几种稀有虫草的分子系统学研究

论文摘要

虫草种类繁多，国际真菌名录数据库2010年列出的种名已达534种，中国目前所报道的种类只有约130多种。因此，做好虫草资源调查，深入了解具有应用价值的虫草并进行合理开发，有着十分重要的意义。本文对几种稀有的虫草进行了形态描述，且分离得到其无性型，并通过分子系统学方法对他们进行了分类。据Sung等人的分类系统，麦角菌科和广义的虫草属不再是一个单系群。麦角菌科被重新划分为3个科，虫草属被分为成为4个属，包括Cordyceps s. str.、Elaphocordyceps、Metacordyceps和Ophiocordyceps。在形态学鉴定的基础下，本研究通过对核糖体序列的分析，研究了几株稀有虫草的分类地位。研究结果如下：莲状虫草的子囊孢子成熟后不断裂形成次生子囊孢子，具有明显的微循环产孢现象。通过18S rDNA和28S rDNA序列研究后发现，莲状虫草的无性型为一种刺束梗孢。从黄棒虫草上分离得到其无性型，通过18S rDNA序列分析后发现，其无性型为一种被毛孢，并验证了黄棒虫草属于Ophiocordyceps属。发现了一个特殊的粉被虫草，寄主为双翅目蝇类，分离得到其无性型粉被玛利亚霉并描述。从草剃虫草上分离得到其无性型，通过ITS序列分析后发现，草剃虫草应属于Metacordyceps属。其无性型归属还有待于进一步研究。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 文献综述
• 1.1 分子系统学研究概述
• 1.1.1 分子系统学的发展
• 1.1.2 分子系统学研究的一般程序
• 1.1.3 分子系统学数据的分析方法
• 1.2 虫草属分子系统学研究
• 1.2.1 虫草资源的应用价值
• 1.2.2 虫草无性型的研究
• 1.2.3 分子系统学在虫草研究上的应用
• 1.2.4 虫草属分类及分子系统学研究进展
• 2 引言
• 3 材料与方法
• 3.1 实验材料
• 3.1.1 有性型标本及无性型菌株
• 3.1.2 主要实验药品及来源
• 3.1.3 主要仪器设备
• 3.1.4 主要培养基
• 3.1.5 主要试剂及配置
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 标本采集
• 3.2.2 菌种的分离和纯化
• 3.2.3 标本的保藏
• 3.3 菌种鉴定
• 3.3.1 有性型的鉴定
• 3.3.2 无性型的鉴定
• 3.4 分子系统学研究
• 3.4.1 DNA提取
• 3.4.2 DNA检测
• 3.4.3 PCR扩增
• 3.4.4 扩增产物的检测
• 3.4.5 测序
• 3.4.6 序列分析及系统发育树的构建
• 4 结果与分析
• 4.1 莲状虫草Cordyceps nelumboides
• 4.1.1 莲状虫草有性型
• 4.1.2 莲状虫草无性型
• 4.1.3 莲状虫草分子系统学研究
• 4.2 黄棒虫草 Ophiocordyceps clavata
• 4.2.1 黄棒虫草无性型
• 4.2.2 黄棒虫草无性型分子系统学研究
• 4.3 粉被虫草Cordyceps pruinosa
• 4.3.1 与常见粉被虫草有性型形态比较
• 4.3.2 本种无性型形态研究
• 4.3.3 ITS序列分析
• 4.4 草剃虫草Cordyceps kusanagiensis
• 4.4.1 草剃虫草无性型研究
• 4.4.2 草剃虫草分子系统学研究
• 5 讨论
• 5.1 莲状虫草及其无性型
• 5.2 几种虫草的分类地位
• 5.3 虫草与寄主的关系
• 6 结论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介
• 在读期间发表的学术论文