慢性阻塞性肺病NF-κB和血清炎症因子水平与全身效应的关系

论文摘要

慢性阻塞性肺疾病（Chronic Obstructive Pulmonary Disease,COPD）已成为一个重要的公共卫生问题。COPD目前居全球死亡原因的第4位,WHO的Global Burden of Disease study研究预示,至2020年COPD将仅次于缺血性心脏病、脑血管疾病居全球范围死亡原因的第3位。目前,中国约有43,000,000慢阻肺患者。近年来,COPD发病率的日益升高,患者的肺功能日渐下降,同时存在生理功能障碍、活动能力下降、致残等长期严重不良后果。COPD的发病机制尚未完全明了,目前普遍认为COPD以气道、肺实质和肺血管的慢性炎症为特征,在肺的不同部位有肺泡巨噬细胞、T淋巴细胞（尤其是CD8+）和中性粒细胞增加,部分患者有嗜酸性粒细胞增多。多数研究证实,激活的炎症细胞释放多种介质,这些炎症介质在COPD发生、发展过程中发挥重要作用。转录调节因子NF-κB是目前炎症反应中的研究热点,大量科研数据证实,在炎症急性反应期,NF-κB激活调节多种炎性因子的转录,形成炎症反应的级联放大效应。目的:本实验检测NF-κB、TNF-α、IL-8、IL-6、IL-1在COPD稳定期患者血清中的表达水平,以及与COPD患者的肺功能、活动耐力的关系,初步探讨NF-κB、TNF-α、IL-8、IL-6、IL-1在老年COPD稳定期中的临床意义及其潜在应用价值。方法:患者来源于河南省人民医院呼吸内科住院患者（2008年12月-2009年12月）,正常对照组均来自门诊健康体检者。根据中华医学会呼吸分会慢性阻塞性肺疾病诊治指南筛选稳定期患者,患者与健康体检者均行肺功能测定及6分钟步行实验。清晨空腹抽取静脉血6ml,COPD患者稳定期30例,正常对照组30例。分离血清后采用ELISA法测定TNF-α、IL-8、IL-6、IL-1的含量,剩余血细胞用淋巴细胞分离液分离出单个核细胞,提取核蛋白,同时用紫外可见分光光度计在595nm处测OD值,可通过标准曲线求出标本中核蛋白浓度,后用ELISA测定NF-κB浓度。应用SPSS14.0统计软件进行统计学分析,采用t检验、直线相关分析等统计学方法对数据结果进行处理。设定Р<0.05,有统计学意义。结果:①COPD稳定期患者外周血单个核细胞NF-κB浓度为457.14±227.95,较正常对照组NF-κB浓度（87.22±33.41）显著升高（Р<0.05）。②COPD稳定期患者血清TNF-α浓度60.41±13.04,IL-8浓度为45.23±4.03,IL-6浓度为49.01±6.12,IL-1浓度为32.41±6.52,较正常对照组显著升高,具有统计学意义。③COPD稳定期患者NF-κB的表达与血清TNF-α、IL-8、IL-6、IL-1浓度变化都呈正相关,其相关系数分别为r =0.407、r =0.763、r =0.485、r =0.607。④NF-κB、TNF-α、IL-8与FEV1.0呈显著负相关（r =-0.428、r =-0.388、r =-0.538,Р<0.05）;TNF-α与体重指数呈显著负相关（r =-0.433,Р<0.05）,而IL-6、IL-1与体重指数也有负相关趋势,但未达到统计学显著性水平;NF-κB、IL-8与6分钟步行距离呈显著负相关（r =-0.465、r =-0.418,Р<0.05）,而TNF-α、IL-6、IL-1与6分钟步行距离也有负相关趋势,但未达到统计学显著性水平。⑤肺功能与6分钟步行距离存在显著正相关（r =0.535,Р<0.05）,体重指数与肺功能、6分钟步行距离有正相关趋势,但未达到统计学显著性水平。结论:NF-κB在COPD炎症反应中起了重要作用,即使在COPD稳定期NF-κB的活性也是增强的。NF-κB不断的被激活,使其调控的靶基因转录活性升高,稳定期患者炎性因子TNF-α、IL-8、IL-6、IL-1表达明显升高,血清中炎症因子表达水平的增高提示COPD的慢性炎症不仅表现在肺部,还可以有全身炎症反应,表现为体质量下降、营养不良、骨骼肌功能障碍、骨质疏松等,而导致患者活动耐力下降,6分钟步行距离减少。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 前言
• 1. 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 仪器
• 1.1.2 试剂
• 1.2 研究对象分组
• 1.3 资料采集
• 1.3.1 入选者资料采集
• 1.3.2 入选者静脉血采集
• 1.4 炎性指标的测定
• 1.4.1 单核细胞分离及核蛋白的提取
• 1.4.2 核蛋白质量浓度测定（Bradford 法）
• 1.4.3 研究指标NF-κB 及炎性因子活性的测定（ELISA 法）
• 1.4.4 统计学分析
• 2. 结果
• 2.1 研究对象临床特征
• 2.2 NF-ΚB 含量在各组之间的变化
• 2.3 TNF-Α、IL-8、IL-6、IL-1 在稳定期COPD 组和正常对照组血清中的浓度变化
• 2.4 稳定期COPD 患者NF-ΚB 的表达与血清TNF-Α、IL-8、IL-6、IL-1 浓度变化的相关性比较
• 2.5 稳定期COPD 患者体重指数与正常组体重指数比较
• 2.6 稳定期COPD 患者炎性介质与肺功能的相关关系
• 2.7 稳定期COPD 患者炎性介质与体重指数的相关关系
• 2.8 稳定期COPD 患者炎性介质与6 分钟步行距离的相关关系
• 2.9 稳定期COPD 患者肺功能、6 分钟步行距离、体重指数之间的相关关系
• 3. 讨论
• 4. 结论
• 参考文献
• 文献综述
• 缩略词表
• 致谢