脂联素基因SNP+45、SNP+276与代谢综合征和血浆脂联素水平的相关性研究

论文摘要

研究目的了解汉族人群脂联素基因外显子2第45位点和内含子2第276位点G/T多态性的分布,探讨这两个位点基因多态性与代谢综合征（MS）和血浆脂联素（APN）水平的关系,为继续深入研究MS的可能发病机制提供一定的理论依据,并为MS的筛查提供有价值的遗传标记。对象与方法1、研究对象的选择:受试者均为山东地区汉族人。按照2004年中华医学会糖尿病学分会建议的标准,在2007年9月至2007年11月在本院查体的老年人中筛查出224例MS患者,同时选择体检正常、年龄匹配的健康人200例为对照组。2、DNA抽提:TIANamp Genomic DNA Kit试剂盒抽提外周血DNA。3、脂联素基因SNP+45、SNP+276聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析（restriction fragment length polymorphism PCR-RFLP）:利用引物设计软件Oligo 6.0并参考文献设计脂联素基因的引物,进行PCR扩增,再用SmaⅠ、EcoRⅠ内切酶进行限制性酶切反应,判断基因型。4、血浆APN水平的测定:用ELISA法测定。结果1、MS组和对照组的基本临床特征比较两组年龄和性别差异无统计学意义（P＞0.05）;与对照组相比,MS组体重指数（BMI）、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、腰围（WC）、臀围（HC）、腰臀比（WHR）、尿酸（UA）、甘油三酯（TG）、空腹血糖（FBG）显著增高,而高密度脂蛋白（HDL-c）则明显降低（P均＜0.05）。2、MS组和对照组基因型分布和等位基因频率2.1 SNP+276位点:MS组各基因型的频率分别为TT4.46%、TG37.05%、GG58.48%;对照组分别为TT11%、TG37.5%、GG51.5%,MS组GG基因型频率明显高于对照组,TT基因型频率明显低于对照组,两组相比有显著差异（P＜0.05）。MS组T和G等位基因频率分别是22.99%和77.01%,对照组T、G等位基因频率分别为29.75%和70.25%,两组相比有显著差异（P＜0.05）。2.2 SNP+45位点:MS组各基因型的频率分别为TT52.68%、TG41.07%、GG6.25%;对照组分别为TT 54%、TG 40%、GG 6%,两组比较无统计学差异（P＞0.05）。MS组T、G等位基因频率分别为73.21%和26.79%,对照组T、G等位基因频率分别为74%和26%,两组比较无统计学意义（P＞0.05）。3、MS组与对照组脂联素基因SNP+276、SNP+45不同基因型的临床及生化指标的比较:3.1 SNP+276位点:MS组GG基因型者WC、HC明显高于非GG基因型者,而UA明显低于非GG基因型者,有显著的统计学意义（P＜0.05）;对照组中,GG基因型者HC、胆固醇（CH）、γ-GT、血小板（PLT）明显高于非GG基因型者,而WHR、UA明显低于非GG基因型者,均有显著的统计学意义（P＜0.05）。3.2 SNP+45位点:MS组TT基因型者PLT明显低于非TT基因型者;对照组中,TT基因型者HC、ALT明显高于非TT基因型者,而血WBC、PLT明显低于非TT基因型者（P＜0.05）。4、SNPs与MS的关系:4.1 MS危险因素Logistic回归模型以MS作为因变量,以+45T/G和+276G/T多态性、年龄、性别、血压、FBG、BMI等作为自变量,进行多因素逐步Logistic回归分析,BMI、DBP、FBG、TG、+276G/T多态性进入回归方程,GG基因型发生MS的危险性高于TT型。4.2 SNP+45T/G和SNP+276G/T对MS组分的影响分别以MS各组分为因变量,以SNP+45T/G和SNP+276G/T等位基因、血压、FBG、BMI、CH、TG、HDL-c、低密度脂蛋白（LDL-c）等作为自变量,进行多因素逐步Logistic回归分析,SNP+276位点G等位基因分别进入以甘油三酯、空腹血糖为因变量的回归方程,表明G等位基因增加了高甘油三酯、空腹血糖异常的风险;SNP+45位点T、G等位基因均未进入回归方程。5、血浆脂联素水平5.1 MS组血浆APN水平明显低于对照组。5.2女性血浆APN水平明显高于男性。5.3按MS各组分分组后,TG正常组和高TG组脂联素的水平无明显差异;HDL-c正常组脂联素的水平明显高于HDL-c降低组;BMI正常组脂联素的水平明显高于BMI升高组;血糖正常组脂联素的水平明显高于血糖异常组;血压正常组和高血压组的脂联素的水平无明显差异。5.4 SNP+45位点中,TT基因型的APN水平为12.87±2.42ug/ml,非TT型为13.78±2.07ug/ml,TT基因型显著低于非TT基因型,P＜0.05。SNP+276位点中,GG基因型的APN水平为13.24±2.30ug/ml,非GG型为13.38±2.32ug/ml,两者比较无统计学差异,P＞0.05。5.5血浆APN水平与WC、WHR呈负相关,与HDL-c呈正相关。结论1、山东汉族人存在脂联素基因+45位点和+276位点核苷酸T/G多态性。2、SNP+276G/T多态性与MS的发病相关,GG基因型个体发生代谢综合征的危险性高于TT基因型个体,G等位基因增加了高甘油三酯、空腹血糖异常的风险。3、MS组血浆APN水平较对照组明显降低。女性血浆APN水平显著高于男性。HDL-c、WC、WHR是血浆APN水平的独立影响因素。4、SNP+45T/G多态性与APN水平相关,TT基因型APN水平显著低于非TT基因型（P＜0.05）。5、SNP+45T/G多态性与MS的发病未发现相关性。未发现SNP+276G/T多态性与APN水平相关。

论文目录

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• 结论
• 附表
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