脊髓损伤修复相关的蛋白Arrestin、Dynein、Dynactin、Tubulin、Glypican和Vimentin及其mRNA在脊髓损伤后不同时间的动力学变化的研究

脊髓损伤修复相关的蛋白Arrestin、Dynein、Dynactin、Tubulin、Glypican和Vimentin及其mRNA在脊髓损伤后不同时间的动力学变化的研究

论文摘要

脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)是一类高致残率的中枢神经系统(central nervous system ,CNS)疾病,SCI 的治疗一直是困扰神经生物学的重大难题。近年来科学家尝试用多种手段治疗脊髓创伤,如外周神经移植、胚胎脊髓组织移植、细胞治疗和基因治疗等,取得了显著进展。然而脊髓损伤后功能恢复的研究至今都是一个不能解决的难题,主要原因是对其分子机理的研究不明。脊髓损伤与修复是一个非常复杂的过程,它涉及到无数个基因与蛋白质的变化。国际上许多文献对脊髓损伤后功能的恢复进行了报道,并且取得了显著的成绩。然而时至今日人们对脊髓损伤分子机理的了解也是片面不完全的。在建立了Wistar大鼠脊髓全断模型的基础上,用改良的蛋白质组学技术,对损伤前后的大鼠脊髓进行了比较蛋白质组学研究。发现至少有31 个蛋白质点在损伤前后发生了上调或者下调的变化。本论文是在我室的研究基础上,再次用Western blot 和RT-PCR 技术研究其中6 个与脊髓损伤修复相关蛋白Arrestin, Dynein, Dynactin, Tubulin, Glypican, and Vimentin 及相对应的mRNA 在不同时间内的动力学变化。从中我们观察到与正常对照组相比,这6 种蛋白及其mRNA 的表达量在损伤1,3,5 天内均发生了不同的变化并表现出一些规律性,我们推测这6 种蛋白与脊髓损伤和修复有关,此研究为进一步探讨脊髓损伤修复的分子机制提供了一定的研究基础。

论文目录

  • 第一部分 绪论
  • 第二部分 大鼠脊髓损伤模型的建立以及蛋白的提取
  • 一 实验材料
  • 1.实验动物
  • 2. 仪器设备
  • 3. 试剂
  • 4. 溶液配制
  • 二、实验方法
  • 1. 模型的建立
  • 2. 大鼠脊髓可溶性蛋白与膜蛋白样品的提取
  • 2.1 可溶性蛋白的提取
  • 2.2 膜蛋白的提取
  • 3. 蛋白样品的定量
  • 三、结果和讨论
  • 1. 蛋白样品的提取方法
  • 2. 蛋白质定量方法
  • 第三部分 通过改良蛋白质组学技术对大鼠脊髓损伤前后蛋白表达变化的分析研究
  • 一、实验材料
  • 1.实验动物
  • 2. 主要试剂
  • 3. 主要仪器
  • 二、实验方法
  • 三、实验结果和讨论
  • 第四部分 对六种脊髓损伤后上调表达的蛋白质及其mRNA的动力学变化分析
  • 实验 A脊髓损伤后六种上调表达的蛋白质的动力学变化
  • 一、实验材料
  • 1. 实验动物
  • 2. 主要试剂
  • 3. 主要仪器
  • 二、实验方法
  • 1. 模型的建立与蛋白的提取
  • 2. Westernblot 检测
  • 三、实验结果
  • 实验B 对与六种脊髓损伤后上调表达的蛋白质相对应的mRNA的RT-PCR18分析
  • 一、实验材料
  • 1.实验动物
  • 2.主要试剂
  • 3. 主要仪器
  • 4. 引物序列
  • 二、实验方法
  • 1.脊髓损伤修复模型的建立
  • 2.总RNA提取
  • 3.RNA浓度和纯度鉴定
  • 4. cDNA的制备
  • 5.目的序列的扩增反应
  • 三、实验结果
  • 1. RNA浓度和纯度鉴定
  • 2. 目的序列的扩增结果
  • 四、讨 论
  • 参考文献
  • 致谢
  • 中文摘要
  • ABSTRACT
  • 相关论文文献

    • [1].β-arrestin与β-肾上腺素受体[J]. 中国细胞生物学学报 2012(11)
    • [2].β-arrestin在血管紧张素Ⅱ信号通路中的作用[J]. 肾脏病与透析肾移植杂志 2013(03)
    • [3].β-arrestin介导的血管紧张素Ⅱ受体信号通路与心血管疾病[J]. 中华老年心脑血管病杂志 2016(02)
    • [4].β-arrestin信号转导通路在炎症性肠病发生过程中的作用机制[J]. 世界华人消化杂志 2010(29)
    • [5].β-arrestin在神经精神疾病中的作用及偏向型配基的应用前景[J]. 南京医科大学学报(自然科学版) 2020(05)
    • [6].益心泰对慢性心力衰竭大鼠心室重构及p-p38MAPK、β-arrestin蛋白表达的影响[J]. 湖南中医药大学学报 2020(09)
    • [7].敲除含α-Arrestin结构域蛋白3对肾癌细胞PI3K/AKT信号通路及增殖能力的影响[J]. 现代生物医学进展 2020(13)
    • [8].大黄丹参上调β-arrestin基因表达阻止大鼠实验性急性胰腺炎重症化进程[J]. 中华中医药学刊 2013(09)
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    • [10].丹参酮ⅡA通过EP2调控β-arrestin/β-catenin信号通路抑制大肠癌侵袭转移机制[J]. 中华中医药杂志 2019(05)
    • [11].β-arrestin基因表达对大鼠实验性急性胰腺炎重症化进程的影响[J]. 浙江医学 2013(07)
    • [12].β-arrestin的研究进展及与纤维化的关系[J]. 重庆医学 2015(15)

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