枇杷花醇提物镇咳、平喘、祛痰作用及其机制研究

论文摘要

目的:本文旨在探讨枇杷花醇提物（Flower of Eriobotrya japonica, FEJ）的镇咳、平喘、祛痰作用及其作用机制,为临床用药提供实验依据。方法:1. FEJ镇咳、祛痰、平喘作用的实验研究。①采用氨水喷雾法,记录小鼠咳嗽潜伏期以及3分钟内的咳嗽次数。②采用枸橼酸喷雾法,记录豚鼠咳嗽潜伏期以及5分钟内的咳嗽次数。③采用气管酚红法,比较各给药组之间酚红排泌量的差异。④采用乙酰胆碱（acetylcholine bromide, Ach）和磷酸组胺（histamine phosphate, His）喷雾致喘法,记录豚鼠的引喘潜伏期。2. FEJ镇咳、平喘、祛痰作用的机制研究,①采用辣椒素刺激C-纤维释放P物质和抑制敏感性K+ （ATP K+）通道观察FEJ外周镇咳作用机制。②采用二甲苯致小鼠耳缘肿胀法,观察FEJ抗炎作用。③采用卵蛋白（Ovalbumin, OVA）致敏激发小鼠哮喘模型,肺组织灌洗液（Bronhial alveolar lavage fluid, BALF）涂片计数嗜酸性粒细胞（Eosinophiles, EOS）;测肺组织匀浆液一氧化氮（Nitric Oxide, NO）含量;酶联免疫法（ELISA）测定小鼠血清中白细胞介素8 （Interleukin8, IL-8）、白细胞介素10 （Interleukin 10, IL-10）的含量;苏木素-伊红（Hematoxylin-Eosin, HE）染色,比较小鼠支气管及其周围组织形态学的改变,免疫组化法检测NF-κBp65的表达。结果:1. FEJ镇咳、平喘、祛痰作用的整体动物实验研究,①镇咳作用:FEJ明显减少小鼠和豚鼠的咳嗽次数（P<0.01）;明显延长咳嗽潜伏期（P<0.01）。②祛痰作用:FEJ能显著增加小鼠酚红排泌量（即气管段排痰量）,（P<0.05）。③平喘作用,FEJ明显延长2%Ach和0.1%His等量混合液诱导的豚鼠哮喘潜伏期（P<0.05）,抑制哮喘反应级数,具有明显的平喘作用。2. FEJ对C-纤维释放P物质有显著影响;FEJ可能并非通过ATP敏感性K+通道途径发挥作用。3. FEJ明显减少小鼠耳缘肿胀度;小鼠鼠模型支气管和肺组织形态学观察,FEJ高、中、低剂量组不同程度减轻小鼠支气管、肺组织炎症反应,使管腔内渗出物、基底膜增生、支气管壁粘膜破损和炎性细胞减少,具有明显抗炎作用。FEJ明显降低小鼠血清IL-8,提高IL-10的含量（P<0.05）;FEJ明显降低肺组织NO含量,小鼠BALF中EOS数目显著减少（P<0.01）;免疫组化结果,FEJ明显降低小鼠支气管及肺组织NF-кBp65的表达水平（P<0.01）。结论:结果提示,FEJ在整体水平具有镇咳、平喘、祛痰作用,其作用机制可能通过降低小鼠血清中致炎因子IL-8水平,提高IL-10的释放,减少组织NF-κBp65的表达,并通过影响信号分子NO,减少炎症介质释放,从而减轻支气管、肺组织炎症反应。实验结果为枇杷花的临床应用提供了实验依据。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 第一部分 枇杷花醇提物止咳平喘药效研究
• 1. 材料与方法
• 1.1 主要仪器
• 1.2 药物及试剂
• 1.3 实验动物及环境
• 1.4 实验方法
• 1.5 统计学处理
• 2. 结果
• 3. 小结
• 第二部分 枇杷花醇提物止咳平喘作用机制研究
• 1. 材料与方法
• 1.1 主要仪器
• 1.2 药物及试剂
• 1.3 实验动物及环境
• 1.4 实验方法
• 1.5 统计学处理
• 2 结果
• 3 小结
• 讨论
• 结论
• 研究生期间发表的文章
• 参考文献
• 英文缩略词表
• 综述
• 参考文献
• 致谢