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RNA编辑酶在结直肠癌细胞诱导分化中作用的实验研究

2020-11-29阅读(835)

RNA编辑酶在结直肠癌细胞诱导分化中作用的实验研究

论文摘要

本课题针对RNA编辑酶在结直肠癌大体标本及其癌细胞株HCT-8细胞中的表达,及苯乙酸对结直肠癌HCT-8细胞的增殖抑制作用和RNA编辑酶在结直肠癌细胞诱导分化中的作用进行了实验研究。本实验在细胞水平、亚细胞水平、分子水平分别进行了细胞增殖抑制率检测、流式细胞仪检测、电镜观察及逆转录PCR检测。本研究检测了RNA编辑酶ADAR1、ADAR2在结直肠癌临床组织标本及癌旁组织中的表达,表明RNA编辑酶ADAR1在结直肠癌组织及癌旁组织中未见明显表达,RNA编辑酶ADAR2在结直肠癌组织中阳性表达、在癌旁组织无表达或弱表达。本实验通过MTT比色法检测苯乙酸对结直肠癌HCT-8细胞的增殖抑制作用具有时间和剂量依赖性;通过流式细胞仪检测发现苯乙酸使结直肠癌HCT-8细胞阻滞于G0/G1期,使G0/G1期细胞比例下降,S期细胞比例显著增高,且这种作用在撤药后仍可维持;在相差显微镜下观察到经苯乙酸作用后结直肠癌HCT-8细胞形态由不规则多边形向规则圆形转变;电镜下观察到细胞超微结构向正常细胞转化。本实验还证实RNA编辑酶ADAR2在结直肠癌及癌细胞株中阳性表达,且其表达随苯乙酸对结直肠癌细胞株诱导分化作用的增强而减弱,进而推测其表达与结直肠癌的发生发展有关,其表达变化与苯乙酸对结直肠癌的诱导分化作用机制有关。

论文目录

  • 提要
  • 英文缩写词表
  • 前言
  • 第一章 文献回顾
  • 第一节 结直肠癌的研究进展
  • 一、结直肠癌的基础研究进展
  • 二、结直肠癌的治疗进展
  • 第二节：RNA 编辑酶的研究进展
  • 一、RNA 编辑酶的研究进展
  • 二、RNA 编辑酶与炎症反应的相关性研究
  • 三、RNA 编辑酶与肿瘤的相关性研究
  • 第三节 苯乙酸诱导分化治疗机制研究进展
  • 一、苯乙酸抗肿瘤作用机制研究
  • 二、苯乙酸在细胞培养中诱导分化作用研究
  • 三、苯乙酸在体外诱导分化作用的实验研究
  • 四、苯乙酸的临床实验研究
  • 五、苯乙酸相关衍生物的研究
  • 第二章 材料与方法
  • 第一节 临床资料
  • 第二节 实验材料
  • 一、细胞株及诱导分化剂
  • 二、主要试剂与仪器
  • 第三节 实验方法
  • 一、细胞株的体外培养和传代
  • 二、细胞增殖检测
  • 三、流式细胞术分析细胞周期
  • 四、相差显微镜及电镜下观察HCT-8 细胞生长情况及超微结构
  • 五、逆转录多聚酶链式反应（RT-PCR）测定HCT-8 细胞RNA 编辑酶的表达
  • 六、人结直肠癌标本取材、提取RNA 及制备 cDNA
  • 七、逆转录多聚酶链式反应（RT-PCR）检测人结直肠癌细胞及组织中编辑酶ADAR1、ADAR2 mRNA 表达
  • 八、统计学处理
  • 第三章 结果
  • 第一节 RNA 编辑酶在结直肠癌标本中的表达
  • 第二节 苯乙酸对HCT-8 细胞的诱导分化作用
  • 一、苯乙酸对HCT-8 细胞增殖的影响
  • 二、苯乙酸对HCT-8 细胞株细胞周期的影响
  • 三、苯乙酸对HCT-8 细胞形态及超微结构的影响
  • 第三节 结直肠癌HCT－8 细胞中编辑酶的表达
  • 一、结直肠癌HCT-8 细胞中编辑酶ADAR1 和ADAR2 的表达
  • 二、苯乙酸对结直肠癌HCT-8 细胞ADAR2 mRNA 表达的影响
  • 附图
  • 第四章 讨论
  • 结论
  • 参考文献
  • 攻读博士期间发表的学术论文及其他成果
  • 中文摘要
  • Abstract
  • 致谢

    • 相关论文文献

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