论文摘要
信号转导途径集中在转录水平对细胞进行调控,通过转录激活特异基因的表达对抗环境刺激因子的作用。结合基因调控区的特异转录因子的激活或协同表达调节这些信号途径起始的转录。对这些转录因子的结构和功能的研究为转录激活机制提供了新的视点。哺乳动物CREB/ATF转录因子家族是一个碱性区-亮氨酸拉链（basic-region leucine zipper,bzip）蛋白大家族,参与细胞增殖和分化、胚胎发育、学习记忆和肿瘤发生等多种生理过程。 CREB4是CREB/ATF转录因子家族的新成员。人肿瘤MTC panel结果显示,CREB4在人肺癌LX-1,结肠腺癌CX-1,前列腺癌PC-3,结肠癌G1-112和胰腺癌G1-103中有表达,而在乳腺癌GI-101、卵巢癌组织GI-102和肺癌组织GI-117中未检测到特异性条带。提示CREB4在人多种肿瘤组织的基因表达调控中起作用。与正常组织表达谱比较发现,CREB4在人正常肺组织和结肠组织中并没有转录物,而在肺癌组织（LX-1）、结肠腺癌组织（CX-1）和结肠癌组织（GI-112）中有明显的表达,提示CREB4可能与肺癌、结肠癌和结肠腺癌的分化有关,但结果需进一步的研究证实。 亚细胞定位显示,全长CREB4蛋白定位于细胞质,而缺失C端假定跨膜结构域的CREB41-279aa蛋白突变体则转移至细胞核内,说明CREB4从细胞质到细胞核的转移需要CREB4 C端的剪切,暗示CREB4的C端跨膜结构域与其从细胞质到细胞核的转移有关。 构建表达CREB4-LexA和CREB215-395aa-LexA的pLexA融合质粒分别转化含p8opLacZ报告质粒的酵母EGY48菌株,诱导表达后发现CREB4全长蛋白自身具有激活下游报告基因转录的功能,而缺失N端的CREB215-395aa蛋白则不再具有自激活功能。暗示CREB4为转录激活因子,N端决定其转录激活活性。 经酵母双杂交筛选人胎脑文库发现与CREB4215-279相互作用的蛋白核孔复合物相关蛋白TPR和kayopherin α2（KPNA2）。TPR为核孔复合物相关蛋白;KPNA2与细胞质和细胞核之间的物质转运有关,参与受体介导的Karyopherin α2β1途径,协助大分子蛋白从细胞质到细胞核的运输。提示TPR和KPNA2蛋白可能参与CREB4的跨膜转运过程。
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