抗软骨藻酸单克隆抗体制备及ELISA检测方法建立

论文摘要

软骨藻酸由海洋中的硅藻产生后常通过食物链蓄积于海洋贝类、蛤类等海产品体内,进而引起海洋动物乃至人的食物中毒,国外由于误食有毒海产品而引发中毒的事件时有发生,严重影响了人们的身体健康和对海产品的开发利用。本实验通过活泼酯法将软骨藻酸同牛血清白蛋白及人免疫球蛋白进行偶联,成功制备了免疫原及检测原,通过足垫快速法免疫BALB/C小鼠,常规方法进行融合,间接ELISA方法筛选阳性克隆,同时采用有限稀释法、显微操作法及皮下荷瘤方法进行杂交瘤细胞的亚克隆和培养,建立了9C1杂交瘤细胞株,并对其单克隆抗体的效价、分子量、抗体亚类、有效浓度、染色体众数、纯度、蛋白质含量、亲和力、特异性等方面进行了研究,利用优化后的实验条件进行间接竞争ELISA检测并建立标准曲线,标准曲线的回归方程为y = -13.094x + 106.19,相关系数R2=0.9962,最低检测限2.43ng/mL。

论文目录

• 内容提要
• 英文缩写词表
• 前言
• 第一篇 文献综述
• 第二篇 研究内容
• 实验1 软骨藻酸完全抗原的制备
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 5 小结
• 实验2 快速免疫和常规动物免疫比较试验
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 5 小结
• 实验3 抗软骨藻酸单克隆抗体的制备及鉴定
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 5 小结
• 实验4 软骨藻酸间接竞争ELISA方法建立
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 5 小结
• 结论
• 参考文献
• 攻读学位期间取得的科研成果
• 致谢
• 中文摘要
• Abstract