醛固酮对大鼠肾小球系膜细胞表达结缔组织生长因子的影响

论文摘要

目的 研究醛固酮是否能刺激结缔组织生长因子的表达,以及其信号通路是否通过它的核受体经转化生长因子β1介导。 方法 醛固酮(aldosterone,ALD,10-7mol/l)加入培养的大鼠肾小球系膜细胞,分别于共同培养0h、6h、12h、18h、24h后应用逆转录聚合酶联反应（Reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR）的方法评价结缔组织生长因子（connetive tissue growth factor,CTGF）mRNA的表达改变,应用免疫细胞化学方法评价CTGF蛋白的表达水平;应用酶联免疫吸附试验（Enzyme-Linked Immunosorbent,ELISA）方法检测转化生长因子β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）蛋白的表达水平;分别应用醛固酮受体拮抗剂安体舒通(spironolactone,SPI,10-8mol/l)和TGF-β1/Smads信号通路的特异性丝、苏氨酸激酶抑制剂Staurosporine（STA,5nmol/ml）,评价其对醛固酮刺激肾小球系膜细胞表达CTGF、TGF-β1的影响。 结果 未加醛固酮刺激的肾小球系膜细胞CTGFmRNA和蛋白表达水平较低,醛固酮(10-7mol/l)刺激后肾小球系膜细胞CTGFmRNA和蛋白表达水平增加,6h活性已渐增高,12h达高峰,18h开始下降,24h降至较低水平,（12h,0.46±0.08;对照组,0.20±0.03;P<0.05）,且呈剂量依赖性;先用醛固酮受体拮抗剂安体舒通(10-8mol/l)干预1h后再用醛固酮(10-7mol/l)刺激,未见CTGFmRNA和蛋白表达水平增加（P>0.05）;经醛固酮(10-7mol/l)刺激24h后检测发现肾小球系膜细胞培养上清液中TGF-β1蛋白表达水平明显增加,（297.53±15.25ng/ml;对照组,180.47±10.57ng/ml;P<0.05）,而经安体舒通(10-8mol/l)干预1h后,抑制了TGF-β1蛋白表达;TGF-β1/Smad2信号通路中的的特异性丝、苏氨酸激酶抑制剂Staurosporine（5nmol/ml）预处理1h后再用醛固酮(10-7mol/l)刺激,则CTGF的mRNA和蛋白表达水平均无显著变化,（P>0.05）。 结论 醛固酮能上调肾小球系膜细胞表达结缔组织生长因子,醛固酮刺激结缔组织生长因子表达通过其核受体经TGF-β1途径来介导。

论文目录

• 一、中文摘要
• 二、英文摘要
• 三、引言
• 四、正文
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 附图
• 参考文献
• 五、综述
• 正文
• 参考文献
• 六、致谢