峨参的毒性及其提取物抗氧化活性和免疫作用观察

论文摘要

峨参,为峨参属植物的代表植物,以根、叶入药。作为峨眉山特产,是民间常用而疗效肯定的中草药和滋补品。本课题主要考察峨参的急性毒性,总黄酮提取工艺和体内外抗氧化作用,以及多糖的抗氧化作用和免疫调节作用。（1）本课题采用急性毒性预实验和最大耐受量实验,考察峨参水煎液和石油醚部位的急性毒性,结果表明峨参水煎液和石油醚部位的小鼠最大耐受量分别相当于体重为60kg的成人每日用量15g的200倍和1000倍,均具有安全性。（2）采用正交试验超声提取法,筛选峨参总黄酮的最佳提取工艺,以L9（34）正交表安排试验,最佳提取工艺参数为：超声时间为75min,乙醇浓度为60%,料液比为1：15。（3）采用体外Fenton法产生羟基自由基模型,通过邻苯三酚自氧化体系测定超氧阴离子抑制率,以及体内颈部皮下注射D-半乳糖造小鼠衰老模型,考察峨参总黄酮体内外抗氧化活性。结果证明峨参总黄酮有较好的羟基自由基清除效果和超氧阴离子抑制效果,且均随浓度的增加而增强,浓度为880μg/ml处,清除率和抑制率分别为32.88%和24.87%。峨参总黄酮作用于D-半乳糖造小鼠衰老,结果表明峨参总黄酮高剂量组能显著降低脾脏和肝脏的MDA含量,增强脾脏和肝脏的SOD活性。（4）通过邻苯三酚自氧化体系,研究峨参多糖的超氧阴离子抑制效果,峨参多糖浓度为1mg/ml时抑制率达31.22%,表明峨参多糖有较好的抗自由基作用。采用小鼠碳粒廓清法,测定峨参多糖对非特异性免疫功能的影响,结果表明峨参多糖的高、中剂量均能显著增加小鼠的免疫器官脾脏指数、肝脏指数、廓清指数和吞噬指数。峨参水煎液和石油醚部位在考察浓度范围内安全无毒性；峨参总黄酮具有较好的体内外抗氧化作用；峨参多糖具有较好的体外抗氧化作用和免疫调节作用。本实验可以为进一步研究峨参的药效作用及物质基础以及开发提供一定的参考。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 绪论
• 1.1 课题研究的背景及意义
• 1.2 国内外研究现状
• 1.3 本文研究的主要内容和方法
• 1.3.1 本文研究的主要内容
• 1.3.2 本文研究的主要方法
• 1.4 峨参的研究概况
• 1.4.1 峨参植物
• 1.4.2 峨参化学成分研究
• 1.4.3 峨参的药理作用
• 1.4.4 其他
• 1.5 急性毒性试验概述
• 1.6 衰老概述
• 1.6.1 中医学对衰老的认识
• 1.6.2 现代科学对衰老的认识
• 1.6.3 衰老模型
• 1.7 抗氧化概述
• 1.7.1 自由基的生成
• 1.7.2 自由基的损害作用
• 1.7.3 体内自由基的清除
• 1.7.4 黄酮和多糖抗氧化活性研究
• 1.8 多糖免疫作用研究概述
• 第2章 峨参的急性毒性试验
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 实验动物
• 2.1.2 实验药物
• 2.1.3 实验主要仪器
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 预实验
• 2.2.2 最大耐受量测定
• 2.2.3 观察指标
• 2.2.4 统计学方法
• 2.3 实验结果
• 2.3.1 小鼠的外观表现
• 2.3.2 小鼠的体重变化
• 2.4 分析
• 2.5 讨论
• 第3章 峨参总黄酮提取工艺
• 3.1 实验材料
• 3.1.1 实验药材与试剂
• 3.1.2 实验主要仪器
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 正交试验设计
• 3.2.2 超声波提取方法
• 3.2.3 峨参总黄酮含量测定
• 3.2.4 精密度试验
• 3.2.5 重现性试验
• 3.2.6 稳定性试验
• 3.2.7 回收率试验
• 3.3 实验结果
• 3.3.1 标准曲线
• 3.3.2 峨参总黄酮含量
• 3.3.3 精密度
• 3.3.4 重现性
• 3.3.5 稳定性
• 3.3.6 回收率
• 3.4 分析
• 3.5 讨论
• 第4章 峨参总黄酮的体外抗氧化作用
• 4.1 实验材料
• 4.1.1 实验主要药物与试剂
• 4.1.2 实验主要仪器
• 4.2 实验方法
• 4.2.1 清除羟基自由基
• 4.2.2 抑制超氧阴离子
• 4.3 实验结果
• 4.3.1 羟基自由基清除率
• 4.3.2 超氧阴离子抑制率
• 4.4 分析
• 4.5 讨论
• 第5章 峨参总黄酮对D-半乳糖致衰老小鼠的体内抗氧化作用
• 5.1 实验材料
• 5.1.1 实验动物
• 5.1.2 实验试剂
• 5.1.3 实验主要仪器
• 5.1.4 实验药物
• 5.2 实验方法
• 5.2.1 D-半乳糖致衰老模型
• 5.2.2 统计学方法
• 5.3 实验结果
• 5.3.1 脾脏的MDA含量、SOD活性
• 5.3.2 肾脏的MDA含量、SOD活性
• 5.4 分析
• 5.4.1 峨参总黄酮对D-半乳糖致衰老模型脾脏的影响
• 5.4.2 峨参总黄酮对D-半乳糖致衰老模型肾脏的影响
• 5.5 讨论
• 第6章 峨参多糖的含量测定与抗氧化作用
• 6.1 实验材料
• 6.1.1 实验主要药品与试剂
• 6.1.2 实验主要仪器
• 6.2 实验方法
• 6.2.1 多糖的含量测定
• 6.2.2 抑制超氧阴离子
• 6.3 实验结果
• 6.3.1 标准曲线
• 6.3.2 峨参多糖含量
• 6.3.3 超氧阴离子抑制率
• 6.4 分析
• 6.5 讨论
• 第7章 峨参多糖免疫调节作用
• 7.1 实验材料
• 7.1.1 实验主要试剂与药品
• 7.1.2 实验动物
• 7.1.3 实验主要仪器
• 7.2 实验方法
• 7.2.1 实验具体操作方法
• 7.2.2 统计学方法
• 7.3 实验结果
• 7.3.1 峨参多糖对小鼠免疫器官的影响
• 7.3.2 峨参多糖对小鼠的碳粒廓清能力
• 7.4 分析
• 7.5 讨论
• 结论
• 致谢
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文