论文摘要
背景与目的:脑血管病发病呈上升趋势,已成为与冠心病和癌症并列的严重危害人类健康的三大疾病,其中脑出血发病急,进展快,病情复杂,死亡率和致残率极高,且近年有明显年轻化趋势。脑出血属祖国医学的“中风”范畴,经过历代医家的不懈努力探索,中医对中风病病因病机的认识不断加深,清代著名医家王清任认为气虚血瘀是中风的主要病机之一,其所创方剂补阳还五汤是益气活血法的代表方,沿用至今,仍是治疗中风的有效方剂。进入现代,对益气活血法及其代表方剂补阳还五汤的研究进一步深入,中医药理对脑出血病理生理的影响成为热点。临床研究表明益气活血中药联合外科微创清除血肿或西药常规对症治疗的中西医结合治疗组效果明显优于单纯手术组或西药常规对症治疗组,反映了中医药的治疗优势。现代基础研究发现,以补阳还五汤为代表的益气活血法能对脑出血后症状的改善有明显作用,它能更好地改善脑微循环,促进脑血肿吸收,减轻出血灶周围脑组织炎症反应与水肿,尽早解除血肿病变对脑组织的压迫和损害,从而促进神经功能的恢复,减少致残率和死亡率。由于脑出血后最主要的病理改变是血肿区微血管系统的破坏和血肿周围半暗带的继发性缺血缺氧性脑损伤,而血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是体内最重要的促血管生成因子,它能通过与其受体Flt-1(fms-like tyrosine kinase-1)和Flk-1(fetal liver kinase-1)结合加速内皮细胞增生,并能保护血管内皮细胞,减少其死亡或凋亡,从而在脑损伤区诱导大量新生血管形成,改善微循环,使受累脑组织供氧量增加,神经元凋亡或坏死数量减少,最终减轻缺血性脑损伤。因此,我们推测益气活血法可以影响VEGF及其受体Fit-1和Flk-1表达,从而发挥对脑出血的治疗作用。本实验通过观察VEGF及其受体Flt-1和Flk-1蛋白在脑出血大鼠脑内的表达特征及益气活血法干预后VEGF及其受体蛋白的表达变化,初步探讨益气活血法对脑出血大鼠脑内损伤区微血管系统重建的作用机制。方法:155只Sprague-Dawley大鼠随机分成6组:正常对照组,假手术组,模型组,益气组,活血组,益气活血组。立体定位向脑内右侧苍白球注入Ⅶ型胶原酶复制脑出血模型。益气组、活血组与益气活血组分别予补阳还五汤拆方益气方、补阳还五汤拆方活血方及补阳还五汤全方灌胃。正常组于1d,其余各组分别于造模术后并灌胃1d、4d、7d、14d、21d和28d六个时间点随机抽取5只大鼠深麻醉后迅速剥离颅骨,并分离鼠脑取得血肿区脑组织,运用Westernblot检测正常组及其它各组各时间点VEGF、Flt-1和Flk-1蛋白的表达。结果:正常组及假手术组不同时间点VEGF、Flt-1和Flk-1蛋白均未见明显表达;模型组VEGF、Flt-1和Flk-1蛋白在脑出血后1天即开始表达,4天时增高,21天达到高峰,然后逐渐减弱;益气活血组VEGF、Flt-1和Flk-1蛋白表达在7-21天明显高于其他各组(P<0.01),VEGF和Flk-1蛋白表达在术后14天达高峰(P<0.01),Flt-1蛋白在术后21天达高峰。结论:1.脑出血大鼠血肿区VEGF、Fit-1和Flk-1蛋白表达增强。2.益气活血法能促进脑出血大鼠脑内VEGF、Fit-1和Flk-1蛋白表达而促进微血管新生,加快血肿的吸收,有利于促进脑出血损伤的功能恢复。
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