论文摘要
背景与目的过敏性支气管哮喘是气道慢性炎症性疾病,该病的确切发病机制仍不十分清楚,长期以来,Th1/Th2比例失衡理论已被多数人接受,认为过敏性哮喘是Th2细胞过度分化导致的变态反应性疾病。然而,传统的Th1/Th2比例失衡理论并不能解释所有的发病机制。大量研究提示,抑制性细胞因子IL-10、TGF-β1和CD4+CD25+T细胞可能在哮喘的发生发展中发挥着重要作用,现已引起人们的广泛关注。IL-10和TGF-β1是主要的免疫抑制性细胞因子。IL-10可能是通过直接抑制T细胞增殖和分泌细胞因子、诱导免疫无能T细胞产生、抑制抗原递呈细胞（DC、单核/巨噬细胞）间接抑制T细胞应答、抑制特异性IgE分泌增加IgG4合成,抑制气道炎症,最终抑制哮喘的发生发展。TGF-β1在哮喘中的作用十分复杂,至今仍有争议。大多数认为局部的TGF-β1主要促进炎症的发展,而全身的TGF-β1则可能起到抑制炎症的作用。CD4+CD25+T细胞包含CD4+CD25+调节性T细胞（regulatory T cell,Treg）和活化的CD4+T细胞,其中包含的CD4+CD25+Treg是近来研究的热点,属于免疫调节细胞,可抑制免疫性疾病的发展。CD4+CD25+Treg不仅可以抑制Th1细胞,还可抑制Th2细胞应答,并且对后者的作用更强。随着研究的深入近年发现在人类仅仅CD4+CD25high Treg发挥强大的免疫调节功能。对于哮喘的治疗,长期以来都是以抗炎、解痉为主。过敏原特异性免疫治疗（allergen specific immunotherapy,SIT）是唯一可能改变过敏性哮喘自然病程的对因治疗,但其机制仍不十分清楚。本文通过观察对尘螨过敏的儿童哮喘患者SIT的治疗效果和治疗前后外周血单个核细胞（peripheralblood mononuclear cells,PBMCs）中IL-10、TGF-β1 mRNA表达情况以及CD4+CD25+T细胞、CD4+CD25highT细胞占CD4+ T细胞的百分比,研究它们在SIT中的作用,初步探讨儿童过敏性哮喘特异性免疫治疗的机制,从而为哮喘的防治提供新思路。方法本实验选取郑州大学第一附属医院儿科门诊40例过敏性哮喘患儿,男24例,女16例,平均年龄8.42岁。所有的病人都有明确的哮喘病史和症状,符合支气管哮喘诊断标准,皮肤点刺试验尘螨抗原阳性,采用Alutard屋尘螨变应原制剂（ALK丹麦）脱敏方法进行标准化脱敏治疗。根据其治疗时间分为SIT治疗前组、治疗1年后组和治疗2年后组三组。分别于治疗前、治疗1年后、治疗2年后采集外周静脉血。利用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR的方法检测每组标本PBMCs中IL-10和TGF-β1 mRNA的表达情况;利用流式细胞技术检测每组标本CD4+CD25+T细胞、CD4+CD25highT细胞分别占CD4+ T细胞的百分比;同时,观察SIT的临床疗效。结果采用统计学软件进行统计学分析。结果随着特异性免疫治疗时间的延长,IL-10 mRNA的表达在治疗1年后组显著升高,是治疗前组的3.29倍,治疗2年后组表达水平又显著降低,是治疗前组的1.01倍;TGF-β1 mRNA的表达在治疗1年后组稍有降低,但治疗2年后组又回升,整体变化不大。CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的百分比在特异性免疫治疗前后无显著差异（P＞0.05）;CD4+CD25highT细胞占CD4+ T细胞的百分比在特异性免疫治疗后1年显著增高（P＜0.05）,治疗后2年仍维持高水平。患儿临床症状明显减轻。结论本实验进一步证实了哮喘患者特异性免疫治疗有效;随着特异性免疫治疗时间的延长,IL-10 mRNA的表达和CD4+CD25highT细胞占CD4+T细胞的百分比均升高,提示IL-10和CD4+CD25highT细胞可能在儿童过敏性哮喘特异性免疫治疗中起主要作用。
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