叶酸代谢信号通道与鼻咽癌耐药的相关性研究

论文摘要

鼻咽癌是耳鼻咽喉头颈部的常见恶性肿瘤,以放疗为主,化疗可以改善预后,但化疗过程中容易产生肿瘤细胞对化疗药物的抵抗,鼻咽癌化疗药物抵抗是当前的热点问题。本课题组前期研究发现,叶酸受体1基因在鼻咽癌化疗药物抵抗过程中起重要作用,因此探讨叶酸受体及代谢信号通路,对阐明鼻咽癌化疗药物抵抗有重要意义。目的:研究叶酸代谢通路的关键酶叶酸受体基因1（FOLR1）、二氢叶酸还原酶（DHFR）、丝氨酸羟甲基转移酶（SHMT）、胸苷酸合成酶（TS）与鼻咽癌抵抗紫杉醇化疗药物的相关性,探讨鼻咽癌抵抗化疗药物的分子机制。方法:1.采用集落形成实验（colony formation assay）检测叶酸对鼻咽癌亲本细胞株CNE-1和相应的耐药细胞株CNE-1/Taxol的影响。2.以人鼻咽癌细胞株CNE-1、HNE-2细胞及相应的紫杉醇耐药细胞株CNE-1/Taxol、HNE-2/Taxol为研究对象,用逆转录多聚酶链式反应（RT-PCR）测定叶酸代谢通路中关键酶FOLR1、DHFR、SHMT、TS在鼻咽癌亲本细胞及耐药细胞珠中的表达差异,观察其与鼻咽癌耐药的关系。3.用免疫组化SP法检测FOLR1在鼻咽癌组织与鼻咽正常组织中的表达差异。结果:1.乏叶酸培养的耐药细胞的集落抑制率显著高于乏叶酸培养的亲本细胞集落抑制率（P＜0.05）,耐药细胞的生长比亲本细胞更依赖于叶酸。2.通过RT-PCR检测了叶酸代谢通路关键酶FOLR1、DHFR、SHMT、TS基因在鼻咽癌耐药株CNE-1/Taxol和HNE-2/Taxol中的表达,发现FOLR1、DHFR和SHMT在耐药株CNE-1/Taxol、HNE-2/Taxol中的表达显著高于其相应的亲本细胞CNE-1和HNE-2,提示叶酸代谢通路一些关键酶的变化可能与鼻咽癌抵抗紫杉醇化疗药物具有相关性。3.FOLR1在正常鼻咽组织中无表达,而在鼻咽癌组织中有较低的阳性表达率,其阳性细胞数从0-42%不等,平均（23.85±13.89）%,与各临床分期有显著相关性（r=0.9345,p＜0.01）,早期肿瘤阳性率低,而晚期肿瘤阳性率高,表明其与鼻咽癌的发生和发展有关。结论:1.鼻咽癌耐药细胞株的生长较亲本细胞的生长更依赖于叶酸;2.叶酸代谢相关基因FOLR1、DHFR和SHMT与鼻咽癌细胞对紫杉醇的耐药有关;3.FOLR1基因可能成为鼻咽癌治疗的靶分子。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 第一章 材料与方法
• 第二章 实验结果
• 第三章 讨论
• 第四章 结论
• 参考文献
• 综述
• 致谢
• 攻读学位期间主要的研究成果