HPLC-DAD指纹图谱技术用于峨眉雅连品质评价研究

论文摘要

本文在查阅大量文献资料的基础上，结合确保峨眉雅连的声誉，抢救濒危的峨眉野连和推广峨眉黄连（雅连、味连）GAP种植的实际需要，研究并建立了道地雅连的高效液相指纹图谱，为中国雅连质量标准的制定提供依据。全文包括两部分内容：一、主要对以下四部分的内容做了详实的综述中药指纹图谱技术概述；构建中药指纹图谱的方法及其应用；中药色谱指纹图谱研究过程中的关键问题；中药指纹图谱存在的问题与展望。二、道地中药材雅连高效液相指纹图谱的建立采用HPLC-DAD（高效液相色谱-二级管陈列检测器）技术，结合一系列高效提取分离技术，在取得大量色谱实验数据的基础上，建立起峨眉产雅连的HPLC指纹图谱并进行解码。其中包括供试品溶液及参照物溶液的制备、色谱梯度洗脱条件、检测波长、色谱柱温度、进样量等实验条件的确定，以及稳定性、精密度、重现性等三方面方法学实验考察。通过大量的实验，最后确立了最佳实验条件：采用盐酸-甲醇（1：100）作为溶剂提取雅连中的生物碱类物质，在10μl的进样量和色谱柱温度为40℃条件下，用不同比例0.05moL／L磷酸二氢钾溶液（A）-乙腈（B）流动相以1mL／min的流速进行梯度洗脱，最佳检测波长为345nm。稳定性、精密度、重现性三方面方法学实验考察结果表明，共有峰中各峰相对保留时间的RSD均小于0.5％，相对积分面积RSD均小于3.0％。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 绪论
• 1 中药及指纹图谱技术概述
• 1.1 前言
• 1.2 何为中药指纹图谱
• 1.3 建立中药指纹图谱意义
• 1.4 中药指纹图谱的研究内容及其特点
• 1.5 中药指纹图谱的建立原则
• 2 构建中药指纹图谱的方法及其应用
• 2.1 光谱法
• 2.1.1 红外光谱法（IR）
• 2.1.2 紫外光谱法（UV）
• 2.2 色谱法
• 2.2.1 薄层色谱法（TCL）
• 2.2.2 气相色谱法（GC）
• 2.2.3 高效液相色谱法（HPLC）
• 2.3 高效毛细管电泳（HPCE）
• 2.4 高速逆流色谱（HSCCC）
• 2.5 X射线衍射法
• 2.6 核磁共振（NMR）指纹图谱
• 2.7 质谱（MS）指纹图谱
• 2.8 分子生物学技术
• 2.9 联用技术
• 3 中药指纹图谱的信息解析
• 3.1 主成分分析法
• 3.2 非线性映照法
• 3.3 聚类分析法
• 3.4 人工神经网络
• 4 中药色谱指纹图谱研究过程中的关键问题
• 4.1 研究对象的确定
• 4.2 原药材、中间体及成品样品的选择与收集
• 4.3 原药材、中间体、及成品的预处理
• 4.4 色谱条件的选择
• 4.4.1 流动相
• 4.4.2 检测波长的选择
• 4.4.3 柱温的设定
• 4.4.4 色谱柱的选择
• 4.4.5 进样量的控制
• 4.4.6 色谱条件的优化
• 4.4.7 色谱指纹图谱的建立和评价
• 5 中药指纹图谱存在的问题与展望
• 第2章 雅连提取物指纹图谱的研究
• 1 引言
• 2 实验部分
• 2.1 样品
• 2.2 仪器与试剂
• 2.3 雅连提取物中生物碱成分指纹图谱研究
• 2.3.1 溶液的制备
• 2.4 雅连总生物碱相对含量测定
• 2.4.1 对照品溶液的制备
• 2.4.2 供试品溶液的制备
• 2.4.3 测定法
• 3 结果与讨论
• 3.1 雅连提取物中生物碱类成分指纹图谱研究结果及讨论
• 3.1.1 实验方法的确定
• 3.1.2 方法学考察
• 3.1.3 雅连提取物生物碱类成分指纹图谱及技术参数
• 3.2 雅连总生物碱含量测定结果
• 结论
• 致谢
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间发表论文