论文摘要
利用常规层析法（SephadexG-150和DEAE-Cellulose-32）以及一种改进方法(EDTA—Mg2+沉淀、电洗脱)两种途径纯化了中国明对虾的成熟卵巢中的卵黄蛋白,利用电洗脱法纯化了其卵和幼体中的卵黄蛋白。对卵巢中卵黄蛋白的研究表明:该蛋白是一种糖脂磷类胡萝卜素蛋白,总分子量为409 ku,等电点为5.4,含糖量8.7%,具有5个亚基（202 ku、171 ku、105 ku、80 ku和73 ku）,亚基之间有1个二硫键。卵中的卵黄蛋白总分子量为404 ku,有6个亚基（202 ku、188 ku、171 ku、105 ku、80 ku和66 ku）;幼体（N4期）体内卵黄蛋白总分子量为390 ku,有5个亚基（202 ku、188 ku、171 ku、105 ku、80 ku）。从卵巢到卵再到无节幼体N4期,卵黄蛋白的亚基组成是变化的,其间可能经过了亚基重排或者其他修饰过程。 制备了中国明对虾卵黄蛋白的抗血清并运用免疫学方法从成熟雌性中国明对虾血淋巴中检测到了卵黄蛋白原。利用层析（DEAE—Cellulose—32）或改进方法——EDTA—Mg2+法对中国明对虾血淋巴处理后再用电洗脱法纯化了中国明对虾的卵黄蛋白原。中国明对虾卵黄蛋白原是一种糖脂磷类胡萝卜素蛋白,总分子量为476 ku,等电点5.2,含糖量11.6%,具有3个亚基（171 ku,94 ku,80 ku）,亚基之间未发现二硫键。卵黄蛋白原比卯黄蛋白更加不稳定。 分别用柱层析（DEAE—Cellulose—32）砷电洗脱法提纯了克氏原螯虾卵巢的卵黄蛋白。克氏原螫虾卵黄蛋白也是一种糖脂磷类胡萝卜素蛋白,总分子量为481 ku,等电点为5.6,含糖量19.8%,具有6个亚基（198 ku、176 ku、132 ku、111 ku、92 ku、82 ku）,亚基之间有1个二硫键。比较了中国明对虾卵黄蛋白和克氏原螯虾卵黄蛋白部分生化性质的异同。
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摘要Abstract目录第1章 绪论1.1 研究现状1.1.1 卵黄蛋白和卵黄蛋白原的性质研究进展1.1.2 卵黄蛋白及卵黄蛋白原的产生部位1.1.3 卵黄蛋白与卵黄蛋白原的营养价值1.2 研究目的1.3 研究意义第2章 中国明对虾卵黄蛋白的纯化及卵黄蛋白原的鉴定2.1 引言2.2 材料与方法2.2.1 材料2.2.2 仪器2.2.3 方法2.3 结果2.3.1 卵黄蛋白的鉴定2.3.2 卵黄蛋白的提纯2.3.3 中国明对虾血淋巴中卵黄蛋白原的鉴定2.4 讨论第3章 中国明对虾卵黄蛋白原的分离与纯化3.1 引言3.2 材料与方法3.2.1 材料3.2.2 仪器3.2.3 方法3.3 结果3.3.1 阴离子交换柱层析纯化3.3.2 选择沉淀纯化3.3.3 电洗脱结果3.4 讨论第4章 中国明对虾卵黄蛋白原与卵黄蛋白的部分生化性质比较4.1 引言4.2 材料与方法4.2.1 材料4.2.2 仪器4.2.3 方法4.3 结果4.3.1 糖蛋白染色4.3.2 脂蛋白染色4.3.3 磷蛋白染色4.3.4 总分子量测定4.3.5 亚基数目及分子量4.3.6 类胡萝卜素检测4.3.7 糖含量的测定4.3.8 等电点测定4.3.9 二硫键数目的测定4.3.10 卵黄蛋白原热稳定性检测4.4 讨论第5章 中国明对虾卵及无节幼体中卵黄蛋白性质比较5.1 引言5.2 材料与方法5.2.1 材料5.2.2 仪器5.2.3 方法5.3 结果4期无节幼体中卵黄蛋白的免疫学鉴定'>5.3.1 卵及N4期无节幼体中卵黄蛋白的免疫学鉴定4期无节幼体电泳比较'>5.3.2 卵和N4期无节幼体电泳比较4期无节幼体总分子量'>5.3.3 卵和N4期无节幼体总分子量4期无节幼体中卵黄蛋白的提纯'>5.3.4 卵和N4期无节幼体中卵黄蛋白的提纯4期无节幼体中卵黄蛋白的亚基及其分子量'>5.3.5 卵和N4期无节幼体中卵黄蛋白的亚基及其分子量5.4 讨论第6章 中国明对虾卵黄蛋白与克氏原鳌虾卵黄蛋白的比较6.1 引言6.2 材料与方法6.2.1 材料6.2.2 仪器6.2.3 方法6.3 结果6.3.1 卵黄蛋白的鉴定6.3.2 层析法纯化卵黄蛋白6.3.3 电洗脱纯化卵黄蛋白6.3.4 糖蛋白染色6.3.5 脂蛋白染色6.3.6 磷蛋白染色6.3.7 总分子量测定6.3.8 类胡萝卜素辅基检测6.3.9 亚基数目及分子量测定6.3.10 糖含量测定6.3.11 二硫键数目的测定6.3.12 等电点测定6.4 讨论第7章 结语参考文献附录致谢
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