论文摘要
目的：研究人参皂甙Re对异丙基肾上腺素诱导大鼠心肌细胞凋亡的保护机制，为临床防治高儿茶酚胺性心肌细胞凋亡提供理论依据。方法：采用连续3天异丙基肾上腺素15mg／kg腹腔注射造模。实验分为2部分：人参皂甙Re对高儿茶酚胺大鼠心肌细胞凋亡的治疗作用和人参皂甙Re对高儿茶酚胺大鼠心肌细胞凋亡的预防作用。第1部分大鼠随机分为对照组(CON组)、异丙基肾上腺素模型组(ISO组)和人参皂甙Re治疗组(GSRe组)(造模之后20分钟给予人参皂甙Re20mg／kg尾静脉注射)。第2部分大鼠分为对照组(CON组)、异丙基肾上腺素模型组(ISO组)和人参皂甙Re预防组(PGSRe组)(造模之前20分钟给予人参皂甙Re20mg／kg尾静脉注射)。使用多道生理信号采集处理系统记录各组大鼠心电图变化以及第1、3、5、7、10分钟的心率。首次注射后72小时断颈处死大鼠，取左室心肌组织进行光学显微镜、电子显微镜、心肌细胞凋亡的原位末端标记检测、Fas基因蛋白表达免疫组化染色检测和Bcl—2基因蛋白表达免疫组化染色检测。从而研究人参皂甙Re对高儿茶酚胺水平引起大鼠心肌细胞凋亡的保护作用及其机制。结果：1．ISO 15mg／kg腹腔注射后可以诱发室性心律失常。且ISO组大鼠第1、3、5、7、10分钟的心率与CON组同时段相比，有显著增加(P＜0.01)。2．连续3天ISO15mg／kg腹腔注射后可诱导大鼠心肌细胞凋亡。HE染色未见明显的心肌细胞坏死。电镜下可见细胞核异性变、染色质边集等凋亡特征性改变。ISO组大鼠心肌细胞的凋亡细胞阳性指数由CON组的(9.70±3.34)上升至(49.73±6.83)(％)(P＜0.01)，且Fas基因和Bcl—2基因的阳性细胞表达指数分别由CON组的(14.43±5.56)(％)和(17.80±7.83)(％)上升至(59.40±6.50)(％)和(41.20±8.21)(％)(P＜0.01，P＜0.01)。3．治疗组GSRe可以逆转ISO诱发的触发性室性心律失常，并可以降低心率。两组同时段心率相比有显著差异(P＜0.01)。GSRe组电镜下可见细胞核染色质边集缓解。凋亡阳性指数由ISO组的(49.73±6.83)(％)下降至(27.30±4.16)(％)(P＜0.01)：Fas基因的阳性细胞表达指数由(59.40±6.50)下降至(40.77±8.14)(％)(P＜0.01)；而Bcl—2基因的阳性细胞表达指数由(41.20±8.21)上升至(49.67±7.35)(％)(P＜0.01)。4．预防组GSRe可以抑制ISO导致的触发性室性心律失常的发生，并且可以预防ISO引起的心率增快。两组同时段心率相比有显著差异(P＜0.01)。PGSRe电镜下细胞核完整，未见异性变。AI低于ISO组大鼠，为(29.47±4.67％)(P＜0.01)；Fas基因的阳性细胞表达指数低于ISO组，为(38.63±6.58％)(P＜0.01)；而Bcl—2基因的阳性细胞表达指数高于ISO组，为(50.63±7.78％)((P＜0.01)。结论：1．ISO可以诱发触发性室性心律失常。2．ISO可以诱发心肌细胞凋亡，且心肌细胞凋亡发生时间早于心肌细胞坏死的发生。3．GSRe可以抑制、逆转高儿茶酚胺水平下的触发性心律失常，同时改善血液动力学状况。4．GSRe可以拮抗高儿茶酚胺水平下的心肌细胞凋亡，这是通过下调促进细胞凋亡的Fas基因表达、上调抑制细胞凋亡的Bcl—2基因表达完成的。5．GSRe可以作为抗心律失常药和心肌细胞保护药物用于临床治疗儿茶酚胺增高条件下的室性心律失常和心肌细胞凋亡，在高儿茶酚胺水平下，对心脏起保护作用。