论文题目: 雷公藤红素对Th1/Th2模式调节的研究
论文类型: 硕士论文
论文专业: 外科学
作者: 杨震宇
导师: 李光辉
关键词: 雷公藤红素,模式,细胞,细胞,细胞因子
文献来源: 同济大学
发表年度: 2005
论文摘要: 目的：研究小剂量雷公藤红素对体外全血Th1／Th2模式（细胞因子IL-2，IL-4，IL-6，IL-10，INF-γ和TNF-a）的影响，探索开发新型器官移植免疫抑制剂。材料和方法：1．全血培养及药物处理志愿者为20—30岁之间的青年男性。于实验当天8时抽取志愿者外周静脉血3ml，肝素抗凝。采血后30分钟内进行培养，每培养管加入未经稀释但均匀混和的全血300μl，并加入不同剂量的雷公藤红素，使终浓度在10-11-10-5mmol／L之范围内，培养条件为5％CO2，37℃温湿环境。2．Th1／Th2因子检测（CBA分析）培养9小时后，离心收集上清。用CBA（cytometric beads array）进行Th1／Th2因子分析。首先将6种微球按每检测样本各10μl的量混合，每检测标本取混合微球50μl，加入检测抗体50μl，再加入50μl的不同浓度的标准品（倍比稀释的一个系列）或待测的实验品50μl，避光反应3h，用清洗液清洗后，上机进行检测。FL3区分微球，FL2用于检测各细胞因子含量。检测前用试剂盒中的荧光校正品校正设备的荧光补偿。3．数据分析和统计处理用BD公司BD 6 Beads Analysis软件进行数据处理。该软件首先建立标准曲线（标准品含量及荧光强度进行回归）。然后输入待测实验品的荧光强度，自动求出各实验品每种细胞因子的含量。对照品和不同浓度药物处理样本细胞因子含量进行配对样本t-检验。结果：不加任何刺激的人外周血培养9h后，经CBA检测，IL-6，IL-10，TNF-a和INF-γ在大多数自愿者的血标本中均能检测到出。而IL-2和IL-4含量低，基本不能检测到。对不同浓度(10-11-10-5mmol／L)红素处理标本进行分析，发现在上述浓度区间，该化合物对IL-6，IL-10和TNF-a的分泌有影响。主要表现为刺激作用，特别是IL-6和TNF-a。尽管随剂量增加，刺激作用呈现一定波动性，但以10-8mmol／L浓度红素刺激为最强。该浓度的红素使IL-6和TNF-a的分泌明显高于对照组。而INF-γ无明显变化。CBA分析能在同一标本中同时检测数种因子，对分析因子间相互关系非常有利。为此，我们进行了IL-6，IL-10和TNF-a相关性分析。结果表明TNF-a与IL-6，TNF-a与IL-10以及IL-6与IL-10之间呈现明显的正相关。结论：研究表明，在10-8mmol／L浓度，即比诱导凋亡低100倍的浓度，红素对不同细胞因子分泌有不同影响。尽管作为Th1因子的TNF-a和作为Th2因子的IL-6和IL-10均被刺激升高，但IL-6因子升高的幅度高于TNF-a，即Th2因子分泌更甚。在本次研究中，发现TNF-a和IL-6、IL-10含量呈现正相关。导致该现象原因不清，可能是其中一种因子升高，如TNF-a，导致另两种因子相应升高；也可能是三种因子都受控于另外尚未发现的同一种成分。
论文目录:
摘要
ABSTRACT
第1章 引言
第2章 材料和方法
2.1 实验细胞
2.2 主要试剂
2.3 主要仪器
2.4 红素的处理
2.5 全血培养及药物处理
2.6 Th1/Th2因子检测(CBA分析)
2.7 分析和统计处理
第3章 结果
3.1 不同浓度的红素处理后,全血细胞分泌IFN-γ的量变化不明显
3.2 不同浓度的红素处理后,全血细胞TNF-a的分泌增多
3.3 不同浓度的红素处理后,全血细胞IL-6的分泌增多
3.4 不同浓度的红素处理后,全血细胞IL-10的分泌增多
3.5 不同浓度的红素处理后,全血细胞IL-6的分泌与TNF-a的分泌呈现出平行关系
3.6 不同浓度的红素处理后,全血细胞IL-10的分泌与TNF-a的分泌呈现出平行关系
3.7 不同浓度的红素处理后,全血细胞IL-6,IL-10的分泌与TNF-a的分泌呈现出平行关系
第4章 讨论
4.1 雷公藤和器官移植
4.2 Th1/Th2模式和移植免疫
4.3 雷公藤红素对Th1/Th2模式的影响
第5章 结论
参考文献
图片
综述(一)
综述(二)
致谢
个人简历 在读期间发表的学术论文与研究成果
发布时间: 2007-12-28
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