紫杉烷类化合物生物转化及手性药物左旋3-丁基苯酞生物合成的研究

论文摘要

本论文主要进行的是生物转化方面的研究，包括两部分的内容：紫杉烷类化合物的生物转化和手性药物左旋3—丁基苯酞的生物合成。 在紫杉烷类化合物的生物转化研究中，主要进行了以下研究： 1．紫杉烷类化合物Sinenxan A的生物转化：通过对Sinenxan A进行有效生物转化的微生物菌种筛选，发现木贼镰孢茵（Fusarium equiseti（Corda）Sacc.）对Sinenxan A有很好的生物转化能力，进而对其进行摇瓶放大实验，通过乙酸乙酯提取，硅胶柱层析，分离得到一个已知的转化产物：10β-hydroxy-2a，5a，14β-triacetoxy-4（20），11-taxadiene，即10-deacetyl sinenxan A，收率为17％。 2．银杏细胞悬浮培养体系对14—去乙酰氧基sinenxan A的生物转化：在转化中得到两个转化产物：10β-hydroxy-2a，5a-diacetoxy-4（20），11-taxadiene（Ⅰ）和10β-butyloxy-2a，5a-diacetoxy-4（20），11-taxadiene（Ⅱ），收率均约为19％，这两个化合物均为新化合物，并对底物14—去乙酰氧基sinenxanA和化合物Ⅰ、Ⅱ进行了细胞毒活性评价，发现底物无论对肿瘤细胞（KB、MCF-7）还是对肿瘤多药耐药性细胞（KB／VCR、MCF-7／ADR）均具有较好的细胞毒活性，而化合物Ⅰ和Ⅱ的细胞毒活性均不如底物的强。 在手性药物左旋3—丁基苯酞的生物合成研究中，主要进行了以下研究： 1．川芎愈伤组织、细胞悬浮培养体系的建立及其化学成分气相色谱—质谱联用分析：诱导并建立了川芎愈伤组织、细胞悬浮培养体系。愈伤组织诱导培养基为MS+1.0mg／L2，4-D+0.5mg／LCTK，继代培养基为MS+1.0mg／L2，4-D，培养条件为25℃，黑暗培养，35天左右传代一次，接种量约5 g（鲜重）愈伤组织。诱导悬浮培养的培养基为MS+1.0mg／L2，4-D，由传代一年的愈伤组织诱导得到，培养条件为转速130 rpm，25℃黑暗培养，每隔16天传代一次。通过气相色谱—质谱联用分析，发现愈伤组织和细胞悬浮培养物成分相似，但与原植物的成分区别很大，它们也几乎不含有原植物中的主要活性成分3—丁基苯酞和新蛇床内酯。这表明愈伤组织和细胞悬浮培养物的生化特性不同于原植物。 2．化学合成并得到了3—丁烯基苯酞（收率59％）、邻戊酰基苯甲酸钠（收率98％）与邻戊酰基苯甲酸、2-（α-羟基戊基）苯甲酸钠（收率98％）。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 前言
• 第一部分 紫杉烷类化合物的生物转化
• 第一章 紫杉烷类化合物的研究进展（文献综述）
• 第一节 紫杉烷类化合物的生物活性及生物资源
• 第二节 紫杉烷类化合物的化学合成
• 第三节 紫杉烷类化合物的生物转化
• 第二章 紫杉烷类化合物Sinenxan A的生物转化
• 第一节 对Sinenxan A进行有效生物转化的微生物菌种筛选
• 1.1 材料与方法
• 1.2 结果与分析
• 第二节 木贼镰孢菌（Fusarium equiseti（Corda）Sacc.）对Sinenxan A的生物转化
• 2.1 材料与方法
• 2.2 结果与分析
• 第三章 银杏细胞悬浮培养体系对14—去乙酰氧基sinenxan A的生物转化
• 1.材料与方法
• 2.结果与分析
• 2.1 银杏细胞悬浮培养体系对14—去乙酰氧基sinenxan A的生物转化
• 2.2 细胞毒活性测定
• 第二部分 手性药物左旋3—丁基苯酞的生物合成
• 第四章 3—丁基苯酞的研究概况（文献综述）
• 第一节 光活3—丁基苯酞的药理活性
• 第二节 3—丁基苯酞的化学合成
• 第三节 左旋3—丁基苯酞的化学拆分制备
• 结束语
• 第五章 川芎愈伤组织、细胞悬浮培养体系的建立及其化学成分气相色谱—质谱联用分析
• 第一节 川芎愈伤组织的诱导与培养及细胞悬浮培养体系的建立
• 1.1 材料与方法
• 1.2 结果与分析
• 第二节 川芎愈伤组织、细胞悬浮培养物的化学成分气相色谱—质谱联用分析
• 2.1 材料与方法
• 2.2 结果与分析
• 第六章 底物的化学合成
• 第一节 3—丁烯基苯酞的化学合成
• 1.1 材料与方法
• 1.2 结果与分析
• 第二节 邻戊酰基苯甲酸钠与邻戊酰基苯甲酸的化学合成
• 2.1 材料与方法
• 2.2 结果与分析
• 第三节 2-（α-羟基戊基）苯甲酸钠的化学合成
• 3.1 材料与方法
• 3.2 结果与分析
• 第七章 2-（α-羟基戊基）苯甲酸钠与3—丁基苯酞的互变与pH值之间的关系
• 1.材料与方法
• 2.结果与分析
• 第八章 3—丁基苯酞气相色谱分析方法的建立
• 1.材料与方法
• 2.结果与分析
• 第九章 对3—丁基苯酞进行有效生物合成的微生物菌种筛选
• 1.材料与方法
• 2.结果与分析
• 2.1 微生物菌种分离
• 2.2 对3—丁基苯酞进行生物合成的微生物菌种筛选
• 第十章 黑曲霉（Aspergillus niger）生物合成左旋3—丁基苯酞的放大试验
• 1.材料与方法
• 2.结果与分析
• 第十一章 黑曲霉（Aspergillus niger）生物合成左旋3-丁基苯酞的生理特性及影响因素
• 第一节 黑曲霉（Aspergillus niger）生物合成左旋3—丁基苯酞的pH值曲线
• 1.1 材料与方法
• 1.2 结果与分析
• 第二节 黑曲霉（Aspergillus niger）菌的生长曲线
• 2.1 材料与方法
• 2.2 结果与分析
• 第三节 Tween80在黑曲霉（Aspergillus niger）对底物进行生物转化合成左旋3—丁基苯酞中的影响
• 3.1 材料与方法
• 3.2 结果与分析
• 小结与讨论
• 第十二章 总结
• 在校期间发表论文
• 致谢
• 附图1
• 附图2
• 附图3
• 附图4
• 附图5
• 附图6