STAT3基因RNAi和杠柳苷诱导肝癌细胞凋亡以及对STAT3信号通路的影响

论文摘要

目的:观察STAT3基因特异性RNAi和杠柳苷对人肝癌细胞SMMC7721凋亡的影响,分析其对SMMC7721细胞STAT3信号转导通路的调控作用和对STAT3信号转导相关分子基因表达的影响,为STAT3信号通路的肿瘤靶向治疗提供理论依据。方法:1采用RNAi技术,特异性沉默SMMC7721细胞中STAT3的表达,通过Western blot技术和半定量RT-PCR法检测经RNAi作用后SMMC7721细胞STAT3表达水平的变化。2采用透射电镜和流式细胞技术分析经RNAi特异性沉默SMMC7721细胞中STAT3的表达后,对细胞凋亡的影响。通过半定量RT-PCR法检测细胞凋亡相关因子bcl-2和survivin基因表达的变化。3以不同浓度的杠柳苷（2.5、5.0、10.0μg / ml）干预SMMC7721细胞,并设空白对照。干预12、24、48小时后,分别用MTT比色法分析细胞增殖情况。4通过半定量RT-PCR法检测2.5μg / ml杠柳苷作用不同时间（12、24、48h）后,SMMC7721细胞STAT3基因表达水平的变化。5应用流式细胞技术分析2.5μg / ml杠柳苷作用于SMMC7721细胞不同时间（12、24、48h）后,对细胞凋亡的影响。采用半定量RT-PCR法检测杠柳苷对SMMC7721细胞凋亡相关因子bcl-2和survivin基因表达的影响。结果:1 STAT3基因特异性RNAi可有效沉默SMMC7721细胞中STAT3的表达（P<0.01）。2 STAT3的表达被RNAi特异性沉默后,SMMC7721细胞凋亡的百分比明显增加,与对照组相比有显著性差异（P<0.01）。bcl-2和survivin mRNA的表达水平均受到明显抑制,与对照组相比有显著性差异（P<0.01）。3与对照组相比较,杠柳苷各实验组SMMC7721细胞增殖水平明显下降（P<0.01）。并且随药物浓度的增加和作用时间的延长抑制作用增强,2.5μg/ml杠柳苷作用24h对细胞的抑制率可达到48.31%。4半定量RT-PCR分析结果显示,杠柳苷处理后,SMMC7721细胞中STAT3 mRNA的表达水平明显降低,与对照组相比有显著性差异（P<0.01）。5杠柳苷可显著增加SMMC7721细胞凋亡的百分比,2.5μg/ml的杠柳苷作用12h、24h、48h的SMMC7721细胞凋亡率较对照组相比明显增高,有显著性差异（P<0.01）。杠柳苷处理后,SMMC7721细胞bcl-2、survivin mRNA表达受到明显抑制,与对照组相比有显著性差异（P<0.01）。结论:1 STAT3基因特异性RNAi可有效沉默SMMC7721细胞中STAT3的表达。2 STAT3基因特异性RNAi可诱导SMMC7721细胞凋亡,并下调SMMC7721细胞bcl-2、survivin mRNA的表达。3杠柳苷可明显抑制SMMC7721细胞的增殖。4杠柳苷可抑制SMMC7721细胞中STAT3的表达。5杠柳苷可诱导SMMC7721细胞凋亡,下调SMMC7721细胞bcl-2、survivin mRNA的表达,提示杠柳苷诱导SMMC7721细胞凋亡与下调bcl-2、survivin mRNA的表达及抑制STAT3信号转导通路有关。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 研究论文 STAT3基因RNAi和杠柳苷诱导肝癌细胞凋亡以及对STAT3 信号通路的影响研究
• 引言
• 第一部分 STAT3 基因RNAi 诱导肝癌细胞SMMC7721 凋亡及对STAT3 信号通路的影响
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 附表
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 第二部分 杠柳苷诱导肝癌细胞 SMMC7721 凋亡及对STAT3 信号通路的影响
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 附表
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述 肿瘤STAT3 靶向治疗的研究进展
• 致谢
• 个人简历