论文摘要
目的：通过不同浓度达肝素钠对人肺腺癌A549细胞株中VEGF、VEGFR及HIF-1ɑ的作用的研究，探讨达肝素钠抑制肿瘤细胞增殖的具体机制。方法：1.体外培养人肺腺癌A549细胞，用不同浓度的达肝素钠作用于肺腺癌A549细胞24小时，48小时。2. SYBR Green I实时荧光PCR检测A549细胞中VEGF、VEGFR及HIF-1ɑ的mRNA的表达，及不同浓度达肝素钠处理A549细胞24h和48h后的VEGF、VEGFR及HIF-1ɑ的mRNA的表达变化。3.用免疫细胞化学法检测A549细胞中VEGF、VEGFR及HIF-1ɑ蛋白表达，及不同浓度达肝素钠处理A549细胞24h和48h后的VEGF、VEGFR及HIF-1ɑ的蛋白的表达变化。结果：1. VEGF、VEGFR及HIF-1ɑ均在肺癌A549细胞中表达，不同浓度（5IU/ml,15IU/ml,50IU/ml,150IU/ml）的达肝素钠作用于A549细胞24小时和48小时后，除了5IU/ml作用24h组，VEGF、VEGFR mRNA和蛋白表达量较对照组的表达无统计学意义（P>0.05）外，其余各组VEGF、VEGFR及HIF-1ɑ蛋白表达量较对照组均显著降低VEGF、VEGFR及HIF-1ɑ的表达水平随药物浓度加大和时间的延长而逐渐减弱，有明显的浓度和时间依赖性，差异具有显著性。（P<0.05）2.肺癌A549细胞中VEGFR、HIF-1ɑ的mRNA及蛋白表达与VEGF mRNA及蛋白的表达呈明显正相关（P<0.05）。结论：1.肺腺癌A549细胞中存在着VEGF/VEGFR的自分泌机制；2.达肝素钠可以通过下调细胞VEGF、VEGFR的表达，抑制VEGF/VEGFR自分泌环，从而抑制肺腺癌A549细胞的增殖的生物学作用；3.达肝素钠可以下调HIF-1ɑ mRNA及蛋白的表达水平，间接抑制VEGF的表达。
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