不同来源地重楼药材的初步鉴定及其甾体皂苷和无机元素含量测定

不同来源地重楼药材的初步鉴定及其甾体皂苷和无机元素含量测定

论文摘要

中药重楼为百合科植物云南重楼[Paris polyphylla Smith var. Yunnanensis(Franch)Hand Mazz]或七叶一枝花[Paris polyphylla Smith var. Chinensis(Franch)Hara]的干燥根茎,主产于云南、四川、广西等地,具有止血、抗癌、抗生育、抑菌抗炎、镇痛镇静、止咳平喘等多种药理作用,极具研发价值,受到广泛关注。本研究收集了25份不同来源地的重楼药材(饮片及生药),对它们进行了真伪鉴别,利用RP-HPLC法同时测定了17份不同来源地重楼药材中四种甾体皂苷的含量,采用火焰原子吸收分光光度法对17个不同来源地的重楼药材中Fe、Mg、Mn、Zn、Ca、Cu、Cr、As和Hg等九种无机元素进行了测定。主要研究结果如下:1.在25份材料中,根据对样品的外观性状、显微和理化鉴定结果,初步认为22份为重楼属植物的根茎,其余3份为伪品。2.建立了RP-HPLC法测定重楼中四种甾体皂苷含量的方法。即采用色谱柱:Zorbaxeclipse XDB C8,150mm×4.6mm 5μm;流动相:乙腈—水(40:60),流速1.0ml·min-1;检测波长:203nm;柱温:40℃。测定结果表明,四种甾体皂苷范围在0.4012~4.028μg线性良好,r=0.9996~0.9999,回收率99.1%~103.1%。本方法准确、简捷,为重楼药材的质量控制提供了一定方法和依据。3.不同来源地重楼药材中四种甾体皂苷的含量差异较大。其中购自重庆巴南的样品重楼皂苷Ⅱ含量最高,达5.03mg/g。蒲江长秋采集鲜品干燥者中重楼皂苷gri、重楼皂苷Ⅰ和重楼皂苷Ⅴ含量均为最高,分别为35.73mg/g、12.71mg/g和3.48mg/g;安徽蚌埠的样品中重楼皂苷gri和重楼皂苷Ⅰ含量均为最低,且未能检测出重楼皂苷Ⅴ。山西稷山、四川南充和四川峨嵋的样品中未检测出重楼皂苷Ⅱ。4.不同来源地重楼药材中各种无机元素含量存在一定差异,来自云南丽江的样品中Mg、Ca、As和Hg的含量最高,四川马边的样品中Fe和Mn的含量最高,蒲江长秋的样品中Zn的含量最高,贵州遵义的样品中Cu含量最高,四川峨嵋的样品中Cr含量最高,Fe、Mn、Zn、Ca和As的含量最低,重庆巫溪的样品中Mg的含量最低,贵州贵阳的样品中Cu和Cr的含量最低,贵州安顺的样品中Hg的含量最低。各无机元素含量在17个不同来源地中的变异系数由大到小依次为Mg、As、Mn、Hg、Zn、Cr、Fe、Cu、Ca。相关分析结果表明,Fe和Mg、Mg和As、Mg和Hg间为极显著正相关,Ca和Mg、Cu和Zn、Cu和Ca、Ca和Hg、As和Hg之间均为显著正相关,Cr和Zn之间为显著负相关。三种有毒微量元素中As的含量较高,Cr和Hg的含量较低。部分材料有毒元素含量超出国家绿色药品标准。本研究结果表明,目前中药市场中重楼药材真伪混用,质量参差不齐,是药材生产使用中亟待解决的问题。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 1 文献综述
  • 1.1 重楼研究概况
  • 1.1.1 地理分布
  • 1.1.2 形态分类研究
  • 1.1.3 栽培
  • 1.1.4 重楼属内资源间遗传关系研究
  • 1.1.5 化学成分
  • 1.1.6 药理作用
  • 1.1.7 临床应用
  • 1.1.8 中药品种鉴定在中药质量控制中的作用
  • 2. 立题依据
  • 3. 材料与方法
  • 3.1 不同来源地重楼药材的初步鉴定
  • 3.1.1 试验材料
  • 3.1.2 仪器与试剂
  • 3.1.3 性状鉴定方法
  • 3.1.4 显微鉴定方法(粉末)
  • 3.1.5 理化鉴定方法(检查甾体皂苷)
  • 3.2 RP-HPLC法同时测定重楼药材中四种皂苷的含量
  • 3.2.1 试验材料
  • 3.2.2 仪器与试药
  • 3.2.3 对照品溶液的制备
  • 3.2.4 供试品溶液的制备
  • 3.2.5 色谱条件
  • 3.3 火焰原子吸收分光光度法测定不同来源地重楼药材中9种无机元素含量
  • 3.3.1 试验材料
  • 3.3.2 仪器与试药
  • 3.3.3 供试样品前处理
  • 3.3.4 Fe、Mg和Mn的样品制备
  • 3.3.5 Zn的样品制备
  • 3.3.6 Cu和Cr的样品制备
  • 3.3.7 Ca的样品制备
  • 3.3.8 As、Hg的样品制备
  • 3.3.9 标准溶液配制
  • 3.3.10 测定方法
  • 4. 结果与分析
  • 4.1 不同来源地重楼药材的初步鉴定
  • 4.1.1 药材性状描述
  • 4.1.2 显微特征
  • 4.1.3 理化鉴定结果(检查甾体皂苷)
  • 4.2 RP-HPLC法同时测定重楼药材中四种苷的含量
  • 4.2.1 系统适应性试验
  • 4.2.2 线性关系
  • 4.2.3 精密度试验
  • 4.2.4 重现性试验
  • 4.2.5 稳定性试验
  • 4.2.6 回收率试验
  • 4.2.7 样品含量测定
  • 4.3 17个不同来源地重楼药材中9种无机元素含量测定
  • 4.3.1 测定方法的精密度和准确度的检验
  • 4.3.2 9种无机元素含量基本情况及相关分析
  • 4.3.3 重楼的功能元素分类含量比较研究
  • 5. 讨论与结论
  • 5.1 25份不同来源地重楼药材初步鉴定
  • 5.2 RP-HPLC法同时测定重楼药材中四种皂苷的含量
  • 5.3 火焰原子吸收分光光度法测定不同来源地重楼药材中9种无机元素含量
  • 参考文献
  • 致谢
  • 攻读学位期间发表学术论文
  • 相关论文文献

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