论文摘要
卵巢组织的冷冻保存是在胚胎和卵母细胞冷冻保存的基础上建立的又一种保护动物遗传资源的方法。利用简捷有效的玻璃化冷冻保存技术,可以对突然死亡的珍稀物种或稀有突变体动物的卵巢予以及时的冻存,并在解冻后通过移植体外受精等技术获得该物种。卵巢组织冷冻保存技术在保持生物多样性方面具有重要意义,对胚胎工程学及生殖生物学的研究有着重要的意义。本研究采用乙二醇(EG)和二甲基亚砜(DMSO)混合作为玻璃化冷冻保护剂,将猪卵巢组织经过不同浓度的平衡液中处理后进行玻璃化冷冻保存,研究了不同的玻璃化冷冻法对猪卵巢冷冻保存后的组织学结构、卵泡的影响;同时,对冷冻保存的猪卵巢解冻后卵母细胞的存活率、体外受精后的卵裂、胚胎发育状况进行了研究。研究的主旨在于探讨卵巢组织玻璃化冷冻保存的方法和较理想的冷冻保护液,为濒危物种的卵巢冷冻技术奠定有效的技术方法和数据支持。通过研究,结果如下:1.玻璃化冷冻保存的猪卵巢组织形态学研究比较不同玻璃化冷冻方法对猪卵巢组织形态的影响。结果显示,冷冻保护剂处理的猪卵巢皮质部卵泡与新鲜卵巢皮质部卵泡的结构无明显差异,卵母细胞保持圆形,周围颗粒细胞形态正常;二步平衡