论文摘要
目的：采用核磁共振（NMR, nuclear magnetic resonance）和多元统计学相结合的代谢组学方法,研究针刺足三阳经合穴对健康青年男性血浆和尿液代谢物的改变,并初步提取与针刺效应明显相关的代谢标志物,为探讨合穴的代谢物质基础提供新的实验依据,为深入研究合穴理论及相应的针刺作用机理提供新的生物信息学线索。方法：40名健康男性青年随机分为足阳明经合穴“足三里”组,足少阳经合穴“阳陵泉”组,足太阳经合穴“委中”组和空白对照组,每组10例。除空白对照组外,其余各组分别针刺同一穴位双侧,得气后接电针,连续针刺5 d。于治疗结束后第2天清晨采集空腹静脉血获取血浆,同时收集晨尿。所有样本采用1HNMR进行检测,血浆样本分别进行驰豫编辑实验和扩散编辑实验,尿液样本进行常规1维氢谱检测。所得谱图积分后导入SIMCA-P10.0软件包进行主成分分析（PCA）和偏最小二乘法判别分析（PLS-DA），并结合正交信号校正（OSC）方法对数据进行分析。结果：多元统计学方法结果显示,足三里组、阳陵泉组、委中组血浆和尿液代谢物与空白对照组存在不同程度差异,足三里组、阳陵泉组与空白对照距离最远,提示针刺足三里和针刺阳陵泉对机体代谢影响最大；委中组与空白对照组存在重叠或距离相近的趋势,提示针刺委中对机体代谢影响不明显。采用因子载荷图对造成与空白对照组出现分离效应的代谢物进行分析后显示,针刺足三里或阳陵泉均可明显影响血浆小分子代谢物,其中乳酸（δ1.32,81.33）和糖类（δ3.48，δ3.71）的改变最为明显，足三里组糖类物质偏高,阳陵泉组乳酸偏高。针刺阳陵泉可以明显改变血浆大分子的含量,主要升高VLDL（δ1.26）,HDL（δ0.82,δ1.18,61.22）,VLDL/HDL（δ1.30）的含量。尿液研究结果显示,针刺阳陵泉使肌酐（63.06）明显偏高,马尿酸（δ7.82,84.06）、2-酮戊二酸（δ3.02）、氧化三甲胺（δ3.26、87.54）、3-羟基丁酸（δ3.98）则偏低；足三里组尿液代谢产物马尿酸、2-酮戊二酸、氧化三甲胺、3-羟基丁酸偏高,肌酐偏低。结论：1.用代谢组学检测技术结合多元统计学分析方法对健康青年男性血浆及尿液进行分析,能较好的区分出足三里组、阳陵泉组、委中组及空白对照组之间的差异。2.针刺足三里和阳陵泉能明显影响正常青年男性的血浆代谢物。针刺足三里主要影响血浆中的小分子代谢物,并且与能量代谢通路密切相关；针刺阳陵泉主要影响血浆代谢物中的大分子物质,与脂代谢、脂转运密切相关。3.针刺足三里和阳陵泉能明显影响肌酐和氧化三甲胺等普通尿液代谢物的含量,并且对肠道菌群与人共代谢的马尿酸的影响也较大。4.针刺委中对健康青年男性血浆和尿液代谢物影响均不明显。综上所述,本研究证实了针刺足三阳经合穴能对人体产生不同的调节作用,代谢组学检测技术和分析方法可以识别这种差异性。