γ-聚谷氨酸对铁和钙吸收率影响及毒理安全性评价

论文摘要

本试验主要研究分子量为100 kDa的Y-聚谷氨酸（γ-PGA）对铁和钙吸收的影响,并对(γPGA进行安全毒理学评价。主要包括三部分内容：1.γ-PGA对铁吸收的影响：Wistar雄性大鼠饲喂低铁日粮21d,消耗体内铁贮,建立缺铁模型。21d后断尾采血测定血红蛋白（Hb）,选取Hb<90g/L的大鼠进行试验。将模型大鼠随机分为3组,每组10个重复,单笼饲养,γ-PGA添加量分别为0.1%和0.2%,试验期为21d。试验结果表明,各试验组大鼠体重无显著差异（P>0.05）,0.1%γ-PGA组股骨相对重量极显著高于对照组（P<0.01）,0.2%γ-PGA组脾脏相对重量极显著高于对照组（P<0.01）,0.1%和0.2%γ-PGA组肝脏相对重量显著高于对照组（P<0.05）；0.1%和0.2%γ-PGA组血清铁浓度极显著高于对照组（P<0.01）,0.2%γ-PGA组血清总铁结合力极显著高于0.1%组和对照组（P<0.01）；0.1%和0.2%γ-PGA组肝脏铁浓度均极显著高于对照组（P<0.01）,0.2%γ-PGA组脾脏和股骨铁浓度极显著高于对照组（P<0.01）。说明日粮中添加γ-PGA能促进铁的吸收以及肝脏、脾脏和股骨内铁的沉积。2.γ-PGA对钙吸收的影响：Wistar雄性大鼠饲喂低钙日粮28d,建立缺钙模型。28d后测定血清降钙素水平判断模型的建立,将模型大鼠随机分为5组,每组10个重复,单笼饲养。γ-PGA添加量分别为0.1%、0.05%和0.01%,酪蛋白磷酸肽（CPP）添加量为0.1%,试验期为21d。试验结果表明,0.1% CPP和0.05%γ-PGA组日增重水平显著高于对照组（P<0.05）;0.1%γ-PGA组股骨钙浓度（P<0.05）和磷浓度（P<0.01）显著高于对照组；γ-PGA各组的骨碱性磷酸酶（BALP）浓度均极显著高于对照组和0.1% CPP组（P<0.01）。说明日粮中添加γ-PGA可以显著提高股骨钙和磷的浓度,促进骨骼发育。3.γ-PGA的毒理安全性评价：包括急性毒性试验、小鼠精子畸变试验、骨髓微核试验、Ames试验和30天喂养试验。试验结果显示：小鼠经口灌胃最大耐受剂量>15g/kg.bw,属实际无毒级；小鼠精子畸变试验和小鼠骨髓微核试验均显示阴性；鼠沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶试验选用TA97、TA98、TA100和TA102四株菌株,在S9活化和非活化系统中均显示阴性。30天喂养试验表明：雌性大鼠1.0g/kg-bw和1.5g/kg-bw组日增重均显著低于对照组（P<0.05）,1.5g/kg-bw组饲料利用率极限著低于对照组（P<0.01）; 1.5g/kg-bw组雌性大鼠的肝脏、脾脏（P<0.05）和肾脏（P<0.01）鲜重均显著低于对照组；各剂量组雌性大鼠肾脏的相对重量极显著高于对照组（P<0.01）; 0.5g/kg-bw组雌性大鼠粒细胞数目极显著高于对照组（P<0.01）; 1.0g/kg-bw组雌性大鼠的谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）均极显著高于对照组（P<0.01）,0.5g/kg-bw和1.5g kg-bw组甘油三酯（TG）浓度显著低于对照组（P<0.05）雄性大鼠各剂量组日增重和饲料利用率均极显著低于对照组（P<0.01）; 1.0g/ kg·bw组雄性大鼠的肝脏鲜重极显著低于对照组（P<0.01）,1.5g/kg-bw组大鼠的肝脏、肾脏和睾丸鲜重均极显著低于对照组（P<0.01）; 0.5g/kg-bw和1.Og/kg-bw组肝脏相对重量极显著高于对照组（P<0.01）,各剂量组肾脏和睾丸的相对重量极显著高于对照组（P<0.01）; 0.5g/kg-bw和1.0g/kg-bw组雄性大鼠的中间细胞和粒细胞数均极显著高于对照组（P<0.01）；雄性大鼠处理组的ALT极显著高于对照组（P<0.01）,肌酐（Cr）浓度和白蛋白浓度（ALB）显著高于对照组（P<0.05）,1.5g/ kg-bw组尿素氮浓度显著高于对照组（P<0.05）。结果表明：γ-PGA属于无毒级,但是,长期摄入量超过0.5g/kg·bw会对大鼠机体生长和脏器会产生危害。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1 前言
• 2 γ-PGA的研究进展
• 2.1 γ-PGA的理化性质
• 2.2 γ-PGA的合成
• 2.2.1 微生物发酵法
• 2.2.2 化学合成法
• 2.2.3 酶法
• 2.3 γ-PGA的降解
• 2.4 γ-PGA的应用研究
• 2.4.1 在食品中的应用
• 2.4.2 农业领域
• 2.4.3 环境领域
• 2.4.4 医学领域
• 2.5 试验动物模型的建立
• 2.5.1 模型建立的研究
• 2.5.2 模型建立的判定指标
• 2.6 毒理学研究
• 3 目的及意义
• 第二章 γ-聚谷氨酸对铁吸收的影响
• 2.1 引言
• 2.2 材料与方法
• 2.2.1. 试验主要仪器
• 2.2.2 试验动物
• 2.2.3 γ-PGA样品
• 2.2.4 试验日粮
• 2.2.5 饲养管理
• 2.2.6 样品的采集和制备
• 2.2.7 试验指标的测定
• 2.2.8 数据分析
• 2.3 结果与分析
• 2.3.1 体重和器官重量
• 2.3.2 血液指标
• 2.3.3 组织器官铁浓度
• 2.4 讨论
• 2.4.1 对大鼠体重及脏器指标的影响
• 2.4.2 对血液指标的影响
• 2.4.3 对组织铁浓度的影响
• 2.5 小结
• 第三章 γ-聚谷氨酸对钙吸收的影响
• 3.1 引言
• 3.2 材料与方法
• 3.2.1 试验仪器
• 3.2.2 试验样品
• 3.2.3 试验动物
• 3.2.4 试验日粮
• 3.2.5 试验方法
• 3.2.6 观察指标与测定方法
• 3.2.7 数据分析
• 3.3 结果与分析
• 3.3.1 γ-PGA对生长期大鼠体重的影响
• 3.3.2 γ-PGA对大鼠股骨重量的影响
• 3.3.3 γ-PGA对大鼠股骨矿物质的影响
• 3.3.4 γ-PGA对大鼠激素水平的影响
• 3.4 讨论
• 3.4.1 γ-PGA对体重的影响
• 3.4.2 γ-PGA对股骨的影响
• 3.4.3 γ-PGA对激素水平的影响
• 3.5 小结
• 第四章 γ-聚谷氨酸的毒理安全性评定
• 4.1 引言
• 4.2 材料及方法
• 4.2.1 试验样品
• 4.2.2 试验仪器
• 4.2.3 试验菌株
• 4.2.4 试剂
• 4.2.5 试验方法
• 4.2.5.1 急性毒性试验
• 4.2.5.2 遗传毒性试验
• 4.2.5.3 30d喂养试验
• 4.3 结果与分析
• 4.3.1 急性毒性试验结果
• 4.3.2 小鼠精子畸变试验结果
• 4.3.3 小鼠骨髓微核试验结果
• 4.3.4 Ames试验结果
• 4.3.5 30d喂养试验
• 4.3.5.1 γ-PGA对大鼠体重的影响
• 4.3.5.2 γ-PGA对大鼠脏器重量的影响
• 4.3.5.3 γ-PGA对大鼠血液常规指标的影响
• 4.3.5.4 γ-PGA对大鼠血液生化指标的影响
• 4.4 讨论
• 4.5 结论
• 参考文献
• 致谢