附子与干姜配伍的物质基础研究

论文摘要

目的:研究附片与干姜药材及提取物配伍药对的不同配伍比例在不同的配伍环境中,对总生物碱、酯型生物碱、乌头类生物碱各成分及与之配伍干姜的相关成分进行含量测定,并对配伍进行薄层扫描和HPLC指纹图谱分析,建立不同配伍关系中有毒或有效成分的化学库,确定附片有毒中药毒效反应的物质基础及药性基础,探讨炮制及配伍规律的科学性和合理性,并初步探索配伍对中药药性的调控。方法:采用多指标评价体系评价附子干姜中药常用配伍药对的不同配伍比例在水煎液、人工胃液、人工肠液环境中毒效组分及毒效成分的变化,分别采用酸性染料比色法、改良异羟肟酸铁分光光度法测定乌头类总生物碱、酯型生物碱的含量,采用HPLC法测定附子生物碱及配伍药味干姜的酚类成分的含量,并采用TLCS,HPLC测定配伍后石油醚部位,乙酸乙酯部位,正丁醇部位干姜相关成分不同比例下的含量变化。结果:1.药材配伍方面:配伍干姜后不同配伍比例间对白附片总生物碱含量有升高影响;在人工胃液和人工肠液孵化后,总生物碱含量略有升高。酯型生物碱含量略有升高,并随用量的增加逐步升高;在人工胃液和人工肠液孵化后,生物碱含量影响较小,略有下降。总双酯型生物碱含量下降影响,其中次乌头碱的稳定性＞新乌头碱＞乌头碱;在人工胃液和人工肠液孵化后,双酯型生物碱含量均有显著下降,但次乌头碱稳定性进一步提高,以人工肠液尤显。可见配伍干姜在双酯型生物碱水平上影响较大,但体内代谢增加了其稳定性,而对不同配伍比例,干姜各成分含量均呈下降趋势。有效部位配伍方面,配伍干姜提取物后对附子中总生物碱的含量有明显的影响,随着干姜提取物用量的增加,能够使配伍样品溶液中总生物碱,酯性生物碱的含量升高,对其溶出有一定的促进的作用,而双酯性生物碱的含量基本呈下降趋势,其中次生物碱的含量升高,基本于药材配伍相同。2.配伍干姜不同比例后,薄层色谱图谱中,在石油醚,正丁醇部位,与干姜单煎液相比,随着白附片量的增加,部分峰呈线性增加或减少趋势,而乙酸乙酯部位,除了部分峰量的增减外,还新出现了一个峰,且分离度较好,点的容量大,磷钼酸显色后为深蓝色,香草醛显色后为黄色,且含量不随着白附量的增加而增加,初步估计为干姜固有成分,与附片某类成分发生化学变化后,显现出来。3.配伍干姜不同比例后,HPLC图谱中,在石油醚部位,与干姜单煎液相比,随着白附片量的增加,有一个峰呈非线性减少,而乙酸乙酯部位,与单煎液相比,新出现了两个峰,但含量不随着白附量的增加而增加,另有两个峰呈非线性增加或减少,正丁醇部位,配伍前后没有明显变化。配伍前后的各提取部位,各成分呈非线性增加,特别是新峰的出现,为附子干姜热热配伍相须为用,再此提供了一定的佐证。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 一、药材的品种考证
• 二、药材的化学成分概述
• 三、乌头类有毒中药的减毒增效研究概况
• 四、药材的配伍考证
• 五、附子配伍干姜的药理毒理研究概况
• 六、药材四性配伍研究
• 七、本课题研究目的及意义
• 第一部分:附片与干姜配伍后有效成分的含量变化
• 第一章节 附片与干姜药材配伍的研究
• 一、白附片与干姜饮片配伍后总生物碱的含量变化
• 1.1 白水煎液中总生物碱含量测定方法的建立
• 1.1.1 试验仪器与材料
• 1.1.2 方法与结果
• 1.2 附子配伍干姜对总生物碱（水煎液,人工胃液,人工肠液）含量的影响
• 1.2.1 供试品的制备
• 1.2.2 附子药材配伍干姜总生物碱含量测定方法
• 1.2.3 白附片配伍干姜总生物碱的含量测定结果
• 二、白附片与干姜药材配伍后酯性生物碱的含量变化
• 2.1 附子水煎液中酯型生物碱含量测定方法的建立
• 2.1.1 标推曲线的绘制
• 2.1.2 供试品含量测定
• 2.2 白附片干姜配伍对酯型生物碱含量的影响
• 2.2.1 白附片干姜配伍（水煎液,人工胃液,人工肠液）对酯型生物碱含量的影响
• 三、附子干姜配伍对乌头类生物碱各成分含量的影响
• 3.1 附子干姜配伍对乌头类生物碱各成分含量测定方法的建立
• 3.2 供试品溶液的制备
• 3.3 白附片配伍干姜乌头类生物碱各成分的含量测定方法
• 3.4 白附片配伍干姜乌头类生物碱各成分的含量测定结果
• 四、附子干姜配伍对酚类成分含量的影响
• 4.1 白附片配伍干姜酚类成分的含量测定方法
• 4.2 白附片干姜配伍酚类成分的含量测定结果
• 第二章节 附子与干姜有效部位的配伍研究
• 1.1 附子配伍干姜提取物的含量测定研究
• 1.1.1 附子配伍干姜（提取物）样品溶液的制备:
• 1.1.2 附子总碱与干姜提取物不同比例配伍样品溶液的配制:
• 1.2 附子配伍干姜提取物总生物碱的含量测定方法及结果
• 1.2.1 测定方法
• 1.2.2 结果
• 小结:
• 第二部分 附子与干姜配伍后薄层法确定干姜有关成份量效关系的变化
• 一、实验仪器与材料
• 1.1 仪器
• 1.2 试剂
• 1.3 药材
• 二.实验方法
• 2.1 供试品溶液的制备
• 2.2 方法学考察与结果
• 2.2.1 石油醚提取部位
• 2.2.2 乙酸乙酯提取部位
• 2.2.3 试验结果
• 2.2.3 正丁醇提取部位
• 小结:
• 第三部分 附子与干姜配伍后HPLC确定干姜有关成份量效关系的变化
• 一、实验仪器与试药
• 1.1 仪器
• 1.2、试药材料
• 二.试验内容
• 2.1.供试液的制备:
• 2.2.色谱柱的选择:
• 2.3 石油醚部位
• 2.3.1 色谱条件的选择
• 2.3.2 色谱条件
• 2.3.3 洗脱条件
• 2.3.4 方法学考察
• 2.3.5 试验结果（石油醚部位）
• 2.4 乙酸乙酯部位
• 2.4.1 色谱条件的选择
• 2.4.2 色谱条件:
• 2.4.3 洗脱条件
• 2.4.4 方法学考察
• 2.4.5 试验结果
• 2.5 正丁醇部位
• 2.5.1 色谱条件的选择
• 2.5.2 色谱条件:
• 2.5.3 洗脱条件
• 2.5.4 方法学考察
• 2.5.5 试验结果
• 小结:
• 结果与讨论
• 致谢
• 参考文献
• 综述:
• 附图
• 附件一:在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果