新疆部分地区绵羊及相关环境肠球菌的生态分布及部分生物特性研究

论文摘要

肠球菌（Enterococcus）是人类和动物肠道的正常菌群,通常不引起发病,但近年研究已证实肠球菌可引起人及动物致病,美国医院感染监视系统（NISS）已将其列为引起医院感染的第二大病原菌。近几年,新疆部分地区规模化养羊场新发生了一种由肠球菌感染所致的羔羊脑炎,齐亚银等对致羔羊脑炎肠球菌的生物学特性进行了研究。本研究为了了解新疆部分地区肠球菌的生态分布以及其与致病肠球菌生物特性的差异,从新疆生产建设兵团农五师84团羊场与90团羊场、农八师142团羊场、新业羊场、西部牧业及农七师129团羊场健康绵羊的鼻拭、肛拭、粪便、青贮、棉籽壳、饮水以及周围环境中的土壤等样本中分离肠球菌;对其与致羔羊脑炎肠球菌进行了生物学特性对比以及针对能够致小白鼠死亡的肠球菌分离株进行PCR检测毒力因子esp和gelE基因。结果如下:1.共检测470个样本,分离得到75株革兰氏阳性、成双或链状排列的球菌,经培养特性、生化特性鉴定,并针对肠球菌高保守的特异性tuf基因设计的特异性引物对这75株分离株进行PCR扩增,对扩增产物进行分析,结果有4株为非肠球菌,其余71株均为肠球菌。结果表明羊体及其周围环境中肠球菌分布率达15.1%。其中在粪便中带菌率较高,其次是土壤及健康绵羊肛拭。2. 71株肠球菌分离株链球菌乳胶凝集分型结果表明:63株分离株血清型为常规的兰氏D型,8株分离株血清型为C型;而致羔羊脑炎肠球菌多数为D型,还有G型和未定型。3.检测71株肠球菌分离株的溶血性,采用K-B法检测β-溶血肠球菌、非β-溶血肠球菌对10种抗生素的敏感性,同时进行小白鼠致病力试验。结果表明59.2%肠球菌分离株溶血;β-溶血株对抗生素的耐药性明显高于非β溶血株;其中有7株肠球菌分离株导致小白鼠死亡,分别为84团及129团分离株,均为绵羊羊体溶血性肠球菌分离株。4.根据GenBank中肠球菌主要毒力因子表面蛋白（esp）和明胶酶（gelE）的基因序列设计引物,对7株致小白鼠死亡的肠球菌分离株进行PCR检测,同时随机从84团及129团各抽取3株环境中正常肠球菌分离株及1株正常肠球菌标准菌株作对照。结果7株致小白鼠死亡的肠球菌分离株中有3株含有明胶酶（gelE）毒力因子,不含有表面蛋白（esp）毒力因子,其余4株均不含这两种毒力因子;环境中正常肠球菌分离株和肠球菌标准菌株均不含这两种毒力因子。本研究首次对新疆部分地区健康绵羊羊体及其周围环境中肠球菌进行了生态学初步研究,为进一步探讨绵羊肠球菌感染的机制提供了重要的理论素材,同时也为肠球菌感染的防治工作提供了重要依据,并为制备适合本地区高效的羔羊肠球菌菌苗提供了科学根据和理论指导。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 第一章 文献综述
• 1 肠球菌生物学特性及分类
• 2 肠球菌的分布及流行病学
• 3 肠球菌的实验室检测方法
• 4 肠球菌的致病机理
• 5 肠球菌的耐药机制
• 6 肠球菌感染的防治工作
• 7 展望
• 第二章 试验部分
• 试验一 绵羊及其环境中肠球菌生态分布的调查
• 1 材料与方法
• 2 结果与分析
• 3 讨论
• 试验二 肠球菌分离株的血清学分型试验
• 1 材料与方法
• 2 结果与分析
• 3 结论
• 试验三 肠球菌分离株的溶血性、耐药性与致病性的关系
• 1 材料与方法
• 2 结果与分析
• 3 讨论
• 第三章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介
• 导师评阅表