甲基强的松龙对脊髓损伤后卵磷脂胆固醇脂酰转移酶、甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶基因的表达影响

论文摘要

随着现代交通和工业的发展,脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）的发生也呈逐年增加趋势。脊髓损伤除包括致伤因素造成的原发性损伤外,更重要的是损伤后继发性病理生理改变所造成的继发性损伤。因此,如何减少或预防继发性损伤进而促进损伤脊髓结构及功能的重建是基础研究的热点问题。目前对继发性脊髓损伤中的一些分子和细胞的变化机制还未完全阐明。但大量证据证明了,脊髓损伤早期产生的自由基及脂质过氧化反应即是继发病理损害发生的主要因素。卵磷脂胆固醇脂酰转移酶可促进组织、细胞内胆固醇的清除、维持细胞胆固醇稳态,在磷脂代谢中有重要的作用。神经细胞损伤后,在局部可引起炎症反应,趋化因子吸引更多的炎症细胞以及小胶质细胞、星形胶质细胞的激活和聚集。这有利于清除死亡组织及细胞碎屑为神经再生创造条件;但同时由于活化的小胶质细胞、星形胶质细胞的增多,导致过度胶质化,局部形成胶质瘢痕,成为轴突再生的一个机械屏障。甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶能特异地水解N-2末端为甘氨酰-脯氨酰的肽键,而胶质瘢痕中恰恰富含这种结构成份,因此推测甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶在胶原肽的降解中起到作用。人们对急性脊髓损伤的药物治疗进行了研究。经过大量临床研究表明,大剂量甲基强的松龙疗法被作为是急性脊髓损伤的标准治疗方案。本文对脊髓损伤早期后卵磷脂胆固醇脂酰转移酶和甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶2个基因的表达变化进行研究,并探讨早期应用甲基强的松龙对其基因表达的影响。分为2个部分。第一部分甲基强的松龙对脊髓损伤后LCAT基因表达的影响目的研究甲基强的松龙对脊髓损伤后卵磷脂胆固醇脂酰转移酶基因表达的影响。方法SD大鼠30只,体重200～250g,雌雄不拘。随机分为假手术组、单纯脊髓损伤组（损伤组）、脊髓损伤+大剂量甲基强的松龙组（甲基强的松龙组）。每组10只。损伤后24小时将损伤平面上下0.5cm的脊髓组织切取,进行RT-PCR反应。结果假手术组在术后24小时LCATmRNA的表达的相对丰度为0.6743±0.0043,损伤组在伤后24小时LCATmRNA的表达的相对丰度降至0.0589±0.0281,差异有非常显著性（P<0.01）。甲基强的松龙组在伤后24小时LCATmRNA的表达的相对丰度为0.7036±0.2225,与损伤组比较差异有显著性（P<0.01）。结论大剂量甲基强的松龙能促进LCAT的表达,发挥保护作用,减少脊髓继发损伤。第二部分脊髓损伤早期甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶表达及甲基强的松龙对其表达的影响目的:研究脊髓损伤后甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶的基因表达,并探讨甲基强的松龙对其表达的影响。方法:SD大鼠30只。随机分为假手术组、单纯脊髓损伤组（损伤组）、脊髓损伤+大剂量甲基强的松龙组（甲基强的松龙组）。应用改良的Allen打击法致T8脊髓损伤。甲基强的松龙组大鼠尾静脉内注射大剂量甲基强的松龙（30mg/kg）。损伤后24小时将损伤平面上下0.5cm的脊髓组织切取,进行RT-PCR反应。检测甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶的基因表达。结果:假手术组在术后24小时甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶mRNA的表达的相对丰度为1.5809±0.1554,损伤组在伤后24小时甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶的表达的相对丰度下降为0.6605±0.3366,是假手术组的1/2倍,差异有非常显著性（p<0.01）。甲基强的松龙组在伤后24小时甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶mRNA的表达的相对丰度明显升高为1.8502±0.0.1314,与损伤组比较差异有非常显著性（p<0.01）,并且表达高于假手术组。结论:脊髓损伤后,细胞合成质膜钙ATP同工酶2明显降低,早期应用大剂量甲基强的松龙能显著促进并逆转甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶的表达的丰度,发挥细胞保护作用。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 第一部分 甲基强的松龙对脊髓损伤后卵磷脂胆固醇脂酰转移酶基因表达的影响
• 材料方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 第二部分 脊髓损伤后的甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶的表达及甲基强的松龙对其表达的影响
• 材料方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 全文结论
• 综述 脊髓继发损伤的研究进展
• 致谢