拟南芥miRNA172a-1/b-2/c对多种胁迫响应的研究

论文摘要

现有研究表明拟南芥中miRNA172参与光周期通路而调节植物的开花时间,其靶基因为APETALA2-Like基因,包括AP2,TOE1,TOE2等基因。过表达miRNA172会导致植物提前开花,与ap2突变体的表型一致。植物在恶劣环境影响下一般会提前开花,miRNA172是否参与肋、迫响应下的开花调节,目前还未见报道。启动子分析发现拟南芥miRNA172各个成员的启动子均包括多个胁迫响应元件,半定量RT-PCR表明miRNA172a-1受甘露醇和LiCl诱导。通过在拟南芥中分别过表达miRNA172a-1/b-2,转基因植株均比野生型侧根数量多,植物生长受抑不显著,说明它们可能参与了这两种胁迫的响应。半定量与电导率分析表明miRNA172c则受干旱诱导。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 引言
• 1 microRNA
• 1.1 microRNA概述
• 1.2 microRNA与非生物胁迫之间的关系
• 1.3 microRNA调控植物的生长发育
• 2 miR172的研究状况及意义
• 3 前期研究
• 第二章 材料与方法
• 1 材料
• 1.1 拟南芥
• 1.2 菌株和载体
• 1.3 试剂和仪器
• 2 方法
• 2.1 RT-PCR研究目标基因的表达模式
• 2.2 植物表达载体的构建和拟南芥的转化
• 2.3 拟南芥的胁迫处理实验
• 2.4 PEG处理后的电导率的测定
• 第三章 结果
• 1 miRNA172a-1/b-2/c序列的比对与聚类分析
• 2 AtmiR172a-1/a-2/b-1/b-2/c前体均含有胁迫响应元件
• 3 AtmiR172s不同成员在不同胁迫条件（2 h）下受到诱导
• 4 miR172a-1/b-2参与拟南芥对LiCl,Mannitol胁迫的响应
• 5 AtmiR172c受到干旱胁迫的显著性诱导
• 第四章 讨论
• 1 miR172的功能
• 2 小结
• 附录 水稻花发育相关基因的克隆和研究
• 第一章 引言
• 第二章 材料和方法
• 1 材料
• 1.1 植物材料
• 1.2 菌株和载体
• 1.3 试剂和仪器
• 2 方法
• 2.1 基因序列的比对及聚类分析
• 2.2 洋葱表皮细胞定位实验
• 2.3 Real-time PCR研究目标基因的表达模式
• 2.4 植物表达载体的构建和水稻的转化
• 2.5 农杆菌介导水稻转基因
• 2.6 转基因水稻阳性植株筛选
• 2.7 水稻OsAIL5基因激素诱导表达模式
• 2.8 水稻OsAIL5基因不同胁迫诱导表达模式
• 2.9 原位杂交
• 第三章 结果
• 1 基因序列的比对、聚类分析及进化分析
• 1.1 基因序列的比对
• 1.2 基因序列的聚类进化分析
• 2 载体构建
• 2.1 OsAIL基因的获得
• 2.2 OsAIL5-pCAMBIA1304载体的构建
• 2.3 将OsAIL5-pCAMBIA1304表达载体构建到农杆菌EHA105中
• 3 OsAIL5的亚细胞定位
• 4 OsAIL5在水稻不同器官中的表达谱
• 4.1 利用Real-time分析OsAIL5在水稻不同器官中的表达谱
• 4.2 利用原位杂交分析OsAIL5在水稻不同器官中的表达谱
• 5 不同激素处理,日本晴OsAIL5基因的表达谱
• 6 不同胁迫处理下,日本晴OsAIL5基因的表达谱
• 7 转基因水稻OsAIL5阳性植株筛选
• 第四章 讨论
• 参考文献
• 发表论文及专利
• 致谢