论文摘要
第一部分大鼠生后生长方式【目的】通过大鼠生后体重、身长、尾长连续性测量数据,探讨大鼠生后生长方式。【材料与方法】采用10窝新生SD大鼠,每窝保留8只,从出生到生后27天,每天测量其体重、身长和尾长生长指标,准确记录出生时间、测量时间。用SAS软件对数据进行分析,获得大鼠生后生长变化曲线图,同时分析体重、身长和尾长生长速度的变化。在饲养过程中,有部分幼鼠死亡,为保证其正常生长,在生后1213天,对母鼠进行营养补充。【结果】(1)母鼠补充营养后无幼鼠死亡发生,幼鼠生长较补充前改善,特别是体重的生长;(2)出生时,不同性别和窝别间的大鼠体重、身长和尾长均有显著性差异,雄鼠比雌鼠体重更重、身长更长,体重及身长的差值分别为0.335 g(t=-4.17,P=0.0002)和0.114 cm(t=-3.03,P<0.005),而雌鼠尾长比雄鼠长0.043 cm(t=2.15,P<0.04); (3)生后27天内,大鼠的体重、身长和尾长随时间的增加而增加,其生长速度变化时间不同,体重的生长速度从生后第2天开始增加,第3、15、25、27天速度明显增加,身长生长速度从第8天开始缓慢上升,第17天和25天出现明显增加,尾长从生后第2天开始增加,第3、7、18天出现明显增加,第22天以后速度基本呈一条直线;(4)生后第3天,体重、尾长的速度改变明显,其加速度值为正值且具有统计学意义,而身长速度没有出现有意义的改变。体重加速度在第25天最大,其次为第27天;身长的速度变化值在第17天和25天接近,均为有统计学意义的正值;尾长加速度具有统计学意义的正值较接近,最大值出现在第18天。【结论】(1)大鼠体重生长对营养因素最敏感,尾长生长受营养因素影响最小;(2)大鼠生后体重、身长、尾长生长方式不同,尾长最早出现生长速度明显增加;(3)SD大鼠的青春前期依据尾长的生长情况可能在18天出现,依据体重、身长的生长可能在25天出现;(4)SD大鼠可能在生后3天左右出现“儿童期”。第二部分IGF-I在大鼠“儿童期”出现中的作用【目的】探讨IGF-I在大鼠“儿童期”出现中的作用。【材料与方法】采用30窝新生SD大鼠,每窝8只。从出生至生后7天,每天测量体重、身长和尾长生长指标,同时随机从每窝取出1只心脏取血处死。血浆IGF-I水平采用ELISA测定,软骨细胞周期分布采用流式细胞仪测定,生长板软骨细胞增殖层和肥大层高度应用Simple PCI图象分析软件在生长板HE染色图像上测量。【结果】(1)大鼠体重速度从生后第2天开始快速增加,身长速度从生后第3天开始增加,尾长速度从生后第2天开始缓慢增加,三者均在生后第5天达到最大值;(2)大鼠体重速度变化在生后第36天具有统计学意义,第6天加速度为负值,身长速度变化在生后第4、6、7天有统计学意义,第6、7天加速度为负值,尾长速度变化在第3、5天具有统计学意义;(3)大鼠生后7天内血浆IGF-I的浓度随年龄的增加而增加,第3、4、6天增加明显,第4、6天的增加值具有统计学意义;(4)出生时IGF-I与尾长呈正相关(P<0.02),与体重、身长无相关(P﹥0.1)。(5)生后7天内,IGF-I与体重、身长和尾长呈正相关,相关系数范围0.340.40(P﹤0.0001),与体重速度呈正相关(r=0.16,P=0.02),IGF-I的变化与体重、体重速度、身长呈正相关,相关系数分别为0.15(P=0.02),0.16(P=0.01);(6)体重与身长、尾长呈正相关,相关系数分别为0.89和0.87(P<0.0001),身长与尾长也呈正相关(r=0.94,P<0.0001);(7)胫骨近端软骨细胞G0-G1期的比例在生后7天内逐渐升高,S期的比例则逐渐下降;(8)胫骨近端生长板肥大层软骨细胞体积在第3、4、6天增大明显,其高度逐渐增加,与IGF-I浓度变化趋势相似,而增殖层软骨细胞高度逐渐减小;(9)胫骨近端生长板肥大层高度与IGF-I呈正相关(r=0.35,P=0.01),与体重、身长和尾长明显呈正相关,相关系数范围0.730.81(P﹤0.0001);(10)胫骨长度、胫骨骨重、胫骨近端骨骺高度、宽度与体重、身长、尾长呈明显正相关,相关系数在0.810.99之间(P<0.02),胫骨长度与其近端骨骺宽度、骨重、近端生长板肥大层高度、近端骨骺高度呈正相关(r﹥0.86,P﹤0.005),胫骨近端骨骺宽度与其骨重、近端生长板肥大层高度、近端骨骺高度呈正相关(r﹥0.91,P﹤0.001),胫骨骨重与其近端生长板肥大层高度、近端骨骺高度也明显呈正相关(r﹥0.86,P﹤0.005),胫骨近端生长板肥大层高度与胫骨近端骨骺高度同样呈明显正相关(r=0.94,P=0.0006)。【结论】(1)再次证实SD大鼠在生后3天左右出现“儿童期”,即此时间可能是大鼠生后生长调节机制转换的时间,大鼠“儿童期”出现可能主要由IGF-I调节,IGF-I可能是调节大鼠生后线性生长调节机制转换的主要因子之一;(2)大鼠在生后1周内,骺端的软骨生长可能是以软骨膜下生长方式为主,因此用细胞周期检测大鼠胫骨近端生长板软骨细胞生长情况的方法不太实用;(3)胫骨近端生长板肥大层软骨细胞与长骨生长、线性生长关系密切。
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