犬瘟热发病机理的免疫及分子病理学研究——脑组织及淋巴器官病变观察

论文题目: 犬瘟热发病机理的免疫及分子病理学研究——脑组织及淋巴器官病变观察

论文类型: 博士论文

论文专业: 基础兽医学

作者: 潘耀谦

导师: 赵德明,吉川尧

关键词: 犬瘟热,髓鞘脱失,包涵体,发病机理,脱髓性脑病,细胞,细胞

文献来源: 中国农业大学

发表年度: 2005

论文摘要: 脑组织中髓鞘脱失和淋巴组织中淋巴细胞减少是犬瘟热发生的主要原因,但其发生的机理还未完全搞清。本研究主要通过三个相关的实验对之进行了研究。 一是急性犬瘟热原发性脱髓性脑病的免疫组化研究。患急性犬瘟热病犬的中枢神经系统的病理特征是脑白髓的髓鞘脱失和在星状胶质细胞内包涵体形成。为了进一步观察由犬瘟热病毒所致的原发性脑损伤和包涵体形成;进一步研究脑损伤与临床上神经症状的关系,对10只患有急性犬瘟热的自然病例进行了详细的研究。为了详细的观察病损,根据脑组织的解剖部位的相互联系,将脑组织分为三个部分十一个切面,即:大脑(五个切面)、脑干(四个切面)和小脑(两个切面)。从这些切面取材的组织制作切片后用HE、LFB染色和免疫组织化学染色。结果表明:特异性的髓鞘脱失广泛发生于脑组织,大脑的病变较轻,而严重的脱髓主要发生于脑干围绕着脑室的部位;而小脑则在轻度和中等度弥漫性脱髓的基础上散在有严重的多发性的局灶性脱髓。在脑白质脱髓部位形成非常明显的海绵状结构。此处无小胶质细胞出现,也无任何炎性反应。脱髓性病变为非对称性发生,对神经束没有明显的亲和性。在室管膜细胞下方的星状胶质细胞和室管膜细胞的胞浆及细胞核内可检出嗜酸性核内和胞浆内包涵体。用抗犬瘟热核蛋白抗体染色,带有包涵体的室管膜细胞呈强阳性反应。一些锥体细胞、神经核细胞、小脑的浦氏细胞,特别是小锥体细胞发生程度不同的变性,有的神经细胞核发生浓缩。依据试验结果,作者认为由犬瘟热病毒引起的原发性脑损伤是一种脱髓性脑病,而不是脑炎;位于室管膜细胞内的包涵体是在脑组织中诊断犬瘟热的重要证据;犬瘟热病毒引起的脑损伤为一种非特异性、非对称性损伤,而且发生损伤的部位也不固定。因此,病犬的临床症状也是不完全相同的。 二是自发性犬瘟热脱髓性脑病发生机理的研究。迄今为止,虽然对神经元和神经胶质细胞做了大量的研究,但犬瘟热的脑组织脱髓的发生机理还不清楚。为了进一步调查神经纤维的脱髓与脑细胞成份的关系,用12只患犬瘟热的自然病例进行了本实验。脑组织的取材方法与实验一相同。石蜡包埋制成的组织切片经HE染色后用光学显微镜检查。选择无脱髓组织、轻度脱髓、中度脱髓和重度脱髓的组织切片分别进行免疫组织化学染色。结果表明脑组织的血液循环障碍主要包括脑淤血、水肿、血栓形成和弥漫性血管内凝血的发生。脱髓部位的少突胶质细胞发生代谢紊乱和凋亡。用抗犬瘟热病毒抗体染色,星状胶质细胞呈现出强阳性反应;用抗GFAP染色,纤维性星状胶质细胞在急性、轻度和中度脱髓区呈较强阳性反应,在病灶中可检出发生凋亡的星状胶质细胞。一些脑室管膜细胞也被犬瘟热病毒感染,许多细胞内的包涵体和凋亡的细胞也被发现。少数神经细胞变性和皱缩,其核发生浓缩。据此,作者认为脑组织的脱髓变化主要与血液循环障碍和少突胶质细胞的代谢紊乱及凋亡有关;脑组织脱髓的原因是许多病因共作用的结果,而非是一种病因所致。 三是自发性犬瘟热T、B细胞变化的研究。为了调查患犬瘟热病犬的淋巴组织中T、B细胞变化的特点及淋巴细胞减少的发病机制,用12只自然感染犬瘟热的病犬和4只对照犬进行了本实验。实验通过免疫组织化学的方法观察了T细胞(用CD3和CD45RO检测T细胞)、B细胞(用IgG、IgM抗血清检测B细胞)和犬瘟热病毒(抗犬瘟热病毒抗体)在病犬淋巴组织中的分布。结果表明:在淋巴组织中的淋巴细胞、淋巴小结中树突状细胞、淋巴组织的树突细胞和巨噬细胞中均检出了病毒阳性反应细胞。在骨髓组织的前髓细胞中也发现犬瘟热病毒阳性反应和嗜酸性胞浆内和核内包涵体的存在。与对照组相比,CD3和CD45RO

论文目录:

摘要

Abstract

英文缩略语

研究的目的和意义

第一章 文献综述

1 犬瘟热研究进展

1.1 病原特征

1.2 宿主范围

1.3 流行病学特点

1.4 发病机制

1.5 诊断方法

1.5.1 临床实验室诊断

1.5.2 脑脊液(CSF)的检查

1.5.3 免疫荧光方法

1.5.4 ELISA检查方法

1.5.5 免疫学试验

1.5.6 病毒的分离

1.5.7 鉴别诊断

1.6 治疗

1.7 主要的预防方法

1.7.1 免疫接种

1.7.2 环境管理

1.8 重要的公共卫生意义

2 犬瘟热的临床症状及病理变化研究进展

2.1 临床症状

2.1.1 病犬主要的全身性症状

2.1.2 病犬主要的神经症状

2.2 主要的病理变化

2.2.1 宏观性病损

2.2.2 微观性病变

第二章 急性犬瘟热的原发性脱髓性脑病的免疫组化研究

1 材料与方法

1.1 实验动物

1.2 病理组织学检查

1.3 免疫组织化学检查

1.3.1 抗-CDV染色

1.3.2 抗髓磷脂碱性蛋白(MBP)染色

1.3.3 抗髓磷脂蛋白脂质蛋白(MPLP)染色

2 结果

2.1 大脑组织的损伤性变化

2.2 脑干的损伤性变化

2.3 小脑的损伤性变化

3 讨论

3.1 急性犬瘟热引起原发性脑病

3.2 室脑管膜细胞内的包涵体在脑病诊断中的价值

3.3 神经症状与脑组织病损的关系

第三章 自发性犬瘟热脱髓性脑病发生机理的研究

1 材料与方法

1.1 实验动物

1.2 病理组织学检查

1.3 免疫组织化学染色

1.3.1 抗胶质纤维酸性蛋白试验(抗-GFAP)

1.3.2 TUNEL染色

1.3.3 抗-铁蛋白(FT)和抗-半乳糖脑苷脂(GCS)染色

1.3.4 抗-犬瘟热病毒(抗-CDV)染色

2 结果

2.1 血管的损伤性变化

2.2 少突胶质细胞的损伤性变化

2.3 星状胶质细胞的损伤性变化

2.4 室管膜细胞的损伤性变化

2.5 神经细胞的损伤性变化

3 讨论

3.1 循环障碍可直接引起脱髓

3.2 少突胶质细胞的代谢障碍和凋亡直接引起脱髓

3.3 感染的星状胶质细胞与脱髓的关系

第四章 自发性犬瘟热的T、B细胞变化的研究

1 材料与方法

1.1 实验动物

1.2 病理组织学检查

1.3 免疫组织化学检查

1.3.1 抗病毒核膜蛋白染色

1.3.2 CD3细胞染色

1.3.3 CD45RO细胞染色

1.3.4.IgG和IgM细胞染色

2 结果

2.1 CDV抗原在淋巴组织中的分布

2.2 淋巴结的病理组织学变化

2.3 IgG、IgM、CD3、CD45RO细胞在淋巴组织中的分布

3 讨论

3.1 T.B细胞在淋巴组织中的变化

3.2 关于淋巴细胞减少的原因

3.3 淋巴细胞抗原的潜在性变化

第五章 结论与创新

1.结论

2.创新

参考文献

致谢

个人简介

发布时间: 2005-07-18

参考文献

• [1].犬瘟热免疫层析试纸及荧光定量PCR诊断方法的建立与评价[D]. 苏建青.吉林大学2008
• [2].犬瘟热、细小病毒病、腺病毒病（Ⅰ型）三联活疫苗的研制[D]. 刘大飞.东北林业大学2015

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