论文摘要
本论文分别对野生与栽培月夜菌的化学成分,体内抗肿瘤,体外抑菌活性及抗氧化能力等方面进行了对比研究。生物学特性方面,通过对培养基的进一步优化,分别对月夜菌的袋料栽培,月夜菌的出菇后的袋料和月夜菌的液体发酵进行培养条件的研究,得到最佳培养基和最适培养条件。袋料栽培方面,培养基为：木屑77%,米糠20%,石膏1%,葡萄糖1%,K2HPO41％,其中干料：水=1.0：1.2。利用此培养基上栽培,最适温度为15-18℃,空气相对湿度保持在80-90%,室内要有散射光线和适当通气,在这样的条件需要培养180d才可出菇。液体发酵方面,对月夜菌进行了气浴摇床培养,并筛选了最佳发酵培养配方和发酵工艺：该菌的发酵过程中在PD培养基的基础上加入B1（1%）和氯霉素（50mg/mL）；最适培养温度为28℃,摇床转数为160rpm,培养时间为15d,得到培养产物,菌丝干重为2.533g/100mL。化学成分对比方面,通过对薄层色谱鉴别结果表明,只有栽培月夜菌乙酸乙酯层在Rf=0.422处有一个明显的橘黄色斑点和Rf=-0.484处有一个明显的青绿色斑点,具有鉴定意义。通过化学检识红外图谱表明,在官能团区（1300-4000cm-1）,在指纹区（1300-910cm-1）和在苯环区（910-650cm-1）四个样品均有相同的吸收峰,也有有别于其他样品的强吸收峰。这对用红外方法鉴别栽培月夜菌有辅助意义。通过化学检识石油醚提取物GC-MS总离子流图上,野生月夜菌石油醚提取物主要鉴定出6个化合物、栽培月夜菌石油醚提取物主要鉴定出7个化合物、月夜菌出菇后的袋料石油醚提取物主要鉴定出10个化合物而月夜菌液体发酵菌球石油醚提取物主要鉴定出9个化合物。其中棕榈酸甲酯、（Z,Z）-9,12-十八烷二烯酸甲酯、11-十八碳烯酸甲酯、十八碳酸甲酯是四者共有的化学成分。药理活性研究,本文首次测定了月夜菌出菇后的袋料LD50。值,并且对月夜菌出菇后的袋料的乙酸乙酯层提取物进行体内抗肿瘤活性的研究。结果表明,高剂量组（1000mg/mL）的抑瘤率为69%,低剂量组（500mg/mL）的抑瘤率为59%。实验证明,月夜菌出菇后的袋料所含的毒性成分毒性降低,但对肿瘤仍然具有显著的抑制作用。体外抑菌方面,以革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌作为供试菌种为例,检验野生与栽培月夜菌的各有机溶剂提取物进行抑菌活性实验的对比。采用纸片琼脂扩散法分别对野生月夜菌,栽培月夜菌,月夜菌出菇后的袋料和月夜菌液体发酵物菌球的石油醚层小极性提取物,三氯甲烷层的提取物,乙酸乙酯层中等极性提取物,丙酮层提取物,甲醇层大极性提取物进行了体外抑制细菌生长的研究。结果表明,三种样品的三氯甲烷组对大肠杆菌ATCC8099的抑制率和金黄色葡萄球菌ATCC6538的抑菌活性效果最为显著,而且都随着受试药物的浓度增大,抑菌效果也增大,呈量效关系。抗氧化能力方面,通过二苯基苦味酰基苯肼（DPPH）和羟基自由基（·OH）两种抗氧化活性分析方法分别对野生月夜菌、栽培月夜菌、月夜菌出菇后的袋料的石油醚提取物,三氯甲烷提取物,乙酸乙酯提取物,丙酮提取物,甲醇提取物分别进行了抗氧化的评价。结果表明,三个样品对DPPH自由基和羟基自由基均具有很高的清除作用。