论文摘要
目的:1.心肌缺氧/复氧损伤是多因素所致的复合性损伤,但其具体机制仍不清。本文旨在探讨氧自由基在乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤中的作用。2.研究表明,钙离子超载参与了心肌缺氧/复氧损伤,本文通过观察细胞内钙离子浓度在乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤中的变化,显示钙离子超载在心肌缺氧/复氧损伤中的作用。3.探讨还原型谷胱甘肽（GSH）作为一种自由基清除剂及钙离子拮抗剂,对缺氧/复氧培养乳鼠心肌细胞损伤的保护作用。方法:取出生1～3天的Wistar大鼠,剪取心尖部组织,将心肌剪成约0.5～1mm3大小的碎块,用0.25%胰酶消化4～5次,收集除第一次消化后的上清液,将收集到的上清液在4℃、500r/min的速度下离心10min,弃去上清液,用平衡盐溶液洗涤细胞。然后用DMEM培养基配制成细胞悬液。应用差速贴壁法分离纯化心肌细胞。将原代培养的乳鼠心室肌细胞分为正常对照组与还原型谷胱甘肽不同浓度处理组。将正常培养72小时后的心肌细胞换用缺氧缺糖DMEM培养基,培养板放入充有99.5%N2的密闭容器中,37℃密闭培养2h。将缺氧的心肌细胞换用饱含95%O2+5%CO2的含糖DMEM培养基,正常条件下培养1小时,建立缺氧/复氧损伤模型。缺氧、复氧前均给GSH0、40、80、160mg/L浓度,缺氧2小时,复氧1小时,在缺氧前、缺氧2小时及复氧1小时检测培养液中超氧化物歧化酶
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