• 3 小结与讨论
• 第2节 内生细菌对辣椒疫霉菌毒素的作用
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 实验方法
• 2 结果与分析
• 2.1 毒素的提取及活性检测
• 2.2 内生细菌在辣椒种芽中的减毒作用结果
• 2.3 内生细菌在盆栽苗中的减毒作用结果
• 3 小结与讨论
• 第3节 内生细菌对辣椒植株的诱导系统抗性
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 实验方法
• 2 结果与分析
• 2.1 生防菌处理后辣椒苗体内MDA含量的变化
• 2.2 生防菌处理后辣椒苗体内CAT酶活性变化
• 2.3 生防菌处理后辣椒苗体内POD酶活性的变化
• 2.4 生防菌处理后辣椒苗体内SOD酶活性的变化
• 3 小结与讨论
• 第6章 结论
• 参考文献
• 在读期间发表的学术论文及科研成果
• 致谢