串联质谱检测正常儿童干血滤纸片中游离肉碱和酰基肉碱含量

论文摘要

目的建立一种简便、快捷的检测干血滤纸片中肉碱类化合物的方法。通过对0～13岁正常儿童干血滤纸片中游离肉碱和酰基肉碱含量的检测,对我国南方地区儿童体内游离肉碱及酰基肉碱水平进行了统计分析,为脂肪酸代谢障碍性疾病和有机酸血症诊断提供参考范围。方法取直径5 mm的干血滤纸片,加入含有游离肉碱和酰基肉碱的同位素内标,用甲醇萃取,萃取物过滤后直接上机分析,采用ESI+-MS/MS进行检测,数据采集采用多反应监测模式（MRM）对13种肉碱类化合物进行了检测。以美国CDC提供的质控样品作方法学验证。应用该法对277例0～13岁正常儿童的外周血干血滤纸片酰基肉碱进行检测。分6个年龄段组1（新生儿组）:年龄～28天,孕周≥37周;组2:年龄～6月;组3:年龄～12月;组4:年龄～3岁;组5:年龄～6岁;组6:年龄～13岁。应用SPSS 17.0分析软件对数据进行统计分析。结果本实验建立的方法重复性好,各物质在低、中、高三个浓度级别的批内变异系数和批间变异系数都小于15%。各物质实测浓度与加入浓度之间的相对偏差在0.1%-27.2%。线性范围满足临床检测需要。通过比较各个年龄段儿童干血滤纸片法酰基肉碱类化合物含量发现:1.3-羟基异戊酰肉碱（C5OH）随着年龄的增大,含量下降。2.～28天组（组1）;辛酰肉碱（C8）较其它年龄组的低;乙酰肉碱（C2）、十二酰肉碱（C12）、十四酰肉碱（C14）较其它年龄组的高。3.～6月组（组2）:游离肉碱（C0）比～28天组（组1）和其它较大年龄组高;乙酰肉碱（C2）比其他较大年龄组高。4.～12月（组3）乙酰肉碱（C2）比其他较大年龄组高。5.～6岁年龄（组5）十四酰肉碱（C14）比其它小年龄组的低。6.～13岁组（组6）癸酰肉碱（C10）比其它较小年龄组高。7.丙酰肉碱（C3）、丁酰肉碱（C4）、异戊酰肉碱（C5）、己酰肉碱（C6）这些中、短酰基肉碱受年龄因素影响不大。用本方法诊断脂肪酸β-氧化代谢障碍1例。结论同位素稀释-非衍生化串联质谱法对干血滤纸片中游离肉碱和酰基肉碱进行分析,能够达到满意的精确度和准确度,每个样品前处理加上机分析只需要3小时,是一项简便、快捷检测方法,适合应用于临床检测。本研究提供的我国南方地区0～13岁正常儿童干血滤纸片酰基肉碱含量参考值范围,可以为脂肪酸代谢障碍和有机酸血症疾病的诊断、鉴别诊断、治疗提供有意义的参考。

论文目录

• 主要英文对照
• 中文摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 研究对象
• 一、研究对象
• 二、标本采集
• 材料与方法
• 一、实验材料
• 二、血斑干滤纸片游离肉碱和酰基肉碱检测方法
• 结果
• 一、方法准确性测定
• 二、方法精确性测定
• 三、线性范围
• 四、 277名健康儿童干血滤纸片中游离肉碱和12种酰基肉碱含量
• 五、 检测到的脂肪酸代谢障碍（短链乙酰辅酶A脱氢酶缺乏）病例
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 致谢