液氮深低温保存同种带瓣大动脉组织结构的研究

论文摘要

目的观察三种不同保护剂对液氮冻存同种带瓣大动脉组织结构的影响,寻求最佳冷冻保护剂。方法单独使用0.1mol/L二甲基亚砜（对照组）及单独使用0.1mol/L海藻糖（实验组1）和0.1mol/L二甲基亚砜+0.1mol/L海藻糖联合应用（实验组2）作为冷冻保护剂,用光镜、免疫组化及电镜对新鲜组织及液氮保存6个月、9个月及12个月的带瓣大动脉进行了形态学观察。结果随着保存时间的延长,3组结构破坏均逐渐加重。光镜及免疫组化下观察,保存超过6个月后,3组形态学与新鲜组织比较均有改变（d=17.08-30,P<0.001）,3组之间比较差异有显著意义（d=6-13,P<0.05）。电镜下观察,保存6、9、12个月时,对照组的同种带瓣大动脉组织的超微结构改变十分明显,实验组1改变较对照组轻,实验组2的结构改变最轻。结论1、海藻糖对液氮保存的同种带瓣大动脉有较好的保护作用；2、单独使用0.1mol·L-1海藻糖作为冷冻保护剂其保护效果优于单独使用0.1mol·L二甲基亚砜；3、0.1mol/L二甲基亚砜+0.1mol/L海藻糖二者联合应用,其保护效果明显好于单独使用二者其一。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 引言
• 第一章 材料和方法
• 1.1 实验对象
• 1.1.1 材料来源及取材
• 1.1.2 实验分组
• 1.2 试剂和仪器设备
• 1.2.1 主要试剂
• 1.2.2 主要仪器设备
• 1.3 冻存液的配置
• 1.4 保存
• 1.5 解冻及漂洗
• 1.6 细菌学检查
• 1.7 实验方法
• 1.7.1 HE染色光镜观察
• 1.7.2 免疫组化
• 1.7.3 透射电镜标本制备
• 1.7.4 扫描电镜标本制备
• 1.8 统计方法
• 第二章 实验结果
• 2.1 肉眼观察
• 2.2 光镜观察
• 2.3 免疫组化
• 2.4 电镜观察
• 2.4.1 扫描电镜观察
• 2.4.2 透射电镜观察
• 2.5 免疫组化结果图
• 2.6 扫描电镜结果图
• 2.7 透射电镜结果图
• 第三章 讨论
• 3.1 液氮保存同种瓣的必要性及历史背景
• 3.2 冷冻保护剂二甲基亚砜及海藻糖的作用机制及使用现状
• 3.2.1 冷冻保护剂分类
• 3.2.2 二甲基亚砜的特点、冷冻保护机制及应用
• 3.2.3 海藻糖的特点、冷冻保护机制及应用
• 3.3 本实验的效果及分析
• 结论
• 参考文献
• 文献综述
• 附录
• 攻读学位期间发表的论文
• 致谢