P2X7受体介导的HEK293细胞活化与凋亡机理研究

论文摘要

嘌呤受体分为P1和P2两大类。P1受体主要由A（腺苷）激活,P2受体主要由ATP等激活。P2受体主要又分为P2X和P2Y。P2X受体家族是一类对钾、钠和钙可通透的离子通道,P2Y受体家族是与G-蛋白相偶连的受体,与磷脂酶C的激活和肌醇三磷酸的形成有关。目前已克隆出7个不同的P2X亚型,分别称为P2X1-7,P2X7又称P2Z。P2X7受体特性与其他六个亚型不同;体外电生理实验表明ATP短暂刺激该受体可引起非选择性小阳离子瞬时通透;如果ATP反复或持续刺激该受体既可引起非选择性质膜孔道开放,最终导致细胞凋亡。虽然P2受体广泛地分布机体各组织器官,以往认为P2X7是唯一被证实分布于小胶质细胞的P2嘌呤受体。目前免役组织化学一般检测不出来,正常条件下免疫组织化学显示出的阳性细胞一般为神经细胞,而且比较浅淡。细胞外ATP可通过P2X受体可以激活胶质细胞。在体内,细胞外ATP浓度很低,不足以激活胶质细胞,表达更多的P2X受体。而细胞内ATP浓度较高,后者是前者的1000倍,达毫摩尔水平。在某些病理条件下如脑外伤、缺血、炎症等局部细胞受到损伤而释放出大量ATP及降解产物,它们在局部的浓度很高,而且会向邻近区域扩散,它们将较长时间地刺激损伤区和其邻近区的胶质细胞,这足以激活胶质细胞,并使其P2X受体表达上调。小胶质细胞激活后可肥大、增生,形成典型的吞噬细胞,可产生许多生物活性物质如活性氧、一氧化氮、蛋白酶及一些炎性物质对周围细胞产生损害作用;但另一方面又产生转化因子beta 1和神经生长因子等物质促进神经组织再生及修复。活化的小胶质细胞在脑外伤、缺血、炎症、AIDS、多发性硬化病、蛋白病毒病、退行性病变如Alzheimer及Parkinson氏病以及衰老等过程中起很重要的作用。 尽管上述病理过程均与小胶质细胞活化有关,但小胶质细胞被激活的机制还不太清楚。综合本研究和以往文献资料,P2X7参与小胶质细胞的激活和凋亡效应。如果用特异性拮抗剂阻断ATP的作用,将阻止小胶质细胞和星形胶质细胞激活后所带来的对周围组织细胞的损害作用和胶质疤痕的形成,从而保护脑组织不受进一步的损害或有利神经纤维的再生。

论文目录

• 英文缩略词
• 中文摘要
• Abstract
• 前言
• 第一部分 单克隆化的稳定转染P2X7受体的HEK293细胞模型的建立
• 第二部分 ATP刺激P2X7受体介导的相关基因表达谱研究
• 第三部分 ATP刺激P2X7受体介导的相关蛋白表达谱研究
• 总结
• 综述
• 论文发表情况
• 致谢