金黄色葡萄球菌及其溶血素基因分布研究

论文摘要

近年来,世界范围内的食品安全恶性事件屡屡发生,无论发达国家还是发展中国家,食源性疾病的发生率居高不下。食源性疾病与食品污染构成了一个巨大并不断扩大的世界性公共卫生问题。金黄色葡萄球菌（简称金葡菌）广泛存在于自然环境中,对各种理化因素都有较高的抵抗力,不仅是引起细菌性食物中毒的重要病原菌,同时也是医院临床感染的主要病原菌。因此从公共卫生学角度,金葡菌倍受人们的关注,国内外许多专家学者针对金葡菌的生物学特性、检测技术、致病基因及其毒力因子、流行病学进行了研究。本文对采自石家庄地区速冻食品,生鲜肉,肉制品,水产品,生肉加工车间棉拭子等114份样品进行金黄色葡萄球菌的分离与鉴定,金葡菌总检出率为20.2%;本实验室前人对保定地区人化脓组织样品,理发用具,生牛奶,速冻食品,生鲜肉,肉制品,水产品,果蔬,豆制品,空气,动物粪便及水等685份样品进行金葡菌筛选,金葡菌阳性检出率为22.6%。综合两个地区试验数据,证实保定和石家庄两地金黄色葡萄球菌的污染程度较高,人化脓组织,理发用具,生牛奶,速冻食品,生鲜肉受其污染严重,应引起相关人员高度重视。溶血素是造成金黄色葡萄球菌感染的一种重要致病因子,对人和哺乳动物有细胞毒作用,通过作用于红血球、血小板及溶解中性球,使其中的溶菌酵素释出,而破坏附近组织。目前,金葡菌溶血素根据其抗原不同分α、β、γ、δ四种,对组织造成伤害的通常是α-溶血素和β-溶血素。本试验设计合成hla、hlb、hlg、hld四对金黄色葡萄球菌溶血素基因引物,进行PCR鉴定,并对溶血素基因在金葡菌分离株中的分布状况进行研究。在分离得到的324株金黄色葡萄球菌中,91.98%含α-溶血素基因,65.12%含β-溶血素基因,93.83%含γ-溶血素基因,95.68%含δ-溶血素基因。在金黄色葡萄球菌分离株中,四种溶血素同时存在的情况最为常见（60.19%）,其次是hla、hlg和hld三种溶血素基因的组合情况（29.01%）,而溶血素基因的其他组合情况也广泛存在,但所占比例不高。本研究表明,所分离的金黄色葡萄球菌的带毒率较高。鉴于目前状况,有待于进一步调查我国人群、家畜及食品中金葡菌的污染状况及该病原菌的流行情况,为金黄色葡萄球菌引起疾病的监控、暴发流行的检测以及污染源的追踪提供依据。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 引言
• 1.1 目的意义
• 1.2 研究现状
• 1.2.1 金黄色葡萄球菌生物学特征
• 1.2.2 金黄色葡萄球菌的流行病学
• 1.2.3 致病性
• 1.2.4 鉴定和分型方法
• 1.3 研究目的和内容
• 2 材料和方法
• 2.1 试验材料
• 2.1.1 菌株
• 2.1.2 样品的采集
• 2.1.3 培养基和有关溶液的配制
• 2.1.4 主要试剂
• 2.1.5 主要仪器设备
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 样品的采集
• 2.2.2 金黄色葡萄球菌的分离
• 2.2.3 金黄色葡萄球菌的鉴定
• 2.2.4 金黄色葡萄球菌致病因子——溶血素基因的鉴定
• 3 结果与分析
• 3.1 金黄色葡萄球菌自然分布的研究
• 3.2 溶血素基因的鉴定及其分布研究
• 3.2.1 hla 的PCR 鉴定
• 3.2.2 hlb 的PCR 鉴定
• 3.2.3 hlg 的PCR 鉴定
• 3.2.4 hld 的PCR 鉴定
• 4 讨论
• 4.1 金黄色葡萄球菌的自然分布
• 4.2 金黄色葡萄球菌溶血素分布
• 4.3 金黄色葡萄球菌预防措施
• 5 结论
• 参考文献
• 附件1 hla 测序结果
• 附件2 hlb 测序结果
• 附件3 hlg 测序结果
• 附件4 hld 测序结果
• 在读期间发表的学术论文
• 作者简历
• 致谢