树舌多糖GF对小鼠HepA瘤细胞可溶性蛋白质组及核蛋白MDM-2表达的影响

论文摘要

目的:在对树舌多糖GF的抗肿瘤作用及其机制的研究取得阶段性成果的基础上,对树舌多糖GF作用于小鼠HepA瘤细胞的可溶性蛋白质组及核蛋白MDM-2表达的影响进行研究,旨在蛋白质组水平上为树舌多糖GF寻找新的作用靶点,为其作为抗肿瘤药物的临床应用提供更为充分的理论依据。 方法:昆明种小鼠36只,随机分为3组:正常对照组、肿瘤组和树舌多糖组。肿瘤组和树舌多糖组小鼠接种HepA瘤细胞。接种后各组肌肉注射给药,分别给与生理盐水和树舌多糖GF。连续10天,于末次给药24h,处死小鼠,剥离肿瘤组织。采用免疫组化法检测肝脏和瘤组织的癌基因MDM-2的表达,采用1D-SDS-PAGE和2-DE的方法检测可溶性蛋白的表达,dot blot法和Western blot法检测抑癌基因PTEN的表达。 结果:①在可溶性蛋白的1D-SDS-PAGE中,正常组得到16条条带,肿瘤组得到24条条带,树舌多糖组得到18条条带。与正常组相比,肿瘤组有三条条带表达下调,11条条带表达上调。树舌多糖GF可以使肿瘤细胞三条表达下调的蛋白带和8条表达上调的蛋白带恢复正常。②在可溶性蛋白的2-DE中,肿瘤组得到101个蛋白质斑点,树舌多糖组得到85个斑点。仅在肿瘤组出现的蛋白质点有54个,仅在树舌多糖组出现的蛋白质点有38个,肿瘤组和树舌多糖组共有的蛋白质点中表达量相差两倍以上的点有14个。③肿瘤组抑癌基因PTEN的表达量明显低于树舌多糖组。④树舌多糖组MDM-2癌基因的表达量明显低于肿瘤组（P<0.01）。 结论:①小鼠HepA瘤细胞可溶性蛋白组分的表达状态与正常肝脏细胞存在差异。②树舌多糖GF可以影响小鼠HepA瘤细胞多种可溶性蛋白的表达。③树舌多糖GF可以显著增强小鼠HepA瘤细胞可溶性蛋白之一抑癌基因PTEN的表达,从而抑制肿瘤的生长。④树舌多糖GF可以降低小鼠HepA瘤细胞核蛋白MDM-2癌基因的表达。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 第一章 文献综述
• 1.1 蛋白质组技术及其应用
• 1.2 肝癌的分子机制
• 1.3 MDM-2研究进展
• 1.4 PTEN研究进展
• 1.5 树舌多糖GF
• 第二章 树舌多糖GF对小鼠HepA瘤细胞可溶性蛋白组分的影响——1D-SDS-PAGE
• 第三章 树舌多糖GF对小鼠HepA瘤细胞可溶性蛋白组分的影响——2-DE
• 第四章 dot blot和Western Blot法检测树舌多糖GF对小鼠HepA瘤细胞PTEN蛋白表达的影响
• 第五章 免疫组化法检测树舌多糖GF对小鼠HepA瘤细胞MDM-2基因表达的影响
• 结论
• 致谢
• 在读期间撰写论文
• 参考文献
• 附图