李静:双功能尿苷酰转移/去除酶GlnD在谷氨酸棒杆菌JNR中的功能论文

李静:双功能尿苷酰转移/去除酶GlnD在谷氨酸棒杆菌JNR中的功能论文

本文主要研究内容

作者李静,徐美娟,舒群峰,赵雅雯,唐蜜,张显,杨套伟,许正宏,饶志明(2019)在《双功能尿苷酰转移/去除酶GlnD在谷氨酸棒杆菌JNR中的功能》一文中研究指出:【目的】通过改造谷氨酸棒杆菌JNR中双功能尿苷酰转移/去除酶GlnD,减弱尿苷酰去除酶的活性,增强NH4+的转运和利用,提高L-精氨酸的合成。【方法】本文对来源于谷氨酸棒杆菌的突变菌株JNR中的双功能尿苷酰转移/去除酶GlnD进行整合突变,采用同源重组的方法将H414和D415位点突变为两个丙氨酸AA,在此菌株的基础上过量表达PII蛋白GlnK,并对其进行尿苷酰化研究,离子色谱检测摇瓶发酵过程中NH4+的浓度,并对最终的改造菌株进行连续流加发酵分析。【结果】该双功能尿苷酰转移/去除酶在谷氨酸棒杆菌中成功进行整合突变,有效减弱了尿苷酰去除酶的活性;同时过表达PII蛋白GlnK,其酰基化程度明显增强。摇瓶发酵结果表明菌株L4消耗NH4+增加,L-精氨酸产量为36.2±1.2 g/L,比对照菌株L3高出22.7%。5-L发酵罐实验结果显示改造菌株L4的L-精氨酸的产量为52.2 g/L,较野生型菌株L0提高了25.3%。【结论】谷氨酸棒杆菌合成L-精氨酸的过程中氮源是必不可少的。减弱GlnD尿苷酰去除酶的活性后,胞内尿苷酰化的GlnK-UMP增加,GlnK-UMP与氮转录调控因子AmtR结合,转运至胞内的NH4+浓度提高,促使L-精氨酸产量显著提高。

Abstract

【mu de 】tong guo gai zao gu an suan bang gan jun JNRzhong shuang gong neng niao gan xian zhuai yi /qu chu mei GlnD,jian ruo niao gan xian qu chu mei de huo xing ,zeng jiang NH4+de zhuai yun he li yong ,di gao L-jing an suan de ge cheng 。【fang fa 】ben wen dui lai yuan yu gu an suan bang gan jun de tu bian jun zhu JNRzhong de shuang gong neng niao gan xian zhuai yi /qu chu mei GlnDjin hang zheng ge tu bian ,cai yong tong yuan chong zu de fang fa jiang H414he D415wei dian tu bian wei liang ge bing an suan AA,zai ci jun zhu de ji chu shang guo liang biao da PIIdan bai GlnK,bing dui ji jin hang niao gan xian hua yan jiu ,li zi se pu jian ce yao ping fa jiao guo cheng zhong NH4+de nong du ,bing dui zui zhong de gai zao jun zhu jin hang lian xu liu jia fa jiao fen xi 。【jie guo 】gai shuang gong neng niao gan xian zhuai yi /qu chu mei zai gu an suan bang gan jun zhong cheng gong jin hang zheng ge tu bian ,you xiao jian ruo le niao gan xian qu chu mei de huo xing ;tong shi guo biao da PIIdan bai GlnK,ji xian ji hua cheng du ming xian zeng jiang 。yao ping fa jiao jie guo biao ming jun zhu L4xiao hao NH4+zeng jia ,L-jing an suan chan liang wei 36.2±1.2 g/L,bi dui zhao jun zhu L3gao chu 22.7%。5-Lfa jiao guan shi yan jie guo xian shi gai zao jun zhu L4de L-jing an suan de chan liang wei 52.2 g/L,jiao ye sheng xing jun zhu L0di gao le 25.3%。【jie lun 】gu an suan bang gan jun ge cheng L-jing an suan de guo cheng zhong dan yuan shi bi bu ke shao de 。jian ruo GlnDniao gan xian qu chu mei de huo xing hou ,bao nei niao gan xian hua de GlnK-UMPzeng jia ,GlnK-UMPyu dan zhuai lu diao kong yin zi AmtRjie ge ,zhuai yun zhi bao nei de NH4+nong du di gao ,cu shi L-jing an suan chan liang xian zhe di gao 。

论文参考文献

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  • [4].固定化细胞转化阿糖尿苷合成阿糖腺苷[J]. 刘国生,焦璐,邢善涛,张建璀,曹倩.  中国医药工业杂志.2013(06)
  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自微生物学报的李静,徐美娟,舒群峰,赵雅雯,唐蜜,张显,杨套伟,许正宏,饶志明,发表于刊物微生物学报2019年11期论文,是一篇关于谷氨酸棒杆菌论文,双功能尿苷酰转移论文,去除酶论文,精氨酸论文,整合突变论文,微生物学报2019年11期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自微生物学报2019年11期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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