论文摘要
研究背景和目的:蟾酥系我国传统中药材,从中华大蟾蜍（Bufo gargarizans cantor）或黑眶蟾蜍（B. melanostictus Schneider）耳后腺及皮肤腺分泌的白色浆液,经现代工艺加工而成的固体,具有抗肿瘤、抗辐射、抗炎、增强免疫力及表面麻醉等药理作用。蟾酥注射液（Chansu Injection, CHS）是现代科技制药技术精制的灭菌水溶性总成分注射液[1],对治疗胃癌、肝癌、乳腺癌和前列腺癌等有一定疗效[2、3]。已有大量实验研究证实蟾酥类中药制剂在抗肿瘤治疗中有较好的发展前景。本课题旨在探讨蟾酥注射液逆转耐阿霉素的急性髓性白血病细胞（HL60/ADM）多药耐药的作用及机理,为逆转肿瘤MDR的新药开发及临床应用提供理论依据。方法:以加入可逆转浓度的蟾酥注射液培养3天,停药7天处理的HL60/ADM细胞为研究对象。采用MTT法检测阿霉素对蟾酥注射液作用后细胞的抑制率,高效液相色谱法（HPLC）检测培养液和细胞内药物（ADM）浓度的改变,经FCM分析细胞周期的变化,RT-PCR检测MRP mRNA表达变化,免疫组化法观察细胞NF-κB、MRP、GST-π、iNOS蛋白的表达。结果:阿霉素对蟾酥注射液作用后的HL60/ADM的抑制作用有明显增加;FCM结果显示蟾酥注射液作用后的HL60/ADM细胞周期阻滞于G0/G1期、G2/M期,降低进入S期比例,并出现凋亡峰;HPLC检测蟾酥注射液处理后明显增加细胞内ADM的浓度;RT-PCR检测蟾酥注射液作用后的HL60/ADM细胞MRP mRNA表达降低;免疫组化法结果显示,蟾酥注射液能下调HL60/ADM细胞中MRP、GST-π表达,上调NF-κB、iNOS的表达。结论:蟾酥注射液可逆转HL60/ADM的多药耐药,其可能机制为MRP、GST-π表达降低,NF-κB、iNOS表达增加及凋亡增加。