IL-6基因启动子区多态性与静脉血栓栓塞症相关性研究

论文摘要

目的：了解血清白介素6（IL-6）浓度及其启动子区-597G/A和-572C/G基因多态性与静脉血栓栓塞症相关性,分析炎性因子与纤维蛋白原（Fib）、D-二聚体（D-D）之间的相关性,探讨炎症反应和凝血指标之间的相互作用及其在VTE中的作用和机制。方法：1.标本采集患者来源于新疆医科大学第一附属医院骨科、血管甲状腺外科、呼吸科和心血管内科2009年3月—2010年3月住院患者,病例组246例,男性128例,女性118例,年龄（57.02±15.97岁）,对照组均来自我院体检中心健康体检者,共292例,男性154例,女性158例,年龄（54.39±14.42岁）。2.利用酶联免疫吸附法（ELISA法）测定VTE组和对照组炎性因子IL-6、TNF-α和C反应蛋白的水平,比较两组间炎性因子水平有无统计学意义。3.基因组DNA提取以酚-氯仿-异戊醇抽提法提取单个核细胞基因组DNA。4.PCR扩增及产物分析采用聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多态性（PCR-RFLP）核苷酸分型技术检测IL-6基因-597G/A和-572C/G基因多态性,根据凝胶电泳所见条带区分研究对象的基因型,并统计各基因型频率和等位基因频率,并分析基因多态性与VTE的相关性。5.统计学处理：采用SPSS17.0软件进行统计分析。用基因计数方法计数各组等位基因频率和基因型频率。计量资料用x±s,两组间均数比较采用t检验和秩和检验,计数资料采用χ2检验。相关性采用Spearman秩相关分析。结果：1年龄>50岁、感染、手术或创伤、肿瘤是VTE的最常见危险因素,随着年龄的增加,VTE的发病率明显增加,男女之间的发病率无明显差别。VTE的临床症状中最常见的是呼吸困难、心悸、胸痛、发热,体征中呼吸频率加快、颈动脉充盈、下肢水肿最常见。2.病例组TNF-α、IL-6、血小板、白细胞、心率、体重指数、肌酐、纤维蛋白原、D-二聚体等指标较对照组明显变化,差异有统计学意义（P<0.05）。3VTE组IL-6、TNF-α和C反应蛋白水平较对照组明显升高,差异有统计学意义。（P<0.05）。本实验采用ELISA方法测定VTE组人血清IL-6、CRP、TNF-α水平较对照组明显升高,炎性因子与凝血指标密切相关,炎性因子水平与PTE栓塞面积大小呈正相关,炎性反应与血气分析结果密切相关,有炎症反应VTE组的血栓发生率较无炎症反应组明显偏高。4.IL-6基因-597G/A位点有GG、GA两种基因型,-597 G/A基因型频率为GG[46（8.55%）]、GA[492（91.45%）],病例组-597 G/A多态性与对照组差异无统计学意义（P>0.05）；IL-6基因-572G/C位点有CC、GG、GG三种基因型,-572 G/C基因型频率为CC[148（27.5%）]、GG[62（11.5%）],CG[174（64.7%）]。病例组IL-6基因-572C/G多态性与对照组差异有统计学意义（P<0.05）,病例组中不同性别和民族的等位基因频率差异有统计学意义（P<0.05）。IL-6基因-572 C/G不同基因型间中性粒细胞差异有统计学意义（P<0.05）,相关分析显示两者有相关性（r=0.63,P<0.05）。IL-6基因-572 C/G基因型与TC、HDL-C密切相关,高血压可能是不同基因型组间VTE的可能保护因素,IL-6基因-572C/G不同基因型组间血压和心率有显著差异（P<0.05）。IL-6基因-572 C/G的CC型和CG+GG型相比,左心功能不全患病率较高,预后较差（P<0.05）。IL-6基因-572C/G基因多态性与VTE心电图表现可能有相关性。结论：炎症与VTE密切相关,炎性因子水平升高可能是VTE发生的预测指标和重要的危险因素,炎症因子通过增强和升高凝血因子的水平发挥促凝作用,可能是VTE的发病机制之一。IL-6基因-572C/G多态性可能与VTE的易感性有一定相关性。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 研究内容与方法
• 1 研究对象
• 2 主要试剂
• 3 主要仪器
• 4 方法
• 5 EILSA方法介绍
• 6 统计学分析
• 结果
• 讨论
• 小结
• 致谢
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 攻读硕士期间发表的学位论文
• 导师评阅表