熊果酸包合物的研制及其在家兔体内生物等效性评价

论文摘要

熊果酸（ursolic acid,UA）,为五环三萜类化合物,广泛存在于山楂、枇杷叶、吕贞子、乌梅、车前草、白花蛇草等多种植物中,是自然界分布较广的天然活性化合物。熊果酸具有多种生物学效应,尤其是近年来发现它有较强的抗肿瘤活性,引起了国内外医药工作者的高度关注。但由于熊果酸的强疏水性使其溶出速率极慢,从而可能导致生物利用度低,大大影响了疗效。本研究采用γ-环糊精包合物技术,对以提高溶解度和溶出速率为目的的熊果酸γ-环糊精包合物的制备技术及其在家兔体内药动学过程进行了研究。并对熊果酸包合物、固体分散体和脂质体三种制剂在家兔体内的药动学参数进行了生物等效性评价。通过试验,找出了影响包合物包合率的制备方法,确定采用研磨法制备熊果酸γ-环糊精包合物。采用二次正交旋转设计法优选熊果酸γ-环糊精包合物处方,并最终确定最佳处方。采用差热分析法（DSC）、红外法（IR）、X-射线衍射法、溶出速率测定、溶解度测定等方法对熊果酸γ-环糊精包合物的质量进行了鉴别和检查,结果显示熊果酸在载体中以非晶形存在,在水中的溶解度和溶出速率显著提高。建立高效液相色谱法测定家兔血浆中熊果酸浓度的分析方法,以乙腈:磷酸缓冲液为80:20,每1000ml加入7mmol的γ环糊精作为流动相。通过对精密度、方法回收率、提取回收率、线性范围、稳定性、检测限、定量限、专属性等效能指标的考核对方法学进行评价。采用全排列组合,自身对照随机三制剂、三周期、三交叉试验设计方法,将受熊果酸包合物、熊果酸固体分散体和参比制剂熊果酸纳米脂质体分别对18只健康家兔随机给药。给药后分别于0.5、1、1.5、2、3、4、6、8、10、12、15、24h从家兔耳缘静脉取血,将滴出的血样收集于肝素管中,3000r/min离心十分钟后,取上清于-15℃保存,3天内完成熊果酸血药浓度的测定。采用高效液相色谱法测定家兔血浆中熊果酸浓度,应用DAS 2.0软件计算熊果酸三种制剂的药动学参数,并对AUC、Cmax和Tmax进行方差分析、双单侧t检验以及90%置信区间等效性统计学分析。结果表明,本实验所制备的熊果酸包合物包合率高,溶解度相对原料药有显著提高。本实验建立的HPLC分析方法检测精密度高,准确性较好,选择性强,操作简便、快捷、重现性好。所有效能指标均符合相关进行药动学及生物等效性研究的试验要求。熊果酸三种制剂在家兔体内的AUC、Cmax和Tmax值均比原料药有显著提高,但各制剂间的AUC、Cmax和Tmax却有显著差异,即三种制剂在家兔体内不具有生物等效性。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 第一章 熊果酸包合物的制备及其质量评价
• 仪器与试药
• 包合物的制备工艺
• 讨论
• 第二章 建立熊果酸家兔血浆样品分析方法学
• 仪器与试药
• 方法学的建立
• 讨论
• 第三章 熊果酸制剂在家兔体内的生物等效性评价
• 仪器与试药
• 实验对象
• 实验设计和方法
• 统计学处理
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 致谢
• 附录1（攻读学位期间发表论文目录）
• 附录2 （附图）