Lactobacillus kefiranofaciens发酵法生产开菲尔多糖

Lactobacillus kefiranofaciens发酵法生产开菲尔多糖

论文摘要

开菲尔多糖(Kefiran)是由一种特殊发酵乳—开菲尔(Kefir)的发酵剂—开菲尔粒(Kefir grain)产生的乳酸菌胞外多糖。Kefiran作为一种新型的活性多糖,不仅可以作为增稠剂、稳定剂、乳化剂和凝胶剂,而且具有抗真菌、抗细菌、降压、降血糖、降胆固醇和抗肿瘤的特性,是一种很好的消炎降压及免疫激活物质,在临床医药、食品工业及有关生物研究领域都有着广泛的用途。本论文在实验室规模上以一株能在胞外高积累Kefiran的开菲尔基质乳杆菌(Lactobacillus kefiranofaciens JCM6985T)为生产菌株,以细胞和Kefiran的高产量,高得率和高生产强度为目标,对Kefiran发酵过程进行了优化。主要研究结果如下:(1)优化得到了摇瓶条件下Kefrian生产的最优碳氮源种类及浓度:碳源为100 g/L蔗糖,氮源为100 g/L酵母粉。(2)不同pH控制方式对Kefiran分批发酵的影响有较大差异。通过对pH 4.0~5.5范围内Kefiran分批发酵的各过程参数进行比较,确定Kefiran分批发酵最适宜pH为5.0。(3)考察不同温度条件下Kefiran分批发酵过程,并在深入分析各动力学参数的基础上提出两阶段温度控制策略:发酵起始控制温度33oC,发酵10 h后切换至28oC并保持到发酵结束。该温度控制策略的实施可进一步提高Kefiran的合成能力,比温度控制在28oC和33oC时分别提高了12%和46%,其生产强度比28oC和33oC分别提高了36%和33%。具有很好的实用性。(4)考察不同初糖浓度下Kefiran分批发酵过程,发现仅通过分批培养难以实现细胞和Kefiran高产量,高得率和高生产强度的有机统一。分批补料、恒速流加和指数流加等几种培养方式都可以实现乳酸菌细胞和Kefiran的高产。综合比较来看,4 g/(L·h)的蔗糖恒速流加方式下L. kefiranofaciens细胞干重63.6 g/L,Kefiran产量4.95 g/L,比较适合Kefiran的发酵生产。(5)为降低乳酸菌发酵过程中乳酸对菌体生长和产物合成的抑制作用,考察了乳好氧共培养合成Kefiran,使Kefiran发酵强度达到94.19 mg/(L·h),比单菌厌氧培养提高了53.7%;L. kefiranofaciens与C. utilis好氧共培养合成Kefiran使Kefiran发酵强度达到86.44 mg/(L·h),比单菌厌氧培养提高了41.1%,并且产生了250 mg/L的GSH。采用这种共培养方式不仅可以降低乳酸菌发酵过程中乳酸对菌体生长和产物合成的抑制而且可以合成高附加值的共同产物,对其他终端产物抑制发酵类型有较好借鉴作用。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 第一章 绪论
  • 1.1 概述
  • 1.1.1 乳酸菌胞外多糖
  • 1.1.2 开菲尔多糖及其性质
  • 1.1.3 开菲尔多糖的功能及应用前景
  • 1.2 生物法合成开菲尔多糖的研究动态
  • 1.2.1 开菲尔多糖生产菌株的分离与鉴定
  • 1.2.2 发酵法生产开菲尔多糖
  • 1.3 本论文主要研究内容
  • 1.3.1 发酵法生产开菲尔多糖研究中仍存在问题
  • 1.3.2 本论文主要研究内容
  • 第二章 开菲尔基质乳杆菌发酵生产开菲尔多糖营养及环境条件
  • 2.1 前言
  • 2.2 材料与方法
  • 2.2.1 菌种
  • 2.2.2 试剂和仪器
  • 2.2.3 培养基和培养条件
  • 2.2.4 分析方法
  • 2.3 结果与讨论
  • 2.3.1 种子生长曲线与种龄的确定
  • 2.3.2 碳源对开菲尔多糖发酵的影响
  • 2.3.3 氮源对开菲尔多糖发酵的影响
  • 2.3.4 pH 对开菲尔多糖发酵的影响
  • 2.3.5 温度对开菲尔多糖发酵的影响
  • 2.4 本章小结
  • 第三章 流加发酵法生产开菲尔多糖
  • 3.1 前言
  • 3.2 材料与方法
  • 3.2.1 菌种
  • 3.2.2 试剂和仪器
  • 3.2.3 培养基和培养条件
  • 3.2.4 分析方法
  • 3.3 结果与讨论
  • 3.3.1 初始蔗糖浓度对开菲尔多糖分批发酵的影响
  • 3.3.2 分批补料培养对开菲尔多糖生产的影响
  • 3.3.3 恒速流加发酵对开菲尔多糖生产的影响
  • 3.3.4 指数速率流加发酵对开菲尔多糖生产的影响
  • 3.3.5 不同培养方式下开菲尔多糖生产情况比较
  • 3.4 本章小结
  • 第四章 共培养合成开菲尔多糖
  • 4.1 前言
  • 4.2 材料与方法
  • 4.2.1 菌种
  • 4.2.2 培养基和培养条件
  • 4.2.3 分析方法
  • 4.3 结果与讨论
  • 4.3.1 乳酸对菌体生长及开菲尔多糖合成的影响
  • 4.3.2 酵母菌利用乳酸生长情况
  • 4.3.3 开菲尔基质乳杆菌与面包酵母厌氧共培养合成开菲尔多糖
  • 4.3.4 开菲尔基质乳杆菌与面包酵母好氧共培养合成开菲尔多糖
  • 4.3.5 开菲尔基质乳杆菌与产朊假丝酵母好氧共培养合成开菲尔多糖
  • 4.3.6 不同培养方式下开菲尔多糖生产情况比较
  • 4.4 本章小结
  • 第五章 结论
  • 参考文献
  • 攻读硕士学位期间取得的学术成果
  • 致谢
  • 相关论文文献

    • [1].Lactobacillus kefiranofaciens流加发酵法生产开菲尔多糖[J]. 生物加工过程 2008(06)

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