黄芪扶正汤抑制Lewis肺癌移植瘤生长及其机制的实验研究

论文摘要

目的：建立荷Lewis肺癌皮下移植瘤小鼠模型,用黄芪扶正汤灌胃处理小鼠,用腹腔注射顺铂作为对照,观察黄芪扶正汤单用及与顺铂联用对肿瘤生长的影响,并观察其对肿瘤组织中HIF-1α及VEGF表达的影响,为黄芪扶正汤在临床上的进一步应用提供实验依据。方法：培养Lewis肺癌细胞,建立荷Lewis肺癌皮下移植瘤小鼠模型,随机分为4组：对照组、顺铂组、中药组、联合治疗组,每组7只。皮下接种后第7天,同时开始给药：顺铂组予以顺铂2mg/kg,腹腔注射,隔日一次,共给药8次,同时每日予以生理盐水10ml/kg灌胃；中药组每日灌服黄芪扶正汤溶液10ml/kg,共15天,同时隔日予以生理盐水10ml/kg腹腔注射；联合治疗组两药用法同前；对照组给予生理盐水10ml/kg灌胃和腹腔注射,用法同前,每天固定时间给药。每天密切观察小鼠生活状态及体重变化,根据体重调整用药剂量,每3天使用游标卡尺测量肿瘤最长径（a）和最短径（b）,计算肿瘤体积,绘制生长曲线,给药的第15天处死小鼠,完整剥离移植瘤瘤体,用中性甲醛溶液固定后制作病理切片,光学显微镜下观察移植瘤的病理改变,用免疫组织化学法检测移植瘤HIF-1α及VEGF的表达情况,观察黄芪扶正汤对小鼠移植瘤HIF-1α及VEGF表达的影响。结果：1.对肿瘤生长的影响：各个实验组的肿瘤体积及肿瘤重量均小于模型组,中药组瘤重较对照组明显减轻（P<0.05）；顺铂组瘤重较对照组明显减轻（P<0.05）；联合治疗组瘤重较对照组明显减轻（P<0.05）；顺铂组瘤重低于中药组（P<0.05）。中药组、顺铂组、联合治疗组的抑瘤率分别是38.7%,52.0%,68.96%,联合治疗组的平均瘤重低于中药组、顺铂组（P<0.05）,联合治疗组抑瘤率优于顺铂组和中药组（P<0.05）。2.免疫组织化学染色检测结果：顺铂组、中药组以及联合治疗组HIF-1α及VEGF表达均低于对照组（P<0.05）,提示黄芪扶正汤可降低肿瘤组织HIF-1α及VEGF表达。结论：1.黄芪扶正汤可以抑制荷Lewis肺癌小鼠移植瘤的肿瘤生长。2.黄芪扶正汤可以对顺铂化疗起到增效作用。3.黄芪扶正汤可以抑制肿瘤组织中HIF-1α及VEGF的表达,这可能为其抗肿瘤的机制之一。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 目录
• 专业名词缩写中英文对照表
• 第一章 前言
• 第二章 材料及方法
• 1. 材料
• 1.1 细胞系
• 1.2 实验动物
• 1.3 主要实验药物
• 1.4 主要试剂
• 1.5 实验仪器及设备
• 2. 实验方法
• 2.1 实验试剂的配制
• 2.2 Lewis肺癌（LLC）细胞的培养
• 2.3 Lewis肺癌细胞的皮下传代
• 2.4 实验动物的饲养
• 2.5 实验动物的分组及给药
• 2.6 标本采集
• 2.7 检测指标及方法
• 2.8 统计学分析
• 第三章 结果
• 1. 肿瘤生长曲线的绘制
• 2. 抑瘤率的测定
• 3. 联合用药效应的计算
• 4. 小鼠移植瘤的病理学观察
• 5. 免疫组织化学法检测HIF-1α及VEGF的表达
• 第四章 讨论
• 1. 肺癌的中医辨证及黄芪扶止汤抗肿瘤的依据
• 2. 黄芪扶正汤中各个单药的抗肿瘤机制
• 3. 黄芪扶正汤抑制小鼠Lewis肺癌的机制
• 3.1 黄芪扶正汤对小鼠Lewis肺癌VEGF表达的影响
• 3.2 黄芪扶正汤对小鼠Lewis肺癌HIF-1α表达的影响
• 第五章 结论
• 参考文献
• 附图
• 综述
• 参考文献
• 致谢